تحريض التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي في نموذج الفأر

ابدأ بحقن مستحلب يحتوي على ببتيد عصبي ومساعد بكتيري مقتل بالحرارة تحت الجلد في فأر مخدر.

في الأنسجة تحت الجلد ، يجذب المساعد الخلايا العارضة للمستضد ، أو APCs ، التي تعالج وتقدم الببتيدات العصبية على مجمعات التوافق النسيجي الرئيسية.

تصل APCs المنشطة إلى الغدد الليمفاوية وتتفاعل مع الخلايا التائية الساذجة ، مما يؤدي إلى تمايزها إلى خلايا تائية ذاتية التفاعل.

هذه الخلايا التائية تدور وتصل إلى الحاجز الدموي الدماغي أو BBB.

بعد ذلك ، قم بحقن السموم الخارجية المشتقة من البكتيريا داخل الصفاق

تصل السموم الخارجية إلى BBB ، مما يزيد من نفاذيتها ويسمح بتسلل الخلايا التائية إلى الجهاز العصبي المركزي (CNS).

في الجهاز العصبي المركزي ، تتفاعل الخلايا التائية مع APCs المقيمة التي تقدم الببتيد العصبي ، مما يعزز إطلاق السيتوكين الذي يحفز المزيد من تسلل الخلايا المناعية.

تطلق الخلايا المناعية السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، مما يتسبب في تلف المايلين.

بالإضافة إلى ذلك ، تتفاعل الخلايا البائية مع الخلايا التائية وتفرز أجساما مضادة ذاتية تزيد من إتلاف المايلين ، مما يؤدي إلى التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي (EAE).

في هذا الإجراء ، قم بإذابة PTX بمعدل 2 ميكروغرام لكل مليلتر في 1x PBS ، واخلطه جيدا. بعد ذلك ، قم بحقن 100 ميكرولتر من PLP / CFA في الفئران تحت الجلد ، مرتين في قاعدة الذيل أثناء تخدير الأيزوفلوران القصير. لا تحقن في مؤخرة الرقبة ، لأن أي تفاعلات مناعية في الجلد في الجزء العلوي من الظهر أو الرقبة ستزعج تصوير الرأس والحبل الشوكي.

بعد ساعة إلى ساعتين من التحصين ، قم بحقن 100 ميكرولتر من PTX في الفئران داخل الصفاق

ثم ، بعد 24 ساعة من التحصين ، حقن الفئران ب 100 ميكرولتر من PTX مرة أخرى. بالنسبة للفئران الضابطة ، قم بحقن 100 ميكرولتر من CFA بدون PLP مرتين ، عند قاعدة الذيل.