التصوير بفاصل زمني لمراقبة الانتشار عبر الخلايا للبروتينات الشبيهة بالبريون في الديدان الخيطية المعدلة وراثيا

خذ الديدان الخيطية المعدلة وراثيا التي يتم الحفاظ عليها في نفس مرحلة النمو.

تعبر خلايا عضلة جدار الجسم لهذه الديدان الخيطية عن بروتينات شبيهة بالبريون ، والتي يتم تمييزها ببروتين فلوري أحمر وموضعية داخل الحويصلات الحمضية.

البروتينات الشبيهة بالبريون غير مطوية ، وتجمع البروتينات المرتبطة بالأمراض التنكسية العصبية.

بعد ذلك ، انقل الديدان الخيطية إلى وسادة الاغاروز التي تحتوي على جزيئات نانوية بوليمرية ومحلول مخدر.

تعمل التأثيرات المشتركة للجسيمات النانوية ومحلول التخدير على شل حركة الديدان الخيطية على وسادة الاغاروز.

ضع غطاء فوق وسادة الاغاروز وأغلقها.

الآن ، ضع مجموعة وسادة الاغاروز مع الديدان الخيطية تحت مجهر متحد البؤر وقم بتعيين معلمات التصوير المناسبة.

احصل على صور بفاصل زمني للبروتينات الموسومة بالفلورسنت داخل الديدان الخيطية لمراقبة النقل الحويصلي للبروتينات الشبيهة بالبريون داخل وبين خلايا عضلة جدار الجسم.

بعد تحضير خطوط التحكم المتزامنة C. ايليجانس ومجال البريون المعدلة وراثيا ، ووسادات الاغاروز بنسبة 10٪ وفقا لبروتوكول النص المصاحب ، ماصة 3 ميكرولتر من 100 نانوجرام من حبات البوليسترين و 3 ميكرولترات من 4 ملليمولار ليفاميزول في وسادة الاغاروز. باستخدام معول سلك بلاتيني ، انقل الديدان في العمر المطلوب من اللوحة إلى المحلول ، واستخدم غطاء للتغطية.

لتصوير الديدان على المستوى تح