موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:36 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بعينة من أنسجة المخ البشري المجمدة بعد الوفاة من حالة مرض تنكسية عصبية مؤكدة.
استئصال المادة الرمادية الغنية بمجاميع البروتين غير القابلة للذوبان ، وهي السمة المميزة للمرض.
انقل الأنسجة إلى الخالط.
أضف عازلة تحتوي على مثبطات وتجانس لتحرير مكونات داخل الخلايا.
تمنع المثبطات إنزيمات البروتياز والفوسفاتيز ، مما يمنع تدهور البروتين.
انقل المتجانس إلى أنبوب وأضف عازلة المنظفات الأيونية. حضن.
يعملالمنظف على إذابة البروتينات المطوية أصلا ، بينما تظل مجاميع البروتين غير المطوية سليمة.
صوتية لإكمال التفكك الخلوي.
انقل المتجانس إلى أنبوب طرد مركزي فائق وجهاز طرد مركزي بسرعة عالية.
تستقر الركام في الأسفل.
قم بإزالة المادة الطافية التي تحتوي على البروتينات القابلة للذوبان في المنظفات.
اغسل الركام بمحلول منظف أيوني ، وجهاز طرد مركزي ، وقم بإزالة المادة الطافية.
أضف عازلة اليوريا لتشويه طبيعة مجاميع البروتين ، مما يجعلها قابلة للذوبان.
نقل مجاميع البروتين الذوبان إلى أنبوب وصوتنة لفترة وجيزة لضمان الذوبان الكامل.
الحصول على أنسجة المخ المجمدة بعد الوفاة من التحكم الصحي والمؤكدة مرضيا لمرض الزهايمر استخدم الملقط وشفرة الحلاقة لاستئصال ما يقرب من 250 ملليغرام من المادة الرمادية من كل عينة من الأنسجة. اسمح لجزء الدماغ بالذوبان لمدة دقيقة واحدة. الآن ، قم بتقطيع قطعة من الأنسجة إلى قطع مكعبة ب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية