الحصول على معلقات الخلايا من أنسجة دماغ الفأر الإقفارية

0 مشاهدات3:47 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ أنسجة دماغ الفئران الإقفارية التي تحتوي على خلايا الدماغ والخلايا المناعية المتسللة.

افرم المناديل على مصفاة واشطفها بمحلول عازل.

الطرد المركزي المرشح والتخلص من المادة الطافية.

أعد تعليق الحبيبات في محلول إنزيم هضمي وانقلها إلى أنبوب طرد مركزي دقيق.

احتضان الإنزيمات الهاضمة لتحطيم المصفوفة خارج الخلية ، مما يؤدي إلى فك الخلايا.

قم بتصفية التعليق وشطفه بمحلول احتوائي يحتوي على DNase لإزالة الحمض النووي الملوث.

بعد ذلك ، اغسل بمخزن مؤقت خال من DNase.

الطرد المركزي المرشح والتخلص من المادة الطافية.

إعادة تعليق الخلايا في وسط تدرج الكثافة. ثم انقل المحتويات إلى أنبوب جديد واخلطها. جهاز طرد مركزي لفصل المكونات حسب الكثافة.

قم بإزالة المادة الطافية التي تحتوي على المايلين والحطام.

أعد تعليق الحبيبات في مخزن مؤقت خال من DNase. انقله إلى أنبوب جديد وجهاز طرد مركزي مرة أخرى.

تخلص من المادة الطافية لضمان الإزالة الكافية لوسط تدرج الكثافة.

أخيرا ، أعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت لمزيد من التحليل.

باستخدام نهاية المكبس لحقنة سعة 5 ملليلتر ، اهرسي قطع أنسجة المخ من خلال مصفاة خلية 100 ميكرون ، واشطف المصفاة باستمرار باستخدام HBSS المثلج بالكالسيوم والمغنيسيوم. ثم ضع الأنسجة المتجانسة على الجليد.

عندما تتم معالجة جميع العينات ، قم بتدوير معلقات الخلية. وتخلص بعناية من المواد الطافية أعد تعليق الكريات في 1 مليلتر من عازلة الهضم. ثم انقل تعليق الخلية إلى أنبوب سعة 2 ملليلتر.

واحتضان الخلايا تحت دوران مستمر بطيء عند 37 درجة مئوية. بعد ساعة واحدة ، غربل معلق الخلية من خلال مصفاة خلية 70 ميكرون. واشطف الفلتر جيدا ب 3 ملليلتر من محلول الغسيل الذي يحتوي على DNase. ثم اغسل المصفاة ب 15 مل من محلول الغسيل الخالي من DNase. قم بتدوير الخلايا وتخلص من المادة الطافية.

لإزالة بقايا الخلية والمايلين ، أعد تعليق الخلايا في 5 ملليلتر من وسط التدرج بكثافة 25٪ في درجة حرارة الغرفة ونقل تعليق الخلية إلى أنبوب سعة 15 ملليلتر. امزج الخلايا والتدرج جيدا مع سحب العينات اللطيف المتكرر. ثم قم بتدوير محلول الخلية.

في نهاية الفصل ، قم بشفط طبقة المايلين والمادة الطافية بعناية دون إزعاج الحبيبات. وأعد تعليق الخلايا في 10 ملليلتر من مخزن الغسيل الخالي من DNase. انقل الخلايا إلى أنبوب سعة 15 ملليلترا ، وقم بتدويرها مرة أخرى ، وأعد تعليق الحبيبات في 100 ميكرولتر من محلول الغسيل البارد.

12:52

العزلة وتحليل تدفق Cytometric من-التسلل الورم خلايا الدم المحيطي وحيدة النواة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:34

تحليل للخلايا المناعية في واحد الوركي الأعصاب والعقدة الظهرية الجذرية من ماوس واحدة باستخدام التدفق الخلوي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:55

عزل وتوصيف الخلايا المناعية من الضفائر المشيمية للفئران المجهرية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:20

عزل أوعية دماغ الفئران: بروتوكول لعزل الأوعية السليمة من عينة دماغ الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:48

عزل الخلايا الدبقية الصغيرة عن قشرة دماغ الفأر البالغ

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:18

عزل الخلايا المناعية المتسللة للورم من دماغ الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:43

عزل واستزراع الخلايا العضاقية للفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:27

عزل أنواع الخلايا المتعددة عن دماغ الفأر عن طريق التجانس الميكانيكي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:42

Stereological والتدفق الخلوي توصيف خلايا الدم البيضاء القطعان في نماذج من عابر أو الشلل الدائم نقص التروية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:14

العزلة وتحليل تدفق Cytometric من الخلايا المناعية من الدماغ الدماغية ماوس

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026