تحفيز ومراقبة النوبات الناجمة عن الحرارة في نموذج فأر معدل وراثيا

خذ فأرا بالغا معدلا وراثيا مخدرا يحمل طفرة جينية تؤدي إلى خلل في قنوات الصوديوم في الخلايا العصبية الداخلية المثبطة.

قم بتأمين مسبار المستقيم المشحم لمراقبة درجة حرارة جسمه.

ضع الماوس في قفص الاسترداد حتى تستقر درجة حرارة جسمه.

بعد ذلك ، انقل إلى غرفة حرارة مسخنة مسبقا وابدأ تسجيل الفيديو.

قم بزيادة درجة حرارة الغرفة على فترات منتظمة مع مراقبة الارتفاع التدريجي في درجة حرارة جسم الفأر.

مع ارتفاع درجة حرارة الجسم ، يزداد الخلل الوظيفي في قنوات الصوديوم سوءا ، مما يقلل من إطلاق الناقل العصبي المثبط.

يؤدي هذا الإطلاق المنخفض إلى تعطيل التوازن بين الإثارة والتثبيط العصبي ، مما يؤدي إلى فرط استثارة الخلايا العصبية والنوبات.

سجل درجة حرارة الجسم أثناء النوبة ولاحظ خصائصها السلوكية.

الآن ، ضع الماوس على وسادة تبريد حتى تعود درجة حرارة جسمه إلى طبيعتها.

أخيرا ، قم بإزالة مسبار المستقيم واسمح للفأر بالتعافي.

ابدأ بتشغيل غرفة تسخين الماوس ، باستخدام زر التشغيل ثم اضغط على زر تشغيل الحرارة. باستخدام لوحة المفاتيح الموجودة على وحدة التحكم في درجة الحرارة الرقمية ، اضبط درجة حرارة غرفة الحرارة على 50 درجة مئوية. قم بتبطين أرضية غرفة الحرارة بفراش قطعة خبز.

قم بتركيب كاميرا تسجيل فيديو أمام غرفة الحرارة. قم بتبطين طبق بتري بقطر 140 ملم بطبقات سميكة من المناديل الورقية وضعه على الثلج ليكون بمثابة وسادة تبريد. بالنسبة لفحص الفحص ، تأكد من أن وزن جسم الفأر هو 15 جراما أو أكثر. قبل البدء في الإجراء ، تأكد من أن الفأر مخدر تماما بقرصة إصبع القدم.

قم بتغطية الطرف المعدني لمسبار درجة حرارة المستقيم بمادة تشحيم ، وأدخله برفق في الماوس. قم بتثبيت مسبار المستقيم على ذيل الماوس بشريط لاصق. ضع الماوس في قفص استرداد جديد مبطن بفراش قطعة خبز. ابدأ مؤقتا ، وراقب الماوس لمدة 5 دقائق مع مراقبة درجة حرارة الجسم الأساسية حتى يتعافى الماوس تماما من التخدير ، وتستقر درجة الحرارة عند 35 إلى 36 درجة مئوية.

في نهاية 5 دقائق ، لاحظ درجة حرارة جسم الماوس على أنها درجة حرارة الجسم الأولية عند 0 دقيقة. انقل الماوس بسرعة إلى أرضية غرفة تسخين الماوس المسخنة مسبقا لبدء تجربة التجربة. بعد وضع الماوس في حجرة الماوس المسخنة مسبقا ، ابدأ تشغيل الكاميرا وساعة الإيقاف.

قم بزيادة درجة حرارة غرفة الحرارة على فترات منتظمة ، بحيث تزداد درجة حرارة جسم الفأر بمعدل 0.25 إلى 0.5 درجة مئوية في الدقيقة. ابدأ في تسجيل درجة حرارة جسم الماوس على فترات دقيقة واحدة طوال مدة التجربة. في 9.5 دقيقة ، اضبط درجة حرارة غرفة الحرارة على 55 درجة مئوية ، لتثبيت درجة حرارة غرفة الحرارة عند 55 درجة مئوية بحلول الدقيقة 10.

وبالمثل ، حقق درجة حرارة ثابتة لغرفة الحرارة تصل إلى 60 درجة مئوية بحلول الدقيقة 20. تستمر كل تجربة لفحص النوبات لمدة 30 دقيقة. إذا تعرض الفأر لنوبة صرع ، فقم بتسجيل درجة حرارة جسم الفأر أثناء النوبة كدرجة حرارة عتبة النوبة. لاحظ خصائص سلوك النوبات التي يعرضها الماوس.

بعد ذلك ، التقط الماوس بسرعة من الغرفة وضعه على وسادة التبريد. عندما تنخفض درجة حرارة جسم الفأر إلى 36 إلى 37 درجة مئوية ، انقل الماوس إلى قفص الاسترداد. لإزالة مسبار المستقيم من الماوس ، قم بقص الشريط بعناية بين ذيل الماوس وسلك مسبار المستقيم.