موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:29 دقيقة • July 8th, 2025
خذ فأرا مخدرا مزروعا بقنية إرشادية في دماغه.
يمنع المسبار الوهمي داخل القنية دخول بقايا الأنسجة.
ضع طوقا حول رقبة الفأر.
استبدل المسبار الوهمي بمسبار غسيل الكلى المجهري الذي يحتوي على غشاء متخصص شبه منفذ ، والذي يسمح بتدفق الجزيئات ذات الوزن الجزيئي العالي.
يتمتوصيل المسبار بالمضخات من خلال منافذ المدخل والمخرج لتنظيم تدفق المخزن المؤقت الفسيولوجي.
اربط الماوس داخل قفص باستخدام الطوق ، واتركه يتعافى ، وابدأ التدفق.
يدخل المخزن المؤقت إلى أنسجة المخ من خلال المدخل ويختلط مع السائل الخلالي ، أو ISF ، في الفضاء خارج الخلية ، والذي يحتوي على بروتينات تشارك في الاتصال الخلوي.
تنتشر المكونات عبر الغشاء ويتم جمعها من خلال المخرج في كسور.
ISF الذي تم جمعه ، والذي يحتوي على بروتينات خارج الخلية ، جاهز للتحليل.
ضع الطوق حول عنق المزروع بقنية الدليل المخدر ، وقم بإزالة صمولة الغطاء والمسبار الوهمي. أدخل مسبار غسيل الكلى المجهري ببطء من خلال قنية التوجيه ، واربط صامولة الغطاء.
بعد ذلك ، ضع الماوس في قفص متصل بنظام حر الحركة ، وربط الماوس بالياقة. بعد ساعة واحدة على الأقل ، أوقف المضخة الدوارة ومضخة الحقنة بالتتابع ، وأعد تشغيل المضخات مع ضبط مضخة الحقنة على أسرع بنسبة 20٪ من مضخة الأسطوانة ، ووضع الطرف الحر لأنبوب المخرج على مجمع كسر مبرد لجمع ISF الدماغ. عند الحصول على الحجم التجريبي المناسب ، قم بإزالة المسبار ، وتعامل مع استرداد الماوس كما هو موضح للتو.