موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:15 دقيقة • July 8th, 2025
خذ فأرا يتعرض لانسداد الشريان الدماغي الأوسط ، مما يحد من تدفق الدم إلى نصف الكرة الأيمن من الدماغ.
يؤديانخفاض إمدادات الدم إلى حرمان خلايا الدماغ من الأكسجين ، ويعطل تنظيم المياه ، ويسبب تورم الخلايا أو الوذمة ، ويؤدي إلى اضطراب الحاجز الدموي الدماغي.
تموت الخلايا التالفة في النهاية ، وتشكل منطقة احتشاء.
حقن صبغة زرقاء في وريد ذيل الفئران للكشف عن اضطراب BBB.
احصد الدماغ ، وقم بتقطيعه بشفرات حلاقة ، واحتضان الشرائح في محلول صبغة الأكسدة والاختزال.
في الخلايا الحية ، تتفاعل الصبغة مع نازعة هيدروجين الميتوكوندريا وتخضع للاختزال ، مما يتحول إلى الأنسجة القابلة للحياة إلى اللون الأحمر.
تظل المناطق المحتشة ، التي تفتقر إلى نشاط نازعة الهيدروجين ، بيضاء.
امسح الشرائح ضوئيا للحصول على صور عالية الدقة.
باستخدام برنامج تحليل الصور ، قم بتطبيق مرشح أزرق للتخلص من لون الصبغة الزرقاء ، وتحويل الصور إلى تدرج الرمادي.
ضع العتبة لتمييز الأنسجة السوداء السليمة عن الأنسجة البيضاء المحتشة.
احسب منطقة الاحتشاء ووذمة الدماغ كنسبة مئوية من نصف الكرة المقابل غير المتأثر.
للبدء ، قم بإزالة دماغ الفئران وقطع أقسام أفقية بسمك 2 ملم بشفرة حلاقة أحادية الحافة غير مطلية بالفولاذ المقاوم للصدأ مقاس 0.009 بوصة. ضع الأقسام في 0.005٪ TTC واحتضانها لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، ضع أنسجة المخ على شرا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية