قياس امتصاص الدوبامين في المشابك العصبية في دماغ الفأر باستخدام الدوبامين المسمى بالإشعاع

حصاد المشابك العصبية ، وهي هياكل مرتبطة بالغشاء مشتقة من المحطات السليمة قبل المشبكي للمشابك العصبية التي تحتوي على ناقلات الدوبامين (DAT) ، من دماغ الفأر.

املأ أنابيب الاختبار بمخزن مؤقت يحتوي على روابط وأنابيب مرجعية بمخزن مؤقت يحتوي على روابط ومثبط SAT.

أضف المشبك العصبي.

تمنع الروابط الإنزيمات المهينة للدوبامين والناقلات الأخرى ، مما يمنع تدهور الدوبامين والامتصاص غير المحدد.

أدخل الدوبامين غير المسمى والمسمى بالإشعاع.

في حالة الاختبار ، يمتص DAT المشبكي الدوبامين.

في الحالة المرجعية ، يمنع المثبط امتصاص الدوبامين بوساطة DAT ، مما يسمح بامتصاص الخلفية فقط.

أضف العينات إلى مرشحات الألياف الدقيقة التي تحتفظ بالمشابك العصبي.

يغسل لإزالة الدوبامين غير المرتبط.

انقل المرشحات إلى أنابيب التلألؤ.

أضف سائل التلألؤ الذي يحتوي على مركب حساس للإشعاع.

ضع الأنابيب في عداد التلألؤ.

تثير الانبعاثات المشعة من الدوبامين المركب لإصدار الضوء ، والذي يتم قياسه بواسطة العداد.

اطرح المرجع من بيانات الاختبار لقياس امتصاص الدوبامين المشبكي.

في هذه الخطوة ، أضف 440 ميكرولترا من عازلة الامتصاص ، والترابط ، والكوكايين إلى 12 أنبوبا مخصصا للطرد المركزي الدقيق سعة 1.5 مليلتر ، و 440 ميكرولترا من عازلة الامتصاص والترابط إلى 36 أنبوبا متبقيا من أنابيب الطرد المركزي الدقيقة سعة 1.5 ملليلتر. قم بتسمية 6 أنابيب