موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:03 دقيقة • July 8th, 2025
خذ نسيجا مخيخيا بشريا بعد الوفاة يحتوي على طبقات خلية بركنجي وحبيبات وخلايا جزيئية.
ضعه على حامل عينة ناظم البرد يحتوي على وسائط تضمين مجمدة جزئيا.
اترك الوسائط تتجمد تماما ، وتأمين الأنسجة.
انقل هذه المجموعة إلى ذراع قطع ناظم البرد واترك الأنسجة تتأقلم مع درجة حرارة ناظم البرد.
انقل الأنسجة بالقرب من الشفرة وقم بقصها لكشف طبقات القشرة.
ضع صفيحة مضادة للدحرجة فوق الشفرة واحصل على أقسام مخيخية.
انقل هذه الأقسام إلى شريحة غشائية.
احتضان في زيادة تركيزات الإيثانول لتثبيت الأنسجة والجفاف.
ثم احتضن في الزيلين.
جفف الشريحة وضعها على مرحلة مجهر التقاط الأشعة فوق البنفسجية.
ضع غطاء التجميع فوق الأنسجة المخيخية.
مجهريا ، ركز على خلايا بركنجي.
باستخدام الليزر ، التقط خلايا بركنجي واجمعها لمزيد من التحليل.
أولا ، قم بقص قطعة صغيرة من الأنسجة للتقسيم ، وتأكد من أن القسم يتكون من حوالي 95٪ من القشرة المخيخية. أعد الأنسجة المتبقية إما إلى الثلج الجاف أو إلى الفريزر عند 80 درجة مئوية تحت الصفر. بعد ذلك ، ابدأ في إضافة OCT ببطء أعلى ظرف الظرف بحركة دائرية بطيئة. قم ببناء طبقات من OCT حتى يكون هناك كومة ، يبلغ ارتفاعها حوالي ثلاثة ملليمترات تغطي الظرف.
عندما يتم تجميد OCT جزئيا ، ولكن لا يزال يحتوي على بعض السوائل في المنتصف ، ضع الأنسجة فوق الكومة. دع المناديل تجلس فوق OCT لمدة 1 إلى 2 دقيقة حتى ت
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية