معالجة دماغ الفأر لتحليل المصب

خذ دماغ فأر تم حصاده حديثا وقم بتجميده سريعا في الأيزوبنتان المبرد مسبقا للحفاظ على الأنسجة بسرعة.

بعد ذلك ، انقل الدماغ ، جانب القشرة لأعلى ، إلى مصفوفة دماغية مجمدة للحفاظ على بيئة باردة أثناء التقطيع.

اسمح للدماغ بالتوازن مع درجة حرارة المصفوفة. قم بمحاذاة المصفوفة على طول الجيوب الأنفية السهمية والعرضية لضمان الأقسام المتماثلة.

أدخل شفرات مبردة في الدماغ ، مما يضمن المحاذاة المناسبة.

ثم اضغط عليها بالتساوي للحصول على أقسام دماغ موحدة.

قم بإزالة الشفرات مع الأقسام وضعها ، الجانب المنقاري لأعلى ، على طبق زجاجي مجمد.

قم بتنظيم الأقسام من التوجيه المنقاري إلى التوجيه الذيلي بالترتيب التشريحي الصحيح. الآن ، افصلواهم.

باستخدام مرجع دماغي مناسب ، حدد موقع منطقة الاهتمام واستبعدها من القسم.

انقل الأنسجة المستأصلة إلى قارورة مبردة مسبقا لتحليلها في اتجاه مجرى النهر.

بعد إزالة الأدمغة من الفئران البرية البالغة CD-1 التي تم القتل رحيمة ، تقوم بتجميد الأنسجة لمدة 60 ثانية إما في النيتروجين السائل أو الأيزوبنتان المبرد مسبقا بالثلج الجاف ، وتخزينها عند -80 درجة مئوية.

قبل 24 ساعة من تشريح الأنسجة ، ضع مصفوفة دماغ نظيفة على كومة من عبوات الفريزر المذابة ، وقم بوضع جوانب المصفوفة بين عبوتين من الفريزر ، مع التأكد من ترك ما يقرب من نصف سنتيمتر بين الجزء السفلي من فتحات الحلاقة وأعلى العبوات.

ق