إنشاء نموذج لزراعة الأعضاء لمحاكاة مرض القرص الفقري في المرحلة المبكرة

خذ قرصا فقريا (IVD) ، وهو هيكل يشبه الوسادة يقع بين الفقرات ، من ذيل بقري.

ضعه عموديا وحقن عامل نخر الورم المؤتلف α ، وهو سيتوكين مؤيد للالتهابات ، في النواة اللبية (NP) ، النواة الشبيهة بالهلام.

اسحب المحقنة في منتصف الطريق واسحب المكبس لإنشاء فراغ ، مما يمنع التدفق العكسي α من TNF. ثم قم بإزالة المحقنة.

ضع IVD في غرفة مفاعل حيوي تحتوي على وسائط ، وقم بتطبيق حمولة ضغط مكثفة يوميا.

يرتبط TNF-α بمستقبلاته على خلايا NP ، مما يؤدي إلى سلسلة إشارات.

هذا ينشط كاسباسات البادئ والجلاد ، والتي تحلل البروتينات الخلوية وتحفز موت الخلايا المبرمج.

ينشط TNF-α أيضا عامل النسخ NF-κB ، الذي يحفز التعبير الجيني الالتهابي ، مما يؤدي إلى إطلاق الإنزيمات التي تحلل المصفوفة خارج الخلية لجهاز IVD.

بالإضافة إلى ذلك ، يؤدي حمل الضغط الشديد إلى إجهاد ميكانيكي ، مما يؤدي إلى مزيد من تدهور IVD.

هذا يقلل من ارتفاع IVD مقارنة بالضوابط غير المعالجة ، مما يؤسس نموذجا تنكسيا ومحدثا للالتهابات لمرض IVD في المرحلة المبكرة.

بعد دورة التحميل الديناميكية الأولى في اليوم الأول ، ضع IVDs مباشرة في طبق بتري في وضع رأسي وقم بتثبيتها باستخدام ملقط. حقن عامل نخر الورم المؤتلف ألفا بإبرة أنسولين قياس 30 ، ببطء بسرعة حوالي 70 ميكرولتر في الدقيقة في أجهزة IVD للمجموعة المرضية. بعد الحقن ، اسحب المحقنة حتى المنتصف للخلف واسحب المكبس لإنشاء فراغ يمنع المحلول المحقون من التسرب. ثم قم بإزالة المحقنة تماما من جهاز IVD.