JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 3:08 د • July 8th, 2025
خذ معلقا للخلايا التي تفرز أميلويد بيتا السامة للأعصاب الممزوجة ببوليمر متوافق حيويا.
قم بتوصيل المحقنة مع التعليق بجهاز تصنيع الميكروبيدات ، ثم ادفعها من خلال تيار سائل مستمر.
يكسر تردد الاهتزاز في الجهاز التيار إلى قطرات موحدة بحجم الميكرون.
تمر هذه القطرات عبر مجال إلكتروستاتيكي وتكتسب شحنات موحدة لصد بعضها البعض ، مما يمنع الاندماج.
ثم تسقط القطرات في حمام هلام يحتوي على أيونات الكالسيوم. تربط الأيونات البوليمر ، وتغطي الخلايا في حبيبات ميكروبية كروية.
احتضان الخرزات لإكمال التبلور ، ثم اجمعها على مرشح.
اقلب الفلتر فوق أنبوب ، وأضف وسيطا ثقافيا لغسل الخرزات في الأنبوب ، وانقل التعليق إلى قارورة تحتوي على الوسط.
تسمح مصفوفة البوليمر بالوصول إلى المغذيات لدعم تكاثر الخلايا مع تمكين الإطلاق البطيء للأميلويد بيتا ، مما يحاكي التراكم المزمن الذي يظهر في الدماغ المصاب بمرض الزهايمر.
لتصنيع الميكروبيدات ، في حقنة سعة 20 مليلتر ، قم بتحميل خمسة ملليلتر من تعليق الجينات الخلية وإرفاق حقنة بالغلاف. لبدء تشغيل المغلف ، قم بتنشيط التدفق ، والذي سيدفع تعليق ألجينات الخلية عبر وحدة التغذية ، وسيتم بثق تيار من القطرات من خلال الفوهة. اجمع أول مليلتر واحد في دورق النفايات لتجنب التيار الأولي غير المنتظم. بعد ذلك ، استمر في تشغيل المليلتر الأربعة المتبقية ، مما يسمح للقطرات بالسقوط في حمام هلام كلوريد الكالسيوم.
عند ملامسة حمام التبلور ، يرتبط الجينات الموجود في القطرات على الفور بأيونات الكالسيوم في حمام الهلام ، مكونا ميكروبيدات كروية. بعد دقيقة واحدة ، قم بإزالة دورق التبلور من المنصة المغناطيسية واترك الميكروبيدات ترتاح لمدة أربع دقائق أخرى دون تحريض لإكمال التبلور في درجة حرارة الغرفة. لاسترداد الميكروبيدات ، استخدم أولا زوجا من الملقط المعقم لإزالة أي حطام أو قطع أثرية كبيرة من الجينات. بعد قطع نهاية الماصة البلاستيكية ، استخدمها لنقل الميكروبيدات من حمام التبلور إلى مرشح شبكي 74 ميكرومتر مثبت فوق دورق النفايات.
لضمان النجاح ، نقوم دائما بقطع نهاية الماصة البلاستيكية لتجنب إتلاف الميكروبيدات ونقوم بذلك في كل مرة ننقل فيها الخرزات من وعاء إلى آخر بعد التغليف.
اقلب المرشح الشبكي فوق أنبوب الطرد المركزي. الماصة وسيط الثقافة المناسب فوقها لغسل الخرزات أسفل الأنبوب والسماح لها بالتوازن في هذا الوسط لمدة خمس دقائق. بعد ذلك ، انقلها إلى قارورة مملوءة مسبقا بالوسط المناسب للحضانة والمزيد من التجارب.
تصف هذه المقالة طريقة لتصنيع حبيبات دقيقة تغلف خلايا أميلويد بيتا ذات السمية العصبية باستخدام بوليمر متوافق حيوياً. وتُحاكي هذه العملية التراكم المزمن لأميلويد بيتا الذي يُلاحظ في مرض الزهايمر، مما يسمح بالتحرير الخاضع للسيطرة وتكاثر الخلايا.
يتيح التصنيع المنضبط لحبيبات بوليمرية دقيقة تطلق أميلويد-بيتا نمذجة ذات صلة بالمرض للتراكم السام العصبي المزمن في أبحاث مرض ألزهايمر. ويدعم هذا النظام الثقة التنبؤية في التحقق من الأهداف في المراحل المبكرة والحد من المخاطر الميكانيكية لمحافظ الأمراض التنكسية العصبية. ويوفر هذا النهج منصة قابلة للتطوير والتكرار لتقييم الفرضيات العلاجية وفحص التدخلات في سياق ذي صلة فسيولوجياً.
تندمج طريقة تصنيع الخرزات الدقيقة هذه ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف إلى المرحلة قبل السريرية، مما يتيح اختبار الفرضيات، وإجراء الفحص، والنمذجة الانتقالية لسمية amyloid-beta.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026