موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:13 دقيقة • April 28th, 2025
خذ ذبابة بيضاء العينين ومخدرة ومعدلة وراثيا ومتكيفة مع الظلام.
تعبر الذبابة عن قنوات أيون TRPL الموسومة بعلامة eGFP في المستقبلات الضوئية للعين.
في الظلام، يتم توطين TRPL في أغشية المخططات - الزغابات الدقيقة للمستقبلات الضوئية.
باستخدام الهواء المضغوط، ادفع الذبابة رأسا على عقب إلى طرف الماصة.
قم بقص الطرف وادفع الذبابة للخلف.
قم بقصها مرة أخرى وادفع الذبابة للأمام حتى يبرز رأسها فقط.
قم بتثبيت الطرف في طين النمذجة الملتصق بشريحة وضعها على مرحلة المجهر الفلوري، بحيث تواجه العين هدف المجهر شعاعيا.
أضف قطرة ماء إلى الهدف، ثم اخفضها حتى تلامس العين.
التقط صورا للمستقبلات الضوئية.
قياس شدة التألق في المخططات وجسم الخلية والخلفية.
قم بإضاءة الذبابة بضوء برتقالي للحث على نقل TRPL إلى جسم الخلية.
كرر قياسات التصوير والتألق.
قارن الصور لملاحظة انخفاض التألق الربيدي بعد الإضاءة ، مما يشير إلى انتقال TRPL إلى جسم الخلية.
لتحضير ذبابة في شكل غير مميت ، انقل الذبابة المخدرة بالثلج رأسا على عقب إلى طرف ماصة سعة 200 ميكرولتر ، وادفع الذبابة بعناية نحو الحافة بالهواء المضغوط. ثم ، باستخدام مشرط ، اقطع طرف الماصة أمام الرأس مباشرة. وباستخدام الملقط ، ادفع الذبابة بحذر بضعة ملليمترات في طرف الماصة.
اقطع طرف الماصة مرة أخرى. وادفع الذبابة للخلف باتجاه الحافة بالهواء المضغوط ، بحيث يبرز رأس الذبابة فقط من طر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية