توليد نموذج كروي ثلاثي الأبعاد لغزو الخلايا السرطانية

JoVE Encyclopedia of Experiments

علم الأعصاب

0 مشاهدات • 3:18 د • April 28th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ ثقافة خلايا ورم الدماغ البشري.

تعامل مع إنزيم التفكك لتعطيل تقاطعات الخلايا وفصل الخلايا المجمعة.

اغسل بمخزن مؤقت لإيقاف نشاط الإنزيم، ثم أضف وسيطا مزروقا للحفاظ على صلاحية الخلية.

أدخل ميثيل السليلوز، وهو عامل تعليق.

انقل التعليق إلى صفيحة دقيقة مستديرة القاع واحتضنها.

يحافظ ميثيل السليلوز اللزج على الخلايا معلقة ، مما يعزز تفاعلات الخلية الخلوية للتجميع في كرويات.

امزج الكرويات مع مصفوفة الكولاجين التي تحاكي البيئة الفسيولوجية خارج الخلية.

انقل التعليق إلى صفيحة دقيقة واحتضانها ، مما يسمح للمصفوفة بتكوين هلام يحبس الكرويات.

أضف وسط النمو أعلى الجل.

في المحيط الكروي، تفقد الخلايا السرطانية التصاق الخلايا الخلوية وتعتمد نمطا ظاهريا غازيا.

تفرز هذه الخلايا البروتياز لتحلل المصفوفة ، وتمديد النتوءات لترسيخ نفسها ، والمضي قدما ، وغزو المصفوفة.

النموذج الكروي الذي يظهر غزو الورم جاهز للتحليل.

لتوليد كرويات ورمية متجانسة الحجم ، اغسل أولا ثقافة الخلايا السرطانية ذات الأهمية ب 5 ملليلتر من PBS ، وعالج الخلايا ب 0.5 إلى 1 مليلتر من إنزيم التفكك. بعد 5 دقائق عند 37 درجة مئوية ، أوقف التفاعل ب 4 إلى 4.5 مل من PBS ، وانقل الخلايا المنفصلة إلى أنبوب مخروطي سعة 15 مليلتر ، يحتوي على 10 ملليلتر من وسط النمو الكامل.

بعد العد ، قم بإعادة تعليق الخلايا عند 1 في 10 إلى 6 خلايا لكل 8 ملليلتر من وسط النمو الكامل ، مع استكمالها ب 2 ملليلتر من تركيز ميثيل السليلوز بنسبة 2٪ ، ونقل المعلق إلى حاوية نظام معقمة. بعد ذلك ، أضف 100 ميكرولتر من الخلايا إلى كل بئر من صفيحة قاعية مستديرة 96 جيدا وضع اللوحة في حاضنة 37 درجة مئوية ، 5٪ من ثاني أكسيد الكربون لمدة ثلاثة إلى أربعة أيام.

لإجراء فحص الغزو ، عندما تكون الخلايا السرطانية قد شكلت كرويات بحجم موحد ، انقل كل بنية خلية إلى أنبوب سعة 500 ميكرولتر ، واغسل الكرات مرة واحدة باستخدام 200 ميكرولتر من PBS. بعد الغسيل الثاني ، انقل الكرويات بعناية إلى 100 ميكرولتر من مصفوفة الكولاجين المعدة حديثا ، وأضف كل معلق كروي في وسط كل بئر من صفيحة 96 بئر مسطحة القاع.

بعد حضانة لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية ، أضف 100 ميكرولتر من وسط النمو الكامل فوق الجل في كل بئر.

تأكد من وضع جميع الكرات في وسط كل بئر للحصول على أفضل تصوير لغزو الخلايا السرطانية.

08:49

نموذج 3D أورجانوتيبيك الميلانوما جلد كروي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:33

تقييم صلاحية الخلية والموت في الثقافات الكروية ثلاثية الأبعاد للخلايا السرطانية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:20

رواية سترومال ليفيبليوم-تعديل 3D نموذج الورم كرويويد لدراسة الورم ستروما التفاعل واكتشاف المخدرات

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:18

كروي الفحص لقياس TGF - β بفعل الغزو

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

02:02

نموذج الزراعة المشتركة ثلاثية الأبعاد للخلايا التائية المتسللة في الورم الكروي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:19

ثلاثي الأبعاد (3D) ورم الجسم الشبه الكروي الغزو الفحص

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:34

خلية السرطان كروي الفحص لتقييم الغزو في إعداد 3D

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:15

بالبالكامل الإنسان القائم علي الورم مصفوفة في ثلاثه الابعاد كروي الغزو الفحص

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:27

نموذج Spheroid 3D كنظام أكثر فسيولوجية للتمييز الليفي المرتبطة بالسرطان والغزو في الدراسات المختبرية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:40

نموذج كروي ثلاثي الأبعاد للورم الأرومي الدجلي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026