قياس معدل استهلاك الأكسجين في شرائح دماغ الفأر الحادة

ضع لكمات شرائح الدماغ من الفئران السليمة والتنكسية العصبية على شاشات الاحتفاظ بالعينات.

اقلب الشاشات وأدخلها في صفيحة المناديل.

خذ خرطوشة مستشعر معايرة مسبقا مع مجسات مستشعر. قم بتحميل المركبات - البيروفات ، والأوليغومايسين ، و FCCP ، ومضادات المايسين A - في منافذ الحقن.

ضع الخرطوشة على لوحة المناديل. ابدأ التشغيل في محلل التدفق خارج الخلية.

تقيس المجسات معدل استهلاك الأكسجين للشريحة أو (OCR).

مع الحقن الأول ، يدخل البيروفات إلى الميتوكوندريا ، ويولد ناقلات الإلكترون.

تتبرع هذه الناقلات بالإلكترونات للمجمعين الأول والثاني من سلسلة نقل الإلكترون أو (ETC) ، مما يؤدي إلى تفاعل نقل الإلكترون الذي يزيد من استهلاك الأكسجين و OCR.

يثبط أوليغومايسين المركب V ، ويوقف تخليق ATP ويقلل من التعرف الضوئي على الحروف.

FCCP ، وهو بروتونوفور ، يعطل تدرج البروتون ، مما يزيد من استهلاك الأكسجين والتعرف الضوئي على الحروف.

يرتبط Antimycin A بالمجمع III ويوقف ETC ، مما يقلل من التعرف الضوئي على الحروف.

قارن بين ملفات تعريف التعرف الضوئي على الحروف.

يشير

انخفاض التعرف الضوئي على الحروف في الشرائح التنكسية العصبية إلى ضعف الميتوكوندريا.

قم بشفط قطعة واحدة من أنسجة المخ المثقوبة ، وضع الأنسجة بعناية على الجانب الشبكي من شاشة الالتقاط. قطعة دائرية من البلاستيك مع شبكة متصلة بجانب واحد. باستخدام منديل ورقي ، جفف شاشة ا