فحص البلعمة الحية للخلايا الدبقية الصغيرة باستخدام المشابك العصبية البشرية

0 مشاهدات3:28 د • April 28th, 2025

خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا شبيهة بالخلايا الدبقية الصغيرة تظهر نشاطا بلعمة.

احتضن مع وصمة عار نووية لتسمية النوى.

add a hibil polymerization actin to the negative control well.

أثناء الحضانة، يرتبط المثبط بخيوط الأكتين، مما يثبط بلمرة الأكتين والبلعمة.

حافظ على اللوحة في درجات حرارة منخفضة وأضف المشابك العصبية المسماة بالصبغة الحساسة للأس الهيدروجيني - شظايا معزولة من المحطات المشبكية العصبية.

طرد مركزي اللوحة في درجات حرارة منخفضة لتعزيز تفاعلات الخلايا المشابك مع منع الامتصاص المبكر.

نمط

نقل اللوحة إلى نظام تصوير الخلية الحية.

في بئر الاختبار، تكون الجسيمات المشابكة البلعمية وتندمج مع الجسيمات الحالة التي تشكل الجسيمات البلعمة. تعمل البيئة الحمضية الليزوزومية على تنشيط الصبغة ، مما يؤدي إلى تألقها.

بمرور الوقت، في بئر الاختبار، يتم ابتلاع المزيد من الجسيمات المشابكة مما يؤدي إلى زيادة أخرى في التألق.

ومع ذلك، في بئر التحكم السلبي، يتم تثبيط بلمرة الأكتين، مما يمنع امتصاص الجسيم المشبكي. يؤكد الحد الأدنى من التألق الناتج اعتماد التألق على البلعمة بوساطة الأكتين.

في يوم الفحص ، قم بإزالة 40 ميكرولترا من الوسط لكل بئر ، وأضف 10 ميكرولترات من محلول التلوين النووي. احتضن الطبق لمدة ساعتين. قم بإذابة المشابك المسماة على الجليد وصوتنة برفق باستخدام مكبر صوت مائي لمدة دقيقة واحدة. مرة أخرى ، ضع الجسيمات المشابكة على الفور على الجليد. قم بتخفيف المشابك العصبية المسماة ووسط IMG الكامل عند 1 ميكرولتر من المشابك العصبية لكل 50 ميكرولتر من الوسط.

للتحكم السلبي ، قم بإعداد 60 ميكرومولار سيتوكالاسين D في وسط IMG الكامل لتثبيط بلمرة الأكتين ، وبالتالي البلعمة. ثم أضف 10 ميكرولترات من هذا المحلول إلى كل بئر للحصول على تركيز نهائي يبلغ 10 ميكرومولار واحتضنه لمدة 30 دقيقة. أخرجي الطبق من الحاضنة واحتضنه على حرارة 10 درجات مئوية لمدة 10 دقائق. حافظ على اللوحة على الجليد وأضف 50 ميكرولترا من الوسط الذي يحتوي على المشابك العصبي.

الطرد المركزي للوحة عند 270 مرة جم لمدة ثلاث دقائق عند 10 درجات مئوية وحافظ على اللوحة على الجليد حتى الحصول على التصوير. أدخل اللوحة في قارئ تصوير الخلايا الحية وحدد الآبار المراد تحليلها. ثم حدد عدسة موضوعية 20x. بعد ذلك ، اضبط وقت تكامل شدة الصمام الثنائي الباعث للضوء أو وقت تكامل شدة LED وكسب المجال الساطع والقنوات الزرقاء. يجب أن يكون مضان المشبك العصبي ضئيلا في النقطة الزمنية الأولية.

حدد عدد المربعات الفردية التي سيتم الحصول عليها في مونتاج لكل بئر. احصل على 16 بلاطة في وسط البئر ، وتصوير ما يقرب من 5٪ من إجمالي مساحة البئر. اضبط درجة الحرارة على 37 درجة مئوية والفاصل الزمني المطلوب للتصوير.

06:43

الرقم الهيدروجيني رواية حية في المختبر -تصوير بوساطة "الإنزيم Astrocyte البلعمه استخدام" مؤشر مترافق سينابتوسوميس

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:48

في المختبر التصوير الكمي المقايسة لPhaagocytosis من خلايا الورم الأرومي العصبي الميت من قبل iPSC-الضامة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:10

تنظيم الخلايا الجذعية Mesenchymal من البلعم البلعمي; الكمية والتصوير

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:20

عزل الخلايا الدبقية الصغيرة الابتدائية المختلطة من زراعات الخلايا الغروية من المواليد الجدد الجرذ أنسجة المخ

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:23

فحص البلعمة الدبقية الدقيقة: اختبار في المختبر لإنشاء نموذج البلعمة الدبقية الدقيقة لخلايا الورم الأرومي العصبي باستخدام البلاعم iPSC

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:33

فحص البلعمة في المختبر: طريقة قائمة على التصوير الحي لدراسة البلعمة المشبكية بوساطة الخلايا النجمية في الوقت الفعلي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:03

تمييز الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان إلى خلايا شبيهة بالخلايا الدبقية الصغيرة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:38

على الإحاطة الفحص: بروتوكول لتقييم التفاعلات بين الخلايا العصبية والجهاز العصبي المركزي البالعات

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:19

تقييم الشبكية دبقية أكلة وظيفة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:19

الخلايا الدبقية الصغيرة البشرية: التمايز عن الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات ومقايسة البلعمة في الخلايا الحية في المختبر باستخدام المشبك البشري

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 29 أغسطس 2026