موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 7:03 دقيقة • April 28th, 2025
خذ خلايا الغلاف العصبي في مخزن مؤقت يحتوي على المنظفات والكالسيوم ومثبطات الإنزيم البروتيني.
يتخلل المنظف الخلايا ، بينما يقوم المثبط بتعطيل البروتياز للحفاظ على البروتين المستهدف المرتبط بالكروماتين.
أضف النوكلياز واحتضن. يستخدم النوكلياز الكالسيوم لهضم الكروماتين.
أضف المخزن المؤقت المحتوي على EDTA الذي يخلب الكالسيوم ، مما يؤدي إلى تعطيل النوكلياز.
أضف المخزن المؤقت للتحلل للخلايا ، وإطلاق الكروماتين.
جهاز الطرد المركزي وجمع المادة الطافية.
أضف الأجسام المضادة الخاصة بالبروتين المستهدف واحتضانها مع الدوران. جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية.
أدخل حبات مغناطيسية تستهدف الجسم المضاد وتحتضن بالدوران.
أضف المخزن المؤقت للتحلل لفصل الحمض النووي غير المرتبط على وجه التحديد.
التقط الخرز مغناطيسيا وإزالة المادة الطافية.
أضف عازلة عالية الملح لفصل البروتينات غير المرتبطة على وجه التحديد.
التقط الخرز مغناطيسيا وإزالة المادة الطافية.
أضف عازلة تثبيت ، والتقط الخرزات مغناطيسيا ، وقم بإزالة الملوثات.
أعد تعليقه في محلول بروتيناز K لهضم البروتينات ، وإطلاق الحمض النووي.
بمجرد حصاد المجالات العصبية ، قم بعمل جهاز طرد مركزي 1 في 10 إلى 6 خلايا الغلاف العصبي لكل ترسيب مناعي عند 300 مرة جم لمدة 5 دقائق. بعد الطرد المركزي ، قم بصب المادة الطافية وأعد تعليق حبيبات الغلاف العصبي في مليلتر واحد من محلول ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية