موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:31 دقيقة • April 28th, 2025
خذ أنسجة الأوعية الدموية الليفية المريضة المشتقة من المريض. يحتوي هذا النسيج على هياكل الأوعية الدموية الجديدة غير المنتظمة مع الخلايا البطانية والخلايا المحيطة.
عالج الأنسجة بمحلول مانع لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحددة.
احتضان بالأجسام المضادة الأولية التي تستهدف البروتينات السطحية على الخلايا البطانية والخلايا الحضوجية.
اشطفها بمحلول عازل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة ، ثم احتضنها في المخزن المؤقت.
بعد الغسيل العازل ، احتضن الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالصبغة الفلورية للارتباط بالأجسام المضادة الأولية.
يغسل بمحلول عازل لإزالة الأجسام المضادة الزائدة واحتضانه في العازلة.
بعد الغسيل العازل ، أضف صبغة نووية إلى تلطيخ نوى الخلايا. اشطفها بالماء العازل والماء منزوع الأيونات لإزالة الصبغة غير المربوطة.
انقل الأنسجة إلى شريحة مجهرية.
ضع وسائط التثبيت وختمها بغطاء يحتوي على وسائط تثبيت سريعة التصلب.
بعد التجفيف بالهواء ، قم بتخزين الشريحة على درجة حرارة منخفضة. بعد ذلك ، قم بتصوير الأنسجة تحت مجهر epifluorescence لتصور الترتيب المكاني للخلايا البطانية والخلايا العضوجية داخل هياكل الأوعية الدموية الجديدة.
قم بإمالة اللوحة على دعامة واحتضان القطرات في 500 ميكرولتر من محلول الحجب لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. تحضير خليط الأجسام المضادة الأولية وفقا لبروتوكول النص.
ثم استخدم مل
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية