نمذجة تجديد المحور العصبي الحسي في الفئران باستخدام حقن عقدة الجذر الظهري وإصابة سحق الجذر الظهري

ابدأ بفأر مخدر.

قم بعمل شق جلدي في خط الوسط بين فقرات عنق الرحم C2 والفقرات T2 الصدرية

بعد ذلك ، شق على طول خط الوسط للأنسجة الليفية البيضاء وسحب الطبقة العضلية الأولى.

قم بتشريح الأنسجة الغشائية الرقيقة عند خط الوسط للطبقة العضلية الثانية ، ثم اسحب العضلات الطولية المخططة.

أخيرا ، شق الطبقة العضلية الثالثة لفضح العمود الفقري.

قم بإزالة الصفيحة والعنيق الذي يغطي الفقرات اليسرى من C4 إلى T1 للكشف عن العقد الجذرية الظهرية C5 إلى C8 أو DRGs.

حقن معلق فيروسي مؤتلف مرتبط بالغدة في DRGs.

يشفر الفيروس بروتينا معززا للنمو يساعد في التجدد المحوري.

باستخدام الملقط ، سحق الجذور الظهرية من C5 إلى C8 لقطع الوصلات المحورية من DRG إلى الحبل الشوكي ، مما يؤدي إلى إصابة محورية خاضعة للرقابة.

النموذج جاهز لدراسة التجديد المحوري بوساطة الفيروس.

ابدأ الجراحة عن طريق تحديد موقع العمليات الشوكية البارزة C2 و T2 على الجلد. ثم استخدم مشرط رقم 10 ، لعمل شق جلدي بين العمليات الشوكية C2 و T2. بمجرد فتح الجلد ، يجب أن يكون خط الوسط للنسيج الليفي الأبيض مرئيا على الطبقة الأولى من العضلات ، والتي لها نسيج يشبه الهلام.

قم بعمل شق مماثل الحجم على الطبقة الأولى من العضلات على طول خط الوسط الأبيض. لا تتجاوز العملية الشائكة T2 البارزة ، حيث يوجد وعاء دموي رئيسي يقع بالقرب من هناك. اسحب الطبقة الأولى من العضلات باستخدام ضامتين ، أحدهما يوضع في الظلال والآخر ذيلي.

يجب أن تكون الطبقة الثانية من العضلات ذات المظهر المخطط مرئية الآن. حدد موقع خط الوسط للطبقة الثانية من العضلات ، حيث يمكن ملاحظة عضلتين طوليتين متصلتين بنسيج غشائي رقيق. ثم استخدم زوجا من المقصات الدقيقة لتشريح الأنسجة الغشائية وفصل العضلات الطولية.

اضبط الضاعات لكشف الطبقة الثالثة من الكمامة الرقيقة التي تغطي العمود الفقري. يمكن الشعور بالعمليات الشائكة عن طريق اللمس برفق باستخدام زوج من الملقط فوق الطبقة الثالثة من العضلات. استخدم مقصا صغيرا لعمل شق صغير في الطبقة الثالثة من العضلات. واكشط العضلات برفق من العظم باستخدام مكشطة أو مشرط بطريقة جانبية لكشف الفقرات بوضوح.

لتعريض C5 الأيسر إلى C8 DRGs ، استخدم زوجا من الرقائق الدقيقة لإجراء استئصال الهيميلامين الأيسر على الفقرات C4 إلى T1 عن طريق إزالة جزء من الصفيحة والعنيق بعناية. بمجرد أن يتم الكشف عن ما يكفي من DRG للحقن ، قم بإعداد المحقنة عن طريق وضع حقنة ميكرولتر مملوءة بالفيروسات مزودة بإبرة حادة عيار 33 حسب الطلب ، على حامل الحقنة التجسيمية. بعد ذلك ، استخدم إبرة مشطوفة بقياس 30 لعمل فتحة سطحية صغيرة على كل من DRG المستهدفة للمساعدة في إدخال إبرة الحقن. اضبط الإحداثيات التجسيمية برفق ، لإدخال الإبرة قياس 33 في وسط DRG.

من الناحية المثالية ، يجب وضع الإبرة في منتصف DRG لضمان الانتشار المنتظم للمحلول المحقون في جميع أنحاء DRG.

بمجرد إدخال الإبرة ، استخدم مضخة حقنة التسريب لحقن 1 ميكرولتر من الفيروس في كل DRG. أثناء الحقن ، سيتغير لون DRG ببطء إذا كان محلول الفيروس يحتوي على صبغة ملونة. لا تفرط في إدخال الإبرة ، فقد يتسبب ذلك في تسرب السوائل من الجانب البطني من DRG.

في حالة حدوث تسرب أثناء الحقن ، اضبط موضع الإبرة على الفور. بعد ثلاث دقائق من انتهاء الحقن ، اسحب إبرة الحقن. لإجراء إصابة سحق الجذر الظهري المتزامنة من C5 إلى C8 ، سحق كل جذر ثلاث مرات لمدة 10 ثوان باستخدام زوج من الملقط ذي الرؤوس الدقيقة. معارضة تماما نهايات الملقط. يجب أن يظهر خط أبيض في الأنسجة في موقع السحق.