تقييم سلامة الحاجز الدموي الدماغي في نموذج فئران إصابات الدماغ الناجم عن الليزر

خذ فأرا مخدرا ونموذجا لإصابة الدماغ الناجم عن الليزر.

أدى تطبيق الليزر على نصف الكرة الأيمن إلى تلف الخلايا والحاجز الدموي الدماغي ، أو BBB ، الذي يفصل الدم عن أنسجة المخ.

حقن صبغة تتبع في وريد الذيل المقنن الذي ينتقل عبر الدورة الدموية الجهازية للوصول إلى الدماغ.

ترتبط الصبغة ببروتينات البلازما وتتسرب إلى أنسجة المخ من خلال BBB التالف.

قتل الفئران.

قم بتحريك الفئران عبر القلب لإزالة الصبغة من الدورة الدموية.

استخرج الدماغ وقطعه إلى شرائح ، وعزل الشرائح من نصف الكرة المصاب ، وقم بتجانسها.

عالج بمحلول حمضي لتشويه البروتينات ، وإطلاق الصبغة المرتبطة بالبروتين.

الطرد المركزي وعزل المادة الطافية المحتوية على الصبغة. أضف الكحول لتعزيز مضان الصبغة.

نقل المحلول إلى صفيحة دقيقة. عند الإثارة ، تشير شدة التألق الأعلى في الدماغ المصاب إلى تلف BBB الناجم عن الليزر.

لتقييم حدوث كسر الحاجز الدموي الدماغي ، بعد 24 ساعة من الإصابة الناجمة عن الليزر ، قم بتحميل حقنة بصبغة إيفانز الزرقاء بنسبة 2٪ ، مخففة في 4 ملليلتر لكل كيلوغرام من المحلول الملحي ، وتوصيل المحلول عن طريق الوريد إلى المصابين والسيطرة على الفئران عبر وريد الذيل المقن.

اترك المحلول يدور لمدة ساعة واحدة ، قبل استخدام مجموعات الدبابيس الجراحية والمقص لفتح صدر الأول. قم بنشر القلب المكشوف ، مع محلول ملحي مبرد بنسبة 0.9٪ عبر البطين الأيسر عند