Name: تحليل للهجرة كريست العصبية والتمايز بواسطة الصليب الأنواع زرع (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: اكتشف طريقة زرع الأنبوب العصبي الظهري من جنين السمان إلى جنين الدجاج لتتبع هجرة الخلايا السرطانية العصبية ومصيرها. تُمكّن هذه التقنية الباحثين من دراسة التمايز الخلوي في الأجنة الكيميرية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

الكتاب أشكر أعضاء مختبر Lwigale للنقد من المخطوطة. ويدعم SLG من قبل L. روث زمالة NRSA كيرشتاين من المعهد الوطني للعيون (F32 EY02167301). ويدعم PYL من قبل المعهد الوطني للعيون (EY018050).

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

ووصف عمليات ترقيع من الأنبوب العصبي السمان في افراخ الدجاج المضيف هنا هي تقنية بسيطة وغير مكلفة لتعقب مجموعات سكانية فرعية محددة من الهجرة البلدان المساهمة الصافية النابعة من مناطق مختلفة على طول المحور rostro-الذيلية 21،67-69. هذه التقنية تستفيد من سهولة الحصول على أجنة الطيور (بالمقارنة مع أجنة الثدييات)، ويمكن الجمع مع غيرها من التقنيات، مثل الاجتثاث الأنسجة، وحقن الجزيئات المثبطة، أو عن طريق التلاعب الجيني electroporation من البلازميدات التعبير، لدراسة التجربة في اس...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الكاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> بيض الدجاج </td><td> مختلف - نستخدم تكساس A &amp; M في جامعة الدواجن وزارة العلوم وتكساس. </td><td></td></tr><tr><td> بيض السمان </td><td> مختلف - نستخدم أوزاركس الشركة البيض، MO. </td><td></td></tr><tr><td> البيض الحاضنة (رقمية عبر الاقمار الصناعية 1502 رياضي حاضنة ث / الرطوبة 110-120 فولت AC) </td><td> <a href="http://www.poultrysupply.com" target="_blank">www.poultrysupply.com</a> </td><td> 1502 </td></tr><tr><td> دومون AA ملقط، INOX إبوكسي المغلفة </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 11210-10 </td></tr><tr><td> سكوتش الشريط </td><td> أي مخزن مكتب التوريد </td><td></td></tr><tr><td> منحني إيريس الملقط </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 11065-07 </td></tr><tr><td> أنامطار الدوحة الدولي الجديد حبر </td><td> أي متجر فن العرض </td><td></td></tr><tr><td> القلم / بكتيريا (البنسلين، الستربتوميسين) الحل </td><td> VWR الدولية </td><td> 101447-068 </td></tr><tr><td> التعبئة الشريط واضح </td><td> أي مخزن مكتب التوريد </td><td></td></tr><tr><td> إبرة جهاز سحب </td><td> Narashige، اليابان </td><td> PE-21 </td></tr><tr><td> سحبت إبرة الزجاج، وجعلت 1،5-1،8 100mm س أنبوب زجاجي البورسليكات الشعرية </td><td> كيمبل مطاردة </td><td> 34500 99 </td></tr><tr><td> سحبت زجاج ماصة، جعلت من 5 ¾ &quot;باستور ماصة </td><td> فيشر العلمية </td><td> 13-678-6A </td></tr><tr><td> الفم ماصة جهاز (الشافطة الجمعية أنبوب للماصة microcapillary معايرة) </td><td> سيغما الدريخ </td><td> A5177-52A </td></tr><tr><td> دومون # 5 ملقط </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 11251-30 </td></tr><tr><td> برميل للخمرسلك gsten، وقطره 0.1mm </td><td> VWR الدولية </td><td> AA10404-H2 </td></tr><tr><td> أصحاب الإبرة (مطلي بالنيكل حائز دبوس) </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 26018-17 </td></tr><tr><td> QCPN ضدي </td><td> الدراسات التنموية ورم هجين البنك، جامعة ولاية ايوا </td><td> QCPN </td></tr><tr><td> اليكسا فلور الأضداد الثانوية (على سبيل المثال، اليكسا فلور 594 ماعز مكافحة فأر IgG1) </td><td> إينفيتروجن </td><td> A21125 </td></tr><tr><td> محلول رينغر (2L): <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 14.4g كلوريد الصوديوم </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.34g CaCl 2 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.74g بوكل </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.230g نا 2 هبو 4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.04g KH 2 PO 4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DDH 2 O إلى 2L </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التصفية والتعقيم </li></ul></td><td> كل الكواشف من العلم فيشر </td><td><ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7647-14-5 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10043-52-4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7447-40-7 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7558-79-4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7778-77-0 </li></ul></td></tr></tbody></table>

تحليل للهجرة كريست العصبية والتمايز بواسطة الصليب الأنواع زرع

Analysis of Neural Crest Migration and Differentiation by Cross-species Transplantation

توفر الأجنة الطيورية منصة فريدة لدراسة العديد من عمليات النمو لدى الفقاريات، وذلك نظراً لسهولة الوصول إلى الأجنة داخل البيضة. وتجمع الأجنة الطيورية الخيمرية، والتي يتم فيها نقل أنسجة مانحة من السمان إلى جنين دجاج in ovo، بين قوة الوسم الجيني غير القابل للمحو للمجتمعات الخلوية وسهولة التعامل التي يوفرها الجنين الطيوري.
تعد الكائنات الخيمرية من السمان والصيصان أداة كلاسيكية لتتبع خلايا العرف العصبي (NCCs) المهاجرة1-3. وخلايا العرف العصبي هي مجموعة خلايا مهاجرة عابرة في الجنين، تنشأ في المنطقة الظهرية للأنبوب العصبي النامي4. وتمر هذه الخلايا بعملية تحول من الحالة الظهارية إلى الحالة الميزنشيمية، ثم تهاجر لاحقاً إلى مناطق أخرى من الجنين، حيث تتمايز إلى أنواع خلوية مختلفة تشمل الغضروف5-13، والخلايا الميلانينية11,14-20، والعصبونات والخلايا الدبقية21-32. وتتميز خلايا العرف العصبي بأنها متعددة القدرات، ويتأثر مصيرها النهائي بـ 1) منطقة الأنبوب العصبي التي نشأت منها على طول المحور المنقاري-الذنبي للجنين11,33-37، 2) الإشارات الصادرة من الخلايا المجاورة أثناء هجرتها38-44، 3) البيئة المجهرية لوجهتها النهائية داخل الجنين45,46. ويوفر تتبع هذه الخلايا من نقطة منشئها في الأنبوب العصبي، وصولاً إلى موقعها النهائي ومصيرها داخل الجنين، رؤى مهمة حول العمليات التنموية التي تنظم التنميط وتخلق الأعضاء.
يمكن أن يكشف نقل المناطق المتكاملة من الأنبوب العصبي للمانح (التطعيم المتجانس) أو مناطق مختلفة من الأنبوب العصبي للمانح (التطعيم غير المتجانس) عن الاختلافات في التحديد المسبق للخلايا العصبية القمية (NCCs) على طول المحور الرأسي-الذيلي2,47. ويمكن تكييف هذه التقنية بشكل أكبر لنقل جزء أحادي الجانب من الأنبوب العصبي، بحيث يشتق أحد الجانبين من نسيج المانح، بينما يظل الجانب المقابل دون تغيير في جنين المضيف، مما يوفر ضابطاً داخلياً ضمن العينة نفسها2,47. كما يمكن تكييفها لنقل قطع من الدماغ في الأجنة في مراحل لاحقة، بعد المرحلة HH10، عندما ينغلق الأنبوب العصبي الأمامي47.
نستعرض هنا تقنيات لإنتاج كائنات خيمرية من السمان والدجاج عبر زراعة الأنبوب العصبي، والتي تتيح تتبع خلايا العرف العصبي (NCCs) المهاجرة والمشتقة من قطعة محددة من الأنبوب العصبي. ويسمح الوسم النوعي للخلايا المشتقة من المانح باستخدام الجسم المضاد QCPN الخاص بالسمان48-56 للباحث بالتمييز بين خلايا المانح والمضيف عند نقطة النهاية التجريبية. وتعد هذه التقنية مباشرة وغير مكلفة ولها تطبيقات عديدة، بما في ذلك رسم خرائط المصير، وتتبع سلالات الخلايا، وتحديد أحداث التنميط المسبق على طول المحور الرأسي-الذيلي45. ونظراً لسهولة الوصول إلى الجنين الطيري، يمكن دمج تقنية تطعيم السمان والدجاج مع تلاعبات أخرى، بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر استئصال العدسة40، أو حقن جزيئات مثبطة57,58، أو التلاعب الجيني عبر التثقيب الكهربائي لبلازميدات التعبير59-61، وذلك لتحديد استجابة تيارات مهاجرة معينة من خلايا العرف العصبي للاضطرابات في البرنامج التنموي للجنين. علاوة على ذلك، يمكن استخدام تقنية التطعيم هذه لإنتاج أجنة خيمرية أخرى بين الأنواع، مثل خيمرات السمان والبط لدراسة مساهمة خلايا العرف العصبي في التخلق الشكلي للوجه والجمجمة، أو خيمرات الفأر والدجاج للجمع بين قوة الوراثة في الفئران وسهولة التلاعب بالجنين الطيري.62

يوصف هذا النهج لتحليل الهجرة والمصير النهائي من الطيور الخلايا العصبية في قمة السمان، فرخ أجنة خيالية. هذا الأسلوب هو أسلوب بسيط ومباشر لتعقب الخلايا العصبية خلال قمة للهجرة والتمايز التي يصعب على خلاف ذلك للتمييز في جنين الفرخ unmanipulated.

توفر الأجنة الطيرية منصة فريدة لدراسة العديد من عمليات النمو لدى الفقاريات، وذلك نظراً لسهولة الوصول إلى الأجنة داخل البيضة. ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو تطعيم قطعة مستأصلة من الأنبوب العصبي الظهري من جنين سمان في جنين دجاج متوافق في المرحلة العمرية، وذلك لتتبع هجرة ومصير خلايا العرف العصبي. يتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق إحداث ثقب صغير في غشاء IGN لجنين الدجاج المضيف للوصول إلى الأنبوب العصبي. بعد ذلك، يتم إخراج جنين السمان المانح من بيضته لتحضيره لاستئصال الطعم.في الخطوة التالية، يتم استئصال المنطقة المستهدفة من الأنبوب العصبي للجنين المضيف. ثم يتم استئصال منطقة مماثلة من الأنبوب العصبي للمانح لغرض التطعيم. بعد ذلك، يتم نقل الأنبوب العصبي للمانح وزراعته في الأنبوب العصبي للمضيف.أخيراً، يتم تحضين الجنين الخيمري حتى المرحلة المطلوبة للكشف عن وصول خلايا العرف العصبي إلى العضو المختار. وفي نهاية المطاف، يمكن تصور هجرة وتمايز خلايا العرف العصبي المشتقة من المتبرع في مواقع مختلفة من جنين المضيف من خلال مجهر الفلورة المناعية. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمراً بالغ الأهمية لأن خطوات التشريح الدقيق والترقيع تتطلب مهارات حركية دقيقة جداً، مما يجعل تعلمها صعباً.ابدأ بغسل أي شوائب من بيض الدجاج باستخدام ماء فاتر. رتب البيض أفقياً على صينية، ثم حدد الجوانب الموجهة للأعلى باستخدام قلم رصاص للإشارة إلى المنطقة التي سيتمركز فيها الجنين. لتحضير أجنة مانحة بطريقة X ovo، يتم تحضين أرجل السمان بحيث يكون الجانب غير المدبب للأسفل.بعد ذلك، ضع البيض في حضانة مرطبة عند درجة حرارة 38 degrees Celsius وقم بتفعيل خاصية التدحرج. وبعد انتهاء فترة تحضين البيض، قم بتعقيم الأجزاء العلوية عن طريق رشها بـ 70%ethanol ثم مسحها بسرعة باستخدام منديل Kim wipe. ولتجنب أي امتصاص عبر قشرة البيضة، ضع كل بيضة معقمة على حامل بيض فردي، على غرار طبق Petri المبطن بمناديل Kim wipes مطوية كما هو موضح هنا. ثم باستخدام ملقط AA معقم، اصنع ثقباً صغيراً في السطح العلوي لقشرة البيضة عند الطرف المدبب للبيضة.قم بتجهيز حقنة سعة خمسة ملي لتر بإبرة تحت الجلد قياس 18.5. ثم أدخل الإبرة عمودياً في الثقب الموجود في قشرة البيضة، مع توجيه الشطب نحو الطرف المدبب للبيضة. ولتجنب إتلاف المح، عن طريق السحب العرضي، قم بتنظيف الثقب بـ 70% ethanol كما سبق، ثم أحكم إغلاق الثقب باستخدام شريط لاصق.بعد ذلك، وباستخدام ملقط double A، قم بعمل ثقب آخر في السطح العلوي المحدد للساق الأفقية، بحيث لا يكون عند القمة تماماً. تالياً، أدخل أحد طرفي ملقط القزحية المنحني في الثقب بشكل موازٍ للبيضة. ثم قم بالضغط على القشرة مع التحريك في حركة دائرية.قم بعمل فتحة بقطر 2 cm في قشرة بيضة الدجاج، وتخلص من جزء القشرة الذي تمت إزالته. يجب أن يظهر الجنين كقرص معتم فوق المحّ. تخلص من أي بيض غير مخصب، والذي يمكن التعرف عليه من خلال وجود بقعة بيضاء صغيرة على سطح المحّ أو غياب القرص الجرثومي.الآن، ومع ارتداء واقي العين المناسب، قم بثني إبرة تحت الجلد عيار 26.5 بزاوية 45 درجة بدءاً من قاعدة الإبرة. بعد تركيب الإبرة المثنية بحيث يكون الجانب المائل للأعلى في حقنة سعة 1 مل، املأ الإبرة بحبر الهند المخفف. اثقب غشاء المح في منطقة خارج محيط الـ blaster، ثم مرر طرف الإبرة أسفل الجنين، بحيث يكون قريباً من سطح المح، ولكن ليس داخل الطبقات الجنينية.بعد ذلك، احقن كمية كافية فقط من الحبر لتحديد محيط الجنين، مع تجنب حقن أي فقاعات. اسحب الإبرة بعناية. الآن استخدم مجهراً ستيريوسكوپياً ومصدراً ضوئياً ذا حمل حراري محدود، مثل مصباح عنق الإوزة بالألياف الضوئية الموضح هنا.قم بتحديد مرحلة نمو الأجنة وفقاً لتصنيف هامبورجر وهاملتون. سجل المرحلة على قشور البيض. ثم ضع قطرتين إلى ثلاث قطرات من محلول رينجر المعقم والدافئ على سطح الأجنة لمنع الجفاف والتلوث.بعد ذلك، قم بمد غشاء البارافيلم فوق سطح البيض لإغلاق النوافذ مؤقتاً. بعد ذلك، قم بتجهيز بيض السمان لعملية النقل. وقبل إخراج البيض من الحاضنة، املأ طبق بتري بمحلول رينجر.بعد ذلك، افتح البيوض من الجانب غير المدبب باستخدام ملقط منحني لإظهار الجنين. وباستخدام مقص التشريح، قم بإجراء أربعة شقوق على شكل مربع عبر الغشاء الزغبي والقرص المعقيمي خارج الجنين، مع التأكد من التقاء جميع الشقوق. ثم باستخدام ملقط قزحية منحني، امسك أحد حواف الشق برفق وارفع الجنين من البيضة وانقله إلى طبق بتري المجهز.أخيرًا، قم بإزالة الغشاء المحيقي بلطف باستخدام ملقط رقم خمسة، ثم قم بتحديد مرحلة الأجنة تحت مجهر تشريحي. قم بإزالة البارافلم من جنين الدجاجة المضيف. بعد ذلك، وباستخدام إبرة تنجستن مدببة، اصنع ثقباً صغيراً في الغشاء المحيقي عند المنطقة المطلوبة من الأنبوب العصبي.أضف قطرة من محلول رينجر إلى الجنين. بعد ذلك، بالنسبة للطعوم أحادية الجانب، كما هو موضح في هذا الفيديو، استخدم إبرة زجاجية مسحوبة لإجراء شقوق عرضية من الجهتين المنقارية والذيلية بدقة في منطقة الدماغ المتوسط للأنبوب العصبي، مع مراعاة عدم تجاوز التجويف. ثم قم بالقص ثنائياً بين الأنبوب العصبي الظهري والميزوديرم الجداري.أخيرًا، افصل بعناية الجزء المستأصل (ex explan) عن الأنبوب العصبي، ثم قم بإزالته من الجنين عن طريق شفطه في ماصة دقيقة زجاجية. أولاً، استخدم جنيناً لسمانة في نفس المرحلة العمرية. ثم استأصل منطقة من الأنبوب العصبي بحجم مماثل لما تم عرضه للتو، واشفط الجزء المانح (X explan) في ماصة دقيقة زجاجية تحتوي على محلول رينجر (ringers solution).انقل قطعة الإيضاح X إلى المنطقة المجاورة للمنطقة المستأصلة من مضيف الصوص. ثم باستخدام إبرة زجاجية مسحوبة، وجه قطعة الإيضاح برفق وقم بتوجيهها إلى المنطقة المزال نسيجها. أضف بعناية بضع قطرات من محلول رينجر إلى الجنين لمنع الجفاف.أخيرًا، قم بإغلاق النافذة باستخدام شريط لاصق، مع التأكد من أن الشريط يغلق المنطقة بأكملها من البيضة التي تحتوي على النافذة، ثم أعد البيضة إلى الحاضنة حتى الوصول إلى المرحلة المطلوبة، مع إيقاف تشغيل وظيفة الهز أثناء تحضين kyira، ويمكن تدوير X بلطف يدويًا مرتين في اليوم لزيادة قابليتها للبقاء. إذا كانت المراحل المتأخرة من النمو هي المستهدفة، فإن هذه الصورة التمثيلية للمنطقة المطعمة من الأنبوب العصبي بعد ست ساعات من إعادة التحضين حتى المرحلة HH 11، تظهر الاندماج المتوقع لأنسجة المانح من السمان المطعمة داخل الأنبوب العصبي للمضيف من الدجاج. يظهر هذا المقطع العرضي عبر المنطقة المطعمة في المرحلة HH 11 خلايا العرف العصبي المحددة بـ hnk، حيث تهاجر إحداها جانبيًا بعيدًا عن الأنبوب العصبي.يتم تمييز خلايا السمان التي تساهم في تدفق هجرة خلايا العرف العصبي وفي الأنبوب العصبي بوضوح باستخدام QCPN. وفي مراحل لاحقة، يمكن تتبع الخلايا المشتقة من خلايا العرف العصبي للسمان وصولاً إلى نسيجها المستهدف النهائي. وكما يتضح في هذا الشكل، تتوزع الخلايا المُميزة بـ QCPN ضمن عملية الفك العلوي لجنين الدجاج في المرحلة E5. ويمكن دمج الجسم المضاد QCPN بسهولة مع أجسام مضادة أخرى لفحص تمايز خلايا العرف العصبي المشتقة من السمان.في بيئة المضيف. كما يظهر هنا، تم وسم العصبونات الحسية ثلاثية التوائم المشتقة من خلايا العرف العصبي للسمان باستخدام الأجسام المضادة QCPN و T UJ one. عقب هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل الكيمياء النسيجية المناعية والتهجين الموضعي للإجابة على أسئلة إضافية، مثل ما هي الأنسجة التي تنشأ من خلايا العرف العصبي، وما هي الجينات التي تعبر عنها خلايا العرف العصبي أثناء تمايزها إلى أنسجة مختلفة.

analysis-neural-crest-migration-differentiation-cross-species

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

لزراعة الخلايا الجذعية العصبية قمة (NCSC) في المختبر ، مطلوب المتوسطة الخاصة (NCSCM). جزء أساسي من NCSCM الفرخ هو استخراج الجنين (CEE). نحن هنا وصف دقيق تقنيات لإنتاج كمية من أوروبا الوسطى والشرقية إلى أقصى حد نوعية نقية وعالية ، بما في ذلك تفاصيل مثل العزلة ، والنقع ، الطرد المركزي ، وعمليات الترشيح.

إنتاج استخراج الجنين الفرخ لزراعة الخلايا الجذعية العصبية الفئران كريست

يوصف هذا النهج لتحليل الهجرة من الخلايا explanted (خلايا الجذع قمة العصبية). هذه الطريقة غير مكلفة، لطيف، وقادرة على التمييز الكيميائي من كلا تنشيط كيميائي والتأثيرات الأخرى على الاستقطاب المهاجرة مثل تلك المشتقة من خلية خلية التفاعلات داخل الجذع العصبية الأولية قمة الثقافة الخلية.

تحليل العصبية كريست الهجرة جذع الخلية باستخدام التعديل الفحص غرفة زيجموند

العزلة من قمة العصبية الجنينية من الأنبوب العصبي يسهل...

العزلة والثقافة من الخلايا العصبية كريست من الأنبوبة العصبية الجنينية الفئران

ويخضع اللحمة المتوسطة الجمجمة الحركات المثيرة التي توفر morphogenic المرجح قوة دافعة للارتفاع طيات...

مقايسة لتقييم سلوك يزدرع الخلوية من اللحمة المتوسطة القحف

يصف هذا البروتوكول كيفية تشريح premigratory قمة العصبية القحفية (NC) من القيطم neurulas المورق. هذه إإكسبلنتس يمكن مطلي على فبرونيكتين وتربيتها في المختبر، أو المطعمة مرة أخرى إلى الأجنة المضيفة. هذه التقنية تسمح بدراسة آليات NC ظهارة إلى اللحمة المتوسطة التي تمر بمرحلة انتقالية، والهجرة، والتمايز.

تشريح<em&gt; القيطم المورق</em&gt; العصبية كريست ل<em&gt; في المختبر</em&gt; يزدرع الثقافة أو<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; زرع

تم تنفيذ مزيج من التقنيات البصرية المتقدمة في ليزر المسح المجهري مع الطول الموجي الفوتوني متعدد الأسفار الإثارة منذ وقت طويل لالتقاط التصوير عالية الدقة، ثلاثي الأبعاد، في الوقت الحقيقي للهجرة crest العصبي في تيراغرام (sox10:EGFP) والأجنة الزرد تيراغرام (foxd3:GFP).

تصوير مرور الوقت فوتون متعددة لتصور التنمية في الوقت الحقيقي: التصور لترحيل الخلايا العصبية كريست في الأجنة الزرد

يصف هذا البروتوكول تشريح وثقافة خلايا الجمجمة العصبية القحفيه من نماذج الفئران ، وذلك في المقام الأول لدراسة هجره الخلايا. نحن وصف تقنيات التصوير الحية المستخدمة وتحليل التغيرات السرعة وشكل الخلية.

تشريح والثقافة وتحليل خلايا الجمجمة العصبية الابتدائية من الماوس لدراسة الخلية كريست العصبية الترقيم والهجرة

توضح هذه المقالة تقنية زرع الأنسجة التي تم تصميمها لاختبار خصائص الإشارات والأنماط للدماغ الأمامي القاعدي أثناء النمو القحفي الوجهي.

إنشاء كيميرا الدماغ الأمامي للطيور لتقييم نمو الوجه

يصف هذا البروتوكول متعدد الاستخدامات عزل خلايا القمة العصبية المهاجرة (NCCs) من خلال استئصال الطيات العصبية القحفية من أجنة الكتاكيت. عند الطلاء والحضانة ، تظهر NCCs المهاجرة من الطيات العصبية ، مما يسمح بتقييم مورفولوجيا الخلية والهجرة في بيئة 2D مبسطة.

إعداد وتحليل مورفولوجي لمزارع خلايا القمة العصبية القحفية للكتكوت

نقدم بروتوكول تمايز ثلاثي الأبعاد (3D) في المختبر يولد مجالات عصبية ذات حجم قابل للتكرار لإنتاج خلايا قمة عصبية قحمية من الخلايا الجذعية الجنينية للفأر. نوضح أن هذه المنهجية تقلل من التباين مقارنة بالبروتوكولات السابقة وكيف يمكن استخدامها في الفحص متعدد الإرسال لدراسة تطور خلايا القمة العصبية القحفية.

خلايا القمة العصبية القحفية ثلاثية الأبعاد في بروتوكول التمايز في المختبر للفحص متعدد الإرسال

اكتشف طريقة زرع الأنبوب العصبي الظهري من جنين السمان إلى جنين الدجاج لتتبع هجرة الخلايا السرطانية العصبية ومصيرها. تُمكّن هذه التقنية الباحثين من دراسة التمايز الخلوي في الأجنة الكيميرية.

تحليل للهجرة كريست العصبية والتمايز بواسطة الصليب الأنواع زرع

استكشف المزيد من الفيديوهات