January 28th, 2012
التحقق من صحة اختبار الذيل التعليق كإجراء تجريبي لتقييم نجاعة العلاج بالعقاقير المضادة للاكتئاب من في الفئران. وعلقت الفئران التي ذيولها لمدة ست دقائق ، ويتم تقييم الهروب السلوكيات ذات الصلة. نحن تصف الإجراءات المستخدمة في إجراء اختبار تعليق الذيل.
اختبار تعليق الذيل هو اختبار سلوكي شائع يستخدم للتنبؤ بفعالية مضادات الاكتئاب لمختلف التلاعبات التجريبية. يوضح هذا الفيلم إجراءات هذا الاختبار. تم التحقق من صحة اختبار تعليق الذيل للماوس ولا ينصح به للقوارض الكبيرة.
في اختبار تعليق الذيل ، يتم تعليق الفئران بواسطة ذيولها. يظل الماوس معلقا لمدة ست دقائق. يتم تسجيل سلوكيات الموضوع خلال هذا الوقت.
في نهاية فترة الاختبار التي تبلغ ست دقائق ، تتم إزالة الشريط من ذيل الموضوع. بعد اكتمال الاختبار ، يتم نقل التسجيلات المرئية إلى جهاز كمبيوتر أو شاشة فيديو. للتحليل ، يقيس المراقب الوقت الذي يقضيه الفأر في النضال خلال جلسة الست دقائق بأكملها.
تزيد المركبات ذات الخصائص المضادة للاكتئاب من مقدار الوقت الذي أقضيه في الكفاح. وينعكس ذلك في فترات أقصر من الجمود. على سبيل المثال ، أبلغنا أن دواء استقرار الحالة المزاجية الليثيوم ، وهو مفيد سريريا كدواء مساعد مضاد للاكتئاب ، قلل من وقت الجمود في اختبار تعليق الذيل.
مرحبا ، اسمي شون من مختبر الدكتور تود جولد في قسم الطب النفسي في كلية الطب بجامعة ماريلاند في بالتيمور. مرحبا ، أنا شانتيل من نفس المختبر. في هذا الفيديو ، سنوضح لك كيفية أداء اختبار تعليق الذيل وتسجيله.
يستخدم اختبار تعليق الذيل لتقييم الفعالية المحتملة للعلاجات المضادة للاكتئاب. لذلك دعونا نذهب إلى المختبر ونوضح لك كيفية إجراء التجربة. على الرغم من أنه ليس مطلوبا ، إلا أننا نستخدم صندوق تعليق الذيل المصمم خصيصا.
لهذا الاختبار. ينقسم صندوق تعليق الذيل الخاص بنا إلى أربع مقصورات ، كل منها مخصص لماوس واحد. تمنع الفواصل الفئران من مراقبة بعضها البعض أثناء الاختبار.
ومع ذلك ، من الممكن استخدام رف أو هيكل آخر لتعليق الفئران. يتم تحديد أبعاد صندوق اختبار تعليق الذيل لمنع الفئران من الوصول إلى الحواف والتمسك بها. قبل البدء في التجربة ، قم بقص ما يكفي من شظايا الشريط وقم بتمييز الجزء الذي سيتم استخدامه للالتصاق بالذيل.
في مختبرنا ، سنستخدم شظايا شريط بحجم 17 سم. يجب وضع علامة على سنتيمترين من نهاية جزء الشريط هذا وسيتم استخدامه للالتصاق بالذيل. نضع الذيل في منتصف هذا الجزء الذي يبلغ طوله سنتيمترين.
ضع صندوق اختبار تعليق الذيل وكاميرا الفيديو. قبل إدخال ، يجب تنظيف الصندوق جيدا بمحلول تعقيم لتحييد الروائح المتبقية من الموضوعات السابقة. في مختبرنا ، نستخدم صندوقين مختلفين لتعليق الذيل ، متطابقين في كل جانب باستثناء اللون.
بالنسبة للفئران البيضاء ، يوفر الصندوق الرمادي الداكن تباينا جيدا لتسجيلات الفيديو. بالنسبة لسلالات الماوس ذات الألوان الداكنة ، يكون الصندوق الأبيض مناسبا. ابدأ تشغيل آلة الضوضاء البيضاء.
يجب أن يخفي أي أصوات متقطعة. أحضر الفئران إلى غرفة الإجراءات للتأقلم. يجب أن تظل الظروف في الغرفة ثابتة وخالية من الضوضاء والتغيرات في مستويات الضوء والاضطرابات المحتملة الأخرى.
هذه الفترة بشكل عام ساعة واحدة على الأقل. بمجرد انتهاء فترة التأقلم ، يمكن بعد ذلك المضي قدما في الاختبار لمنع سلالات معينة من الفئران من تسلق ذيولها. أثناء اختبار تعليق الذيل ، نستخدم أسطوانات بلاستيكية نضعها فوق ذيولها.
تستقر هذه الأسطوانات عند قاعدة ذيلها أثناء الاختبار. في مختبرنا ، نستخدم أسطوانات بلاستيكية يبلغ طولها أربعة سنتيمترات وقطرها سنتيمترا واحدا وتزن 1.5 جرام. إذا تم استخدام الأسطوانات البلاستيكية لمنع التسلق ، فيجب وضعها على ذيولها قبل وضع الشريط.
نطبق الشريط على نهاية الذيل مع بقاء ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات من الذيل خارج الشريط. قم بلصق الشريط على ذيول الفئران في قفص منزلهم. استخدم الطرف المحدد للشريط وتأكد من أن الشريط يلتصق بالذيل ويعود إلى نفسه.
بمجرد تطبيق الشريط ، قم بتثبيت كل فأر على جدران القفص لمنع تشابك الشريط المتصل بحيوانات مختلفة. أكمل هذه العملية بسرعة. خلاف ذلك ، سوف تتعرض الفئران لضغوط غير ضرورية.
يجب أن يبدأ التسجيل قبل تعليق. قم بتعليق عن طريق وضع الطرف الحر للشريط على شريط التعليق بترتيب متوازن بين مجموعات العلاج وبطريقة لا تعيق رؤية الكاميرا. نظرا لأن الفئران معلقة واحدة تلو الأخرى ، فإن كل لديه وقت بدء مختلف قليلا للاختبار.
تأكد من البدء في تسجيل كل ماوس بالضبط في بداية فترة التعليق. من المهم عدم إعاقة عرض الكاميرا. نظرا لأن جلسة تعليق الذيل بأكملها سيتم تسجيلها على أنها معوقة ، فقد يؤدي عرض الكاميرا إلى فقدان البيانات.
تأكد من أن جميع نهايات الشريط متعامدة مع قضيب التعليق بنفس طول الركود. لكل موضوع، ابدأ المؤقت. اختبار تعليق الذيل هو ست دقائق.
بمجرد انقضاء فترة الاختبار لمدة ست دقائق ، قم بإزالة الشريط من نهاية كل ذيل وأعد الفئران إلى قفص منزلها. في نهاية الاختبار ، يجب تسجيل معلومات الموضوع بالفيديو. بعد إعادة الفئران إلى غرفة المستعمرة ، يجب تنظيف صندوق الاختبار جيدا ومسحه بمحلول التعقيم.
الآن بعد أن انتهينا من الاختبار ، سنناقش تسجيل السلوكيات. المتغير الوحيد الذي يتم تقييمه عادة عند تسجيل اختبار تعليق الذيل هو الوقت الذي تكون فيه غير متحركة للحصول على وقت الجمود ، سنقيس الوقت الذي تكون فيه الفئران متحركة ونخصم ذلك من وقت الاختبار الست دقائق. سنسجل الدقائق الست كاملة من الاختبار.
نقوم أولا بتغطية الفئران التي لم يتم تقييمها للسماح للمراقب بالتركيز على واحد فقط لكل وقت يقضيه الفأر. يتم قياس الهاتف المحمول بواسطة ساعة إيقاف على الشاشة يتم التحكم فيها بواسطة جهاز لوحة الألعاب. هنا ، كما ترى ، هناك ساعتان منفصلتان على الشاشة يتم التحكم فيهما في وقت واحد.
تقوم ساعة الإيقاف الأولى بالعد التنازلي من 360 ثانية وتشير إلى مدة الاختبار للمراقب. تقيس ساعة الإيقاف الثانية الوقت الذي تظل فيه الأشخاص متحركين. كما قد تلاحظ ، فإن ساعة الإيقاف الثانية مغطاة بساعة الإيقاف الأولى ولا يمكن رؤية سوى الكسور عشرية بالمللي ثانية للمراقب.
بهذه الطريقة ، سيتمكن المراقب من معرفة ما إذا كانت ساعة الإيقاف قيد الحساب ، ولكن لا يمكنه رؤية إجمالي وقت التنقل حتى يكتمل التسجيل. نقوم بذلك لمنع تحيز المراقبين من التأثير على النتائج. تظهر الفئران ، خاصة في بداية الجلسة ، سلوكيات متعلقة بالهروب.
تشمل هذه السلوكيات محاولة الوصول إلى جدران الجهاز وقضيب التعليق ، والاهتزازات القوية للجسم وحركات الأطراف الشبيهة بالجري. من الواضح أن هذه الحركات تشكل حركة. ومع ذلك ، مع تقدم الاختبار ، تصبح الحركات أكثر دقة.
في مختبرنا ، لا نحسب الحركات الصغيرة التي تقتصر على الأرجل الأمامية ، ولكن بدون أي حركة للأرجل الخلفية على أنها حركة. بالإضافة إلى هذا البندول ، لا تعتبر التقلبات مثل البندول التي ترجع إلى اكتساب الزخم خلال نوبات التنقل السابقة حركة. الآن دعونا نرى تسجيل جلسة اختبار تعليق الذيل الفعلية.
يتم الإبلاغ بشكل عام عن وقت الجمود وليس وقت الحركة. يمكن حساب وقت الجمود عن طريق طرح إجمالي وقت التنقل من وقت الاختبار البالغ 360 ثانية. سجل. يتطلب اختبار تعليق الذيل التدريب والممارسة.
من المهم وضع معيار مختبر داخلي وتدريب مراقبين جدد حتى يصلوا إلى مستوى عال من الموثوقية. في هذه الورقة ، نوضح كيفية أداء وتسجيل اختبار تعليق الذيل. حظا سعيدا في تجاربك المستقبلية.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
اختبار تعليق الذيل هو إجراء سلوكي معتمد يُستخدم لتقييم فعالية مضادات الاكتئاب لعلاجات الأدوية في الفئران. خلال هذا الاختبار، يتم تعليق الفئران بذيولهم لست دقائق، ويتم تسجيل سلوكيات الهروب ذات الصلة.
The tail suspension test provides a standardized behavioral readout for evaluating antidepressant-like activity in preclinical models, supporting early-stage target validation and mechanistic de-risking of CNS-active compounds. By quantifying escape-oriented behaviors as a proxy for behavioral despair, the assay enables high-throughput screening of prospective therapeutics with predictive confidence in mood disorder indications. This assay informs go/no-go decisions in discovery pipelines by linking pharmacological modulation to quantifiable behavioral outputs relevant to antidepressant efficacy.
The tail suspension test fits within the discovery continuum from target hypothesis testing through lead identification to preclinical efficacy assessment, particularly for CNS depression indications where behavioral despair is a measurable endpoint.