السريرية اختبار وإزالة العمود الفقري الحبل في الفأر نموذج لتصلب الأنسجة العضلية الجانبية (ALS)

يتم فحص الفأر نموذج لتصلب الأنسجة العضلية الجانبية (ALS) سريريا وسلوكيا. كشرط أساسي لتحليل 1 immunohistological المرافق وصفت إعداد الحبل الشوكي بالتفصيل.

مرحبا ، اسمي لار تيرنر. أنا باحث ما بعد الدكتوراه في قسم طب الأعصاب بجامعة إنغام بألمانيا. مرحبا ، اسمي لين جوندا.

أنا طالب طب وأقوم بعمل أطروحتي في هذا المختبر. سنعرض لكم اليوم الاختبار السريري ل SODG 93 ، وهو نموذج طحلب للتصلب الجانبي الضموري. علاوة على ذلك ، سنعرض اختبار الوظيفة الحركية مع ما يسمى باختبار الدوار ، بالإضافة إلى اختبار وظيفة حركية آخر مع قبضة السلك المعلقة من أجل إجراء تحليل منطقي مناعي.

بعد الاختبار الوظيفي للفئران ، يتكون الإجراء الضروري من إزالة الحبل الشوكي والعصب STIC وعضلة المعدة. نريد أن نعرض هذه الإجراءات الجراحية بالتفصيل ويقدم أحدهم بعض النتائج المنطقية المناعية النموذجية في النهاية. حسنا ، لكن الآن لنبدأ أولا بالاختبار السريري.

هذا هو نوع البري الحر الذي لا يظهر أي أعراض سريرية مثل رعشة العضلات أو بارسيس في نظام التصنيف السريري لدينا. سيكون هذا هو النتيجة الرابعة. هذا هو A LS moe المعدلة وراثيا.

في مرحلة مبكرة من المرض ، يظهر هزة شديدة في الطرف الأيمن الذي يصنفه على أنه درجة ثلاثة E.تشوهات المشي الشديدة تصنف هذا على أنه درجة الثانية. يتم تصنيف سحب طرف خلفي واحد على الأقل على أنه درجة سريرية واحدة في اختبار الأسلاك المعلقة ، ويتم تقييم قوة الضلع العضلي الخام. يتم وضع كل ماوس على سلك مخصص ويقلب بحذر رأسا على عقب فوق الزر المغطى بالقش.

بعد التدريب لثلاث مرات متتالية لا تقل عن 180 ثانية ، تم قياس زمن انتقال السقوط. يتم إعطاء كل ماوس ما يصل إلى ثلاث محاولات للاحتفاظ بالغطاء المقلوب لمدة أقصاها 180 ثانية ، ويتم تسجيل أطول فترة مقارنة بالماوس من نوع السلك الأبيض على الجانب الأيمن. الفأر المعدل وراثيا على اليسار ضعيف جدا ويسقط من الغطاء قبل الوصول إلى الحد الأقصى.

يستخدم جهاز قضيب الدوار لقياس التنسيق الحركي والتوازن والقدرة على التعلم الحركي. يتطلب الأداء الجيد مرسوما عاليا للتنسيق الحركي الحسي. وهو يتألف من مغزل دوار يتم التحكم فيه بواسطة الكمبيوتر ، وخمسة ممرات لخمسة أمتار.

يتم الكشف عن أخطاء الفئران تلقائيا عن طريق الضغط على اللوحة البلاستيكية السفلية. بعد التدريب لمدة ثلاث مرات متتالية لا تقل عن 180 ثانية بسرعة ثابتة تبلغ 15 طلقة في الدقيقة ، يتم قياس الوقت الذي يمكن أن يبقى فيه على العفن الدوار. يخضع كل لثلاث تجارب ويتم تسجيل أطول زمن انتقال دون سقوط.

يعمل الطحالب البرية الصحية على الجانب الأيسر دون صعوبة على قضيب الدوار. في المقابل ، يعاني المعدل وراثيا على الجانب الأيمن من مشاكل خطيرة حتى للبقاء على قضيب الدوار وينزلق بعد فترة من الملاحظة من الخلف. ترى صعوبات الجري الشديدة للفأر الأيسر.

بالمقارنة مع ماوس الصنبور السلكي الصحي ، فهو غير قادر على مواكبة سرعة قضيب الدوار ولا يمكنه الدفع لأعلى بأطراف HIT. من أجل إجراء تحليل كيميائي مناعي للحبل الشوكي ، يجب التضحية بالحيوانات. من المهم جدا اتباع الإرشادات المحلية بدقة لإجراء التجارب على بشكل صحيح.

في هذا السياق ، في هذه النظرة العامة المبسطة للغاية للعمود الفقري والأنسجة المحيطة به ، يتم تصوير الهياكل التشريحية الرئيسية. سنضع على جانبه البطني ونبدأ في تحضير العضلات من الكيس الظهري. بعد إزالة الأنسجة العضلية ، سنصل إلى العمود الفقري الذي يحيط بالحبل الشوكي.

بعد التضحية بالحيوان وتزويده بمحلول يحتوي على ارتفاع طفيلي ، يمكن إزالة الحبل الشوكي. يتم وضع على طاولة العمليات ويتم تثبيت الأطراف الكاملة على الجانبين وترتيب فضح الجزء الخلفي من الفأر. يتم ترطيب لتسطيح معطف الشعر وتسهيل شق الجلد التالي.

لهذا ، يتم استخدام مشرط حاد. احرص على تمديد الجلد إلى كلا الجانبين. لتسهيل قطع عضلة الساق يجب أن تكون مستعدة.

يجب أيضا شق جلدهم. بعد اكتمال شق الجلد ، يتم سحبه جانبا برفق. مع زوج من الملقط بعد إزالة عضلات الساق والعصب الوركي ، نواصل الاقتراب من الحبل الشوكي ووضع على طاولة عمليات جديدة.

أصبح من السهل الآن التعرف على عنق الجمجمة والعضلات والعمود الفقري. بعد تحديد كل هذه الهياكل ، من السهل الانتقال إلى الخطوة التالية. يجب إزالة عضلات الرقبة والرباط الجديد.

احرص على عدم الشق بعمق وقيادة العمود الفقري. في الخطوة التالية ، تتم إزالة العضلات الفقرية بالكامل لفضح العمود الفقري. من أجل الوصول إلى العمود الفقري ، يجب إجراء العديد من عمليات استئصال الجسم.

نبدأ من الجزء العنقي من العمود الفقري ، بما في ذلك المفصل القذالي الأطلسي. لإجراء استئصال الصفيحة الفقرية ، يتعين علينا قطع القوس الفقري حتى نتمكن من إزالة جميع العمليات الفقرية من الجسم الفقري. كما هو موضح من قبل ، يبدأ استئصال الصفيحة الفقرية بقطع الأقواس

ثم يمكن سحب اللينا. مرة أخرى ، احرص على عدم إصابة الحبل الشوكي حيث يجب إزالة العديد من الأحجار النخاعي. من المفيد جدا استخدام مقص بزاوية وتركيب العديد من الأقواس الفقرية لكلا الجانبين في وقت واحد.

ثم اسحب العمليات الظهرية لإزالة الصفيحة الفقرية تماما واللقطة المقربة. ترى أنه يجب إدخال زوج المقص بعناية بشكل جانبي على جانب القناة الشوكية. يجب إزالة الأجزاء الجانبية المتبقية من العمود الفقري لتسهيل الإزالة الكاملة للحبل الشوكي لاحقا.

المعلم التشريحي للحبل الشوكي هو ما يسمى بمعرقة عنق الرحم والقطنية. بعد الانتهاء من استئصال العضلات في الحبل الشوكي بأكمله ، تأكد أيضا من تجاوز جميع الجذور البطنية للحبل الشوكي وإطلاقه من المادة اللاحقة للسحايا. بعد ذلك ، يتم قطع الحبل الشوكي العنقي.

في الجمجمة وتبدأ إزالتها مرة أخرى. لمس الحبل الشوكي بحذر شديد حتى لا تضر بهذا النسيج ، لأن هذا قد يسبب قيودا شديدة على التحليل المناعي الكيميائي المناعي في وقت لاحق. تستمر إزالة الحبل الشوكي على المستوى الصدري وانتقل إلى الجزء القطني.

يتم قطعها أخيرا مرة أخرى هذه المرة على جانب الحبل الفرس. الآن نحن قادرون على إطلاقه بالكامل. هنا ترى الحبل الشوكي موضوعا بجوار موقعه الأصلي في عمود RAL.

في النهاية ، يتم وضعه في حل تثبيت Paraform Hyde. كمثال كلاسيكي للتحليل الكيميائي المناعي للحبل الشوكي ، يمكنك تطبيق جسم مضاد يتعرف على الكولين ، أسيتيل ترانسفيراز لتحديد الخلايا العصبية الحركية في القرن الأمامي للحبل الشوكي. هنا ترى عددا كبيرا من الخلايا العصبية الحركية في بري صحي.

في المقابل ، يظهر LS المعدل وراثيا في المرحلة النهائية عددا أقل بكثير من الخلايا العصبية الحركية في القرن الأمامي. عند مشاهدة مقال الفيديو هذا ، يجب أن تكون قد تعلمت الفحص السريري الأساسي ل SODG 93. نموذج فأر للتصلب الجانبي الضموري.

تم إثبات اختبارين سلوكيين حركيين: اختبار الدوار واختبار الأسلاك المعلقة. أنها توفر إمكانية جيدة لتقييم الوظيفة الحركية الأساسية. إنها سهلة الأداء وحساسة في الكشف عن عجز المحرك وكفاءة الوقت.

يتكون الجزء الرئيسي من هذا الفيديو من عرض توضيحي لتقنية تحضير الحبل الشوكي. يمكن تطبيق هذا بالطبع على أي نموذج آخر لمرض الفئران وهو خطوة أساسية للتحليل الكيميائي المناعي اللاحق لأمراض المرض في النخاع الشوكي. شكرا لك على المشاهدة.

نأمل أن تكون مقالة الفيديو هذه مفيدة لتجاربك المستقبلية.