قياس ديفورمابيليتي وعدم تجانس الخلايا الحمراء في الدم من اكتاسيتوميتري

الهدف العام من هذه التقنية هو قياس تشوه الخلايا الحمراء وعدم التجانس الخلوي عن طريق قياس الخلايا الشبكية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في قياس الخلايا الحمراء مثل مدى تشوه كريات الدم الحمراء ، ومدى عدم تجانس عينة الدم ، وكيف تتغير التجربة كدالة للمرض. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنيات في إمكانية الوصول والراحة والموثوقية في قياس قابلية التشوه وعدم التجانس لمجموعات خلايا الدم الحمراء.

قد تكون هذه التقنيات مفيدة لمراقبة الاستجابة للعلاج في مرضى فقر الدم المنجلي. لأن تشوه الخلايا الحمراء وعدم تجانسها مرتبطان بتكوين الهيموجلوبين وتركيزه. يمكن تطبيق هذه الطرق على أمراض أخرى تتميز بانخفاض تشوه الخلايا الحمراء ، مثل مرض السكري ، حيث قد يساهم انخفاض تشوه الخلايا الحمراء في الإصابة بأمراض الأوعية الدموية الدقيقة.

ابدأ بتوصيل الأنبوب الأسمولي الصفري بمحلول PVP الأسمولي المنخفض ، والأنبوب الأسمولي 500 بمحلول PVP الأسمولي العالي. تأكد من إنزال البوب بالكامل في الكوب. قم بتشغيل البرنامج وتجهيز الجهاز عن طريق تحديد فحص الأجهزة، ثم أداة IO. اسمح للأداة بإكمال دورة التحضير.

بمجرد اكتمال الدورة ، ارفع البوب من الكوب وجفف البوب والكوب تماما بمنديل تنظيف منخفض الوبر. امزج برفق عينة دم كاملة مأخوذة حديثا عن طريق قلب القارورة عدة مرات. بعد ذلك ، قم بتقطيع 25 ميكرولترا من الدم الكامل إلى خمسة ملليلتر من محلول PVP iso-osmolar.

بعد تغطية القارورة ، اخلطيها برفق عن طريق قلبها عدة مرات مرة أخرى. اختر قابلية التشوه من القائمة الرئيسية للبرنامج ، ثم قم بإنشاء تحليل جديد وأضف التفاصيل التجريبية. بعد ذلك ، ارفع غطاء مقياس ضغط الضغط ، وتحقق من أن البوب قد تم إنزاله بالكامل في الكوب وأن الكوب يدور.

ماصة ملليلتر واحد من محلول الدم PVP في الفراغ بين الكوب والبوب. ثم ارفع البوب قليلا لإسقاط العينة. انتظر حتى تخرج جميع الفقاعات من المحلول ، ثم أغلق الغطاء على مقياس ضغط الضغط.

اضبط الكسب على 200 عن طريق تحريك السهم على طول شريط التمرير في البرنامج. عندما تكون درجة الحرارة مستقرة عند 37 درجة مئوية وتكون صورة الحيود مستقرة ، اضغط على ابدأ. راقب أنماط الحيود مع تقدم الحصول على البيانات للتأكد من بقائها دائرية أو بيضاوية الشكل أو ماسية.

عند اكتمال الحصول على البيانات، اطبع التقرير ونظفه. يظهر نمط الحيود الذي تم الحصول عليه من الدم السليم استجابة لإجهاد القص النمط الإهليلجي المتوقع. يتم حساب مؤشر الاستطالة باستخدام المعادلة الموضحة هنا.

عندما يتم شفط العينة ، اشطف المسافة بين الكوب والبوب عن طريق رش الماء منزوع الأيونات في الفراغ بينما تظل الأداة في الدورة النظيفة. بمجرد اكتمال دورة التنظيف ، ارفع البوب من الكوب وجفف البوب والكوب تماما بمنديل تنظيف منخفض الوبر. يعد التجفيف المناسب أمرا بالغ الأهمية ، حيث أن الماء المتبقي سيؤدي إلى تحلل الخلايا الحمراء ، مما ينتج عنه تداخل.

حدد تصدير لحفظ التقرير. أخيرا ، انقر فوق زر القائمة الرئيسية في البرنامج للعودة إلى الصفحة الرئيسية. بعد تحميل عينة أخرى في مقياس كثافة الخلايا كما كان من قبل ، تأكد من وجود صورة حيود مستقرة على الشاشة.

اضبط كسب الكاميرا عن طريق تحريك المسطرة على طول الشاشة حتى ينتج ارتفاعا للحيود 3.8 سم. استخدم مسطرة للتحقق من ارتفاع الصورة على شاشة الكمبيوتر. ثم اضغط على ابدأ وراقب الحصول على البيانات كما كان من قبل.

تظهر هذه الصورة نمط حيود بطول 3.8 سم تم الحصول عليه من دم مريض فقر الدم المنجلي. بعد تنظيف مقياس كثافة الخلايا كما هو موضح سابقا ، كرر الإجراء للحصول على أنماط حيود عند ارتفاعات 4.5 سم و 5.4 سم. يحدث تشوه نمط الحيود في عينات دم غير متجانسة لأن الخلايا الحمراء الصلبة لا تتماشى بشكل صحيح مع الخلايا القابلة للتشوه ، مما يؤدي إلى نمط حيود على شكل ماسي.

يمكن اكتشاف نمط التشويه هذا بشكل متزايد حيث يتم ضبط كسب الكاميرا لإنشاء أنماط حيود أكبر. بالنسبة لقياس التدرج التناضحي ، ابدأ بإضافة 250 ميكرولتر من الدم الكامل إلى قارورة تحتوي على خمسة ملليلتر من PVP متساوي الأسمولي واخلطها برفق. اختر Osmoscan من القائمة الرئيسية في البرنامج.

ثم ضع القارورة التي تحتوي على محلول PVP للدم أسفل الإبرة على الجانب الأيسر من الجهاز. اخفض الإبرة حتى تلامس قاع القارورة. تأكد من توصيل الأنبوب بشكل صحيح بمحاليل الأسمولية المنخفضة والعالية لإنتاج التدرج.

أغلق غطاء مقياس ضغط الشبكة وافتح الباب في النصف السفلي لتمكين رؤية الدم الذي يدخل الأنبوب. اضغط على تحليل جديد واكتب التفاصيل التجريبية. بعد ضبط كسب الكاميرا على 200 ، اسمح للجهاز بالعمل حتى يدخل الدم إلى الكوب من الأنبوب الموجود أسفل الجهاز.

عندما تعرض شاشة الكمبيوتر نمط حيود ثابت، ابدأ الحصول على البيانات بالضغط على الزر ابدأ الآن في مربع الحوار. اسمح لمقياس ضغط الشبكة بالحصول على بيانات تصل إلى حوالي 500 مللي أوسمول لكل كيلوغرام ، ثم أوقف الجهاز. اطبع التقرير.

بعد ذلك ، قم بإزالة قارورة الدم القديمة PVP واستبدلها بقارورة نظيفة تحتوي على ماء منزوع الأيونات. اسحب الإبرة لأسفل بحيث تلامس الجزء السفلي من القارورة ، ثم اضغط على زر الشطف في مربع الحوار لشطف نظام التدرج. بمجرد اكتمال الشطف، اضغط على خيار التنظيف في مربع الحوار على شاشة الكمبيوتر، وحدد تصدير لحفظ التقرير.

جفف البوب والكوب كما كان من قبل. لا تنتج مجموعات الدم المتجانسة ، كما هو موجود في المتطوعين الأصحاء ، منحنيات مختلفة للتشوه عند قياس أحجام الحيود. في المقابل ، تظهر مجموعات الدم غير المتجانسة مثل الدم من مرضى فقر الدم المنجلي ، انخفاضا كبيرا في مقاييس التشوه كدالة لحجم نمط الحيود.

في الدم المنجلي ، عندما يتم قياس درجة تشويه نمط الحيود كدالة ل EI max ، فإنه يرتبط بالهيموجلوبين S ، ومتغير الهيموجلوبين البالغ ، الهيموجلوبين A2. يصحح نقل الدم التشويه ، كما يتضح من علاقته العكسية مع النسبة المئوية للهيموجلوبين الطبيعي للبالغين في الدم. سواء تم قياس درجة تشوه نمط الحيود كدالة لإجهاد القص المطلوب لتحقيق نصف أقصى تشوه ، أو كدالة ل EI max ، فإنه يرتبط بالهيموجلوبين الجنيني. توفر معلمات قياس التدرج التناضحي الرئيسية ، مثل EI max و EI min و O min ، معلومات إضافية حول الترطيب الخلوي ، ونسب السطح إلى الحجم ، والهشاشة التناضحية ، على التوالي.

بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنيات في غضون ساعة واحدة تقريبا ، إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل الفحص المجهري للإجابة على أسئلة إضافية تتعلق بتشوه كريات الدم الحمراء الفردية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية قياس التشوه وعدم تجانس المصل في عينات الدم.