نموذج زرع الخلايا الهنترونظيرية الجزئية في الفئران

نحن نقدم نموذجا جراحيا موثوقا وقابلا للاستنساخ لزرع الأطراف الخلفية غير النظيرية في الفئران. هذه التقنية مثالية للدراسات قصيرة الأجل حول الحفظ أو الرفض المناعي في VCA. سيسمح الوصف خطوة بخطوة للمتدربين بإتقان الجراحة بسرعة.

للبدء، قم بعمل شق محيطي على الجلد فوق الكاحل في الثلث القاصد من الساق. هيكل عظمي وكى الشريان السابهين والفرع النهائي للشريان البوبلايتال باستخدام ملقط ثنائي القطب. الكي وقطع gastrocnemius، سوليوس، الساق الأمامي، والعضلة ذات الرأسين femoris العضلات حتى يتم الكشف عن العظام الظنبوبية.

جعل شق 2.5 سم في تجعد الإربية الحق وتشريح لوحة الدهون الأربية. استخدام الأسماك هوك retractor لفهم الرباط الأربي. عقد لوحة الدهون الأربية distally مع ملقط لقط وتراجع لوحة الدهون لفضح الأوعية الفخذية.

تشريح الأوعية الفخذية، وتفرد فروع ميرفي، وligate مع العلاقات النايلون 8/0. Heparinize الجرذ المانحة عن طريق حقن الهيبارين في الوريد الظهر القضيب باستخدام إبرة قياس 27.5. أكمل شق الجلد حول الورك.

استخدام ملقط ثنائي القطب لكي العضلة ذات الرأسين femoris وglutes السطحية العضلات، ثم الكي وقطع العصب الوركي في منتصف طول عظم الفخذ. فضح عظم الفخذ بشكل قريب على مستوى قمة الفخذ الخلفية وligate الأوعية الفخذية مع ربطات النايلون على مستوى الرباط الأربي. إجراء عملية استئصال الشرايين على الشريان الفخذي أسفل الرباط بقليل وتمدد لإدخال الأوعية الدموية قياس 24.

الكي وقطع العضلات المتبقية تحت باديكل لفضح الجانب الأمامي من عظم الفخذ. استخدام قطع العظام لقطع الساق وكيلا وقطع عظم الفخذ كما distally ممكن. قم بغسل الجزء الخلفي الجزئي مع ملليلترين من محلول الهيبارين المالح للحصول على تدفق وريدي واضح.

ضع الأطراف الخلفية على الثلج في شاش معقم حتى نقل الأوعية الدموية الدقيقة. تشريح لوحة الدهون الأربية واتكاء لوحة الدهون الأربية distally لفضح الأوعية الفخذية. استخدام هوك لسحب الرباط الأربي واللقط ملقط لعقد لوحة الدهون الأربية distally.

تشريح الأوعية الفخذية، وتفرد فروع ميرفي، وligate مع العلاقات النايلون كما هو موضح. Ligate كلا السفن فوق الأوعية epigastric باستخدام العلاقات النايلون. ضع المشابك التقريبية بشكل تقريبي ، ووسع عدسة السفينة ، وشطفها بمحلول ملحي الهيبارين.

إجراء شق على الجناح الأيسر فوق الورك وإنشاء جيب تحت الجلد مع نفق تحت الجلد إلى تجعد الأربية. ضع الجزء القريب من الطرف الجزئي ووسادة الدهون الأربية عبر النفق تحت الجلد لنقل الأوعية الدموية الدقيقة. إجراء anastomoses الوريدية والشريانية باستخدام الغرز النايلون.

إزالة المشابك تقريبا على حد سواء ومراقبة إعادة الأوعية الدموية من الطرف. إجراء اختبار الحلب على كل من السفن لتقييم patency من كل التخدير. إجراء شق الجلد الطولي على الجانب الوسيط من الطرف المزروع وإدراج الكسب غير المشروع.

إزالة الجلد الزائد من الكسب غير المشروع وإغلاق الجرح مع الغرز منفصلة وخياطة تشغيل باستخدام خياطة قابلة للامتصاص 4/0. خياطة معا منصات الدهون الأربية من الطرف المزروع والمتلقي باستخدام اثنين من الغرز قابلة للامتصاص منفصلة وإغلاق تجعد الأربية بعد الفحص الأخير من الحشرات الأوعية الدقيقة. تم رصد تطور نموذج الأطراف الخلفية غير النظيرية حتى نهاية الدراسة.

لوحظت إعادة نمو الشعر خلال الأسبوع الأول بعد الجراحة ، وظهر التراجع الجلدي بعد أسبوعين. يمكن أن يحدث فشل التكسير المركب الوعائي خلال الأسبوع الأول بعد الجراحة بسبب تجلط الأوعية الدموية الدقيقة. كان التجلط الوريدي هو سبب القتل الرحيم المبكر في 20٪ من الحالات، وكلها حدثت قبل اليوم الخامس بعد الجراحة.

وبدا الجلد الأزرق وأصبح أكثر قتامة كل يوم. تشويه الذات هو مصدر قلق خطير في الطعوم لا معنى لها وغالبا ما يحدث بين اليوم الثاني والسابع بعد الجراحة. إذا اقتصرت على أقل من ثلث سطح الكسب غير المشروع وتتعلق فقط الجلد، يمكن مناقشة debridement الجراحية وخياطة باستخدام الغرز غير قابلة للامتصاص مع الطبيب البيطري الموظفين.

تعتمد الوقاية من تشويه الذات على استخدام طوق إلكتروني مخيط في الرقبة حتى اليوم السابع بعد الجراحة وتنظيف أي دم أو قشرة على الجروح الجراحية للحيوان. الأوتوفاجيا الشديدة من طبقات متعددة من الكسب غير المشروع يؤدي إلى القتل الرحيم للحيوان. ظهرت الخراجات الجلدية بعد اليوم الرابع عشر بعد الجراحة ، وأحيانا مع مركز جلدي قبل الناسور.

من المهم التأكد من أن وضع الكسب غير المشروع لن يمنع الحيوان من أن يكون متنقلا ، وأن البديكل ليس مشدودا أو ضيقا أثناء فترة الكسب غير المشروع. أجرى فريقنا دراسات الحفظ في الأطراف المشتراة قبل الزرع. وقد تم تقييم آثار فترات مختلفة من التخزين البارد الساكن وكذلك بروتوكولات مختلفة لتشويش الأطراف.