ثنائي الفينيل متعدد الكلور الرقمي القطيرات للكشف عن طفرات Indels في مجموعات البعوض Anopheline المعدلة وراثيا

4.2K مشاهدة

استشهد بها 3

05:51 دقيقة

يونيو 28, 2021

10.3791/62607-v

يونيو 28, 2021

4.2K مشاهدة

Rebeca Carballar-Lejarazú¹ , Thai Binh Pham² , Adam Kelsey¹ , Taylor Tushar¹ , Anthony A. James¹^,²

¹Department of Microbiology & Molecular Genetics, University of California, Irvine, ²Department of Molecular Biology & Biochemistry, University of California, Irvine

يوفر هذا البروتوكول الخطوات من استخراج الحمض النووي إلى الإعداد التجريبي ل PCR القطيرات الرقمية (ddPCR) ، بما في ذلك تحليل لتحديد وتحديد كمي لأحداث الانضمام النهائي غير المتجانسة (NHEJ) في المواقع المستهدفة بعد انشقاق Cas9 الناجم عن الحمض النووي الريبي وإصلاح الحمض النووي. وتشمل الاستخدامات الأخرى لهذه الطريقة تطبيقات مثل الكشف عن تعدد الأشكال والتحقق من متغير تحرير الجينات.