نموذج مبسط لزرع صمام القلب غير المتجانس في القوارض

يقترح زرع صمام القلب كنوع جديد من عمليات الزرع مع إمكانية تقديم صمامات قلب متينة ، قادرة على النمو الجسدي دون الحاجة إلى مضادات التخثر. هذه التقنية عملية وأكثر وضوحا من الطرق السابقة لدراسة البيولوجيا المناعية لزراعة صمام القلب. بعد تخدير الفئران ، استخدم مقص التشريح لشق الجلد من الخناق إلى الشق القصي.

وإجراء استئصال القص عن طريق قطع الأضلاع على كل جانب ، جانبي إلى القص حتى يتم تحقيق الوصول الأمثل إلى القلب. حقن الهيبارين في الأذين الأيسر. بعد التقديس ، واستئصال الغدة الصعترية لتحسين تصور الأوعية الكبيرة.

ثم قم بإزالة القلب على الكتلة مع الشريان الأورطي الصاعد حتى مستوى الشريان المرشح. بعد وضع قلب المتبرع في طبق بتري معقم مباشرة بعد استئصال القلب ، في مخزن مؤقت للتخزين البارد ، استخدم الملقط ومقص Vannas Spring لتشريح القلب حتى يبقى جذر الأبهر فقط مع الكفة البطينية الملليمترية الواحدة القريبة من الصمام الأبهري. لفتح الصمام الأبهري ، قم بعمل قطع طولي لفتح الجيوب الأنفية في Valsalva بين الجيوب الأنفية اليسرى وغير التاجية لتصور جميع المنشورات الثلاثة.

لاستئصال كل وريقة صمام أبهري على حدة، استخدم الملقط الحاد للإمساك بحافة النشرة واستخدم مقص فاناس الربيعي لاستئصال النشرة عن طريق القطع من فتحة واحدة وصولا إلى الحلقة ثم نحو الفتحة التالية. قم بتخزين المنشورات التي تم استئصالها في محلول عازل للتخزين البارد حتى تصبح جاهزة للزرع في الفئران المتلقية ، ولكن قم بزرع جميع المنشورات في غضون أربع ساعات من التخزين البارد. بمجرد تخدير الفئران المتلقية بالكامل ، حافظ على درجة حرارة الجسم عند 36 إلى 38 درجة مئوية طوال الجراحة باستخدام وسادة التدفئة.

بعد ذلك ، ضع الفئران في وضع راقد جانبي أيمن للوصول إلى الكلى اليسرى. إعطاء البوبرينورفين للفئران المتلقية تحت الجلد قبل الجراحة. واستخدم المقص لشق الجلد فوق الجناح طوليا لمدة بوصة واحدة.

وبالمثل ، شق جدار البطن الأساسي. باستخدام الإبهام والسبابة ، قم بتطبيق ضغط خفيف ظهريا وبطنيا أثناء استخدام الملقط المنحني. رفع القطب الذيلي للكلية من خلال شق البطن والجلد.

إضفاء الطابع الخارجي على نهاية الجمجمة من الكلى بالمثل. بدلا من ذلك ، قد تكون الكلى خارجية عن طريق الإمساك بالدهون المحيطة بالكلى وسحبها لأعلى مع توتر خفيف. بمجرد إخراجها ، حافظ على رطوبة الكلى بمحلول ملحي دافئ مسحة على الكلى.

من أجل إنشاء جيب تحت المحفظة ، ابدأ بتطبيق ضغط خفيف على الكبسولة الكلوية باستخدام مجموعة واحدة من الملقط الحاد بحيث يمكن تمييز الكبسولة الكلوية بوضوح عن الحمة الأساسية. في وقت واحد باستخدام مجموعة أخرى من الملقط الحاد ، أمسك الكبسولة بعناية واسحبها بلطف لأعلى لإنشاء ثقب في الكبسولة. باستخدام ملقط حاد، قم بتمديد الشق حتى يتم إنشاء مساحة تبلغ حوالي مليمترين لاستيعاب وريقة الصمام الأبهري.

قم بتطوير جيب ضحل تحت المحفظة أكبر قليلا من نشرة الصمام أثناء رفع حافة الشق بمجموعة واحدة من الملقط وتقدم مسبار حاد تحت الكبسولة الكلوية. ابدأ عملية زرع الصمام الأبهري المسترد عن طريق رفع الكبسولة الليفية الطرفية التي تقدم النشرة الأبهرية إلى الجيب تحت المحفظة باستخدام ملقط حاد. يمكن ترك الشق والكبسولة الكلوية مفتوحة.

ادفع الكلى بلطف إلى وضعها التشريحي باستخدام الجر المضاد المطبق على حواف الشق. أغلق شق البطن بخياطة جراحية معقمة وأغلق الجلد بالدبابيس. بعد العملية ، ضع الفئران في قفص نظيف على وسادة تدفئة مع إمكانية الوصول إلى الطعام والماء.

إذا لزم الأمر ، قم بإعطاء البوبرينورفين للفئران المتلقية كل ست إلى اثنتي عشرة ساعة لتخفيف الألم. راقب الحيوان يوميا لتقييم التئام الجروح الروتيني وعلامات الألم أو الضيق. وإزالة الدبابيس بعد سبعة إلى عشرة أيام من الجراحة.

تظهر صورة تمثيلية موضع نشرة الصمام الأبهري تحت الكبسولة الكلوية للتنفيذ. وبعد ثلاثة وسبعة وثمانية وعشرين يوما داخل الفئران المتلقية ، أصبح تحديد موقع الأنسجة المزروعة واستعادتها أمرا سهلا. احتفظت وريقات الصمام الأبهري بهندستها المعمارية الأصلية بعد الزرع غير المتجانس في الحيوانات المتزامنة.

إظهار فائدة هذا النموذج كخط أساس لمقارنة الاستجابة المناعية في عمليات الزرع المسببة للحساسية. كشف علم الأنسجة مع تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين أن وريقات الصمامات في عمليات الزرع المتجانسة بعد سبعة أيام كانت سليمة هيكليا مع عدم وجود علامات على تورم ذمي. تم تأكيد السلامة الهيكلية لنشرة الصمام بعد الزرع من قبل الكيمياء النسيجية المناعية للأكتين العضلي الأملس و CD31.

وريقات الصمام الأبهري حساسة للغاية. من المهم التعامل معها بعناية فائقة دون إتلاف الصمامات. زرع صمام القلب تحت المحفظة الكلوية يبسط زراعة صمام القلب غير المتجانس.

سيسمح ذلك للباحثين ذوي القدرات الجراحية المجهرية المحدودة باستكشاف البيولوجيا المناعية لزرع صمام القلب.