بروتوكول لتطوير نموذج قطع عظم الفخذ في فئران ويستار ألبينو

يمكن أن يساعد نموذج قطع عظم الفخذ هذا الباحثين في دراسة عملية التئام الكسور وتقييم كيفية تأثير الدواء على التئام الكسور. إنه نموذج بسيط وسهل المتابعة للقوارض يمكن أن يساعد الباحثين على تحديد ما إذا كان الدواء له خصائص شفاء العظام وفهم آلية عمله. على الرغم من أنه يركز بشكل أساسي على مراقبة وتحليل التئام الكسور ، إلا أنه يمكن أن يعطي أيضا نظرة ثاقبة على التسبب في المرض.

يمكن أن توجه هذه الطريقة الأبحاث المستقبلية حول شفاء العظام في الصحة والمرض. يمكن استخدامه لتقييم تأثير أدوية الابتنائية العظمية المحتملة. يعد إحداث خط كسر مناسب وتثبيت الكسر باستخدام سلك K أمرا صعبا.

بضع جلسات تدريب يجب أن تساعد. تتجلى بساطة هذه الطريقة وقابليتها للتكرار في عرضها المرئي ، وسيساعد باوان باجاكو ، وهو مقيم مبتدئ من مختبري ، في توضيح الإجراء. للبدء ، ضع كتلة الشمع التي تحتوي على شمع يصل عمقه إلى 2.5 سم على طاولة العمليات وقم بتغطيتها بستائر معقمة.

بعد إجراء شق جلدي عمودي بسنتيمتر واحد على الجانب الجانبي من الفخذ الأيمن ، قم بكشف العضلة الوعائية الجانبية عن طريق فصل اللفافة العميقة باستخدام مقص Metzenbaum. قم بتقسيم الأوعية الدموية الجانبية بما يتماشى مع ألياف العضلات حتى يتم الوصول إلى عمود عظم الفخذ. بعد ذلك ، استخدم المصعد السمحاق لتحرير العظم من العضلات المرتبطة به.

بعد حقن التخدير الموضعي في السمحاق وحوله ، قم بإنشاء مسافة بادئة في الثلث الأوسط من عمود عظم الفخذ باستخدام الشفرة الجراحية رقم 15. ضع إزميل على المسافة البادئة واضغط برفق على الإزميل بمطرقة لكسر العظم تماما في الثلث الأوسط من العمود. قم بإصلاح الكسر داخليا باستخدام سلك K معقم بحجم ملليمتر واحد بمساعدة مثقاب طاقة يعمل بالبطارية.

مرر السلك K إلى القناة النخاعية للجزء البعيد عبر موقع الكسر. بعد ذلك ، قم بحفر سلك K من خلال الطرف البعيد لعظم الفخذ. بعد تقليل الكسر ، قم بدفع سلك K من الطرف البعيد إلى قناة الجزء القريب حتى يحصل على الشراء في منطقة المدور.

اقطع الجزء البعيد من سلك K البارز عبر الجلد باستخدام قاطع الأسلاك. ثني طرف سلك K إلى حوالي 90 درجة باستخدام كماشة واستخدم ضمادة شاش مبللة في Betadine لتضميد موقع الدبوس. يعمل السلك K كجبيرة داخل النخاع للحفاظ على الكسر في وضع منخفض.

الضغط على منطقة النزيف باستخدام شاش معقم أو ملقط شرياني لوقف أي نزيف. تأكد من الإرقاء الكامل قبل إغلاق الجلد باستخدام خياطة نايلون 4-0. نظف الجرح باستخدام Betadine وقم بتغطيته بشاش معقم وشريط لاصق micropore.

للحصول على رعاية ما بعد الجراحة ، أعد الفئران إلى أقفاصها واستمر في إعطاء نظام غذائي شبه اصطناعي قياسي بالإضافة إلى المضادات الحيوية والمسكنات داخل الصفاق لمدة خمسة أيام بعد العملية. أخيرا ، قم بتقييم التئام العظام عن طريق الأشعة السينية للموقع المكسور مرة واحدة أسبوعيا. يتم عرض الأشعة السينية لعظم الفخذ للفأر باستخدام K-wire NC2 قبل إحداث الكسر ، وبعد يوم واحد من الجراحة.

تتم مراقبة التئام الكسر إشعاعيا عن طريق أخذ أشعة سينية أسبوعية متسلسلة لموقع التشغيل لتقييم تكوين الكالس. يبقى الكسر منخفضا وثابتا باستخدام سلك K داخل النخاع. بعد التضحية في نقطة زمنية محددة مسبقا ، تم الحفاظ على عظم الفخذ بعناية في الفورمالين ، تليها إزالة الكلس من العظام.

تم الحصول على العظام مع الكالس بعد إزالة الكلس الأمثل. يظهر هنا الكالس السليم والقسم السهمي من الكاالس. يتم تقييم الكالس بشكل متقطع لضمان إزالة الكلس المثلى قبل تقييمه باستخدام تقنيات أخرى.

يتم عرض صور التكبير المنخفض والتكبير العالي للجزء الملطخ بالهيماتوكسيلين والإيوزين من موقع الكسر هنا. تظهر الأجزاء الملطخة من موقع الكسر الكالس الصلب مع تكوين الغضروف والعظام الجديدة. يمكن رؤية الطرف المكسور للعظم والمنطقة القشرية الثانية هنا.

السمحاق الجزء الأكثر حساسية للألم من الجرح ، ومن الضروري التسلل إلى السمحاق في موقع الكسر بمخدر موضعي قبل قطع العظم. يمكن أن يتبعه التحليل المناعي الكيميائي والإشعاعي للتصوير المقطعي المحوسب القاسي للقياس النسيجي الكمي ، وتحليل القوة الميكانيكية الحيوية لتحليل الكالس في المصل. هذه التقنية مفيدة لتحديد إمكانات العظم ، وآلية العمل ، والتحليل المقارن للأدوية الابتنائية العظمية الواعدة.