Name: النهج الجراحي والتحديات والقرارات لزراعة الرحم في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-04-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 22 s
Description: تعلم تقنية زراعة الرحم الأيمن في الفئران باستخدام الجراحة المجهرية المعقدة. يوفر هذا البروتوكول خطوات مفصلة لتحقيق معدلات عالية من الولادات الحية بعد الزراعة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم دعم هذه الدراسة من قبل المؤسسة الوطنية السويسرية للعلوم (منحة المشروع رقم 310030_192736). نود أن نشكر الدكتورة فراوك سيهوسن من معهد علم الأمراض البيطرية بجامعة زيورخ على دعمها النسيجي المرضي.

تم إجراء جميع التجارب على الحيوانات وفقا للوائح الحيوانات الفيدرالية السويسرية ووافق عليها المكتب البيطري في زيورخ (رقم 225/2019) ، مما يضمن رعاية الإنسان. تم استخدام إناث فئران لويس العذراء (وزن الجسم 170-200 جم) وإناث الفئران العذراء براون النرويج (170-200 جم) كمتبرعين / متلقين للرحم ، بينما تم استخدام ذكور فئران لويس (300-320 جم) للتزاوج. كانت الفئران تتراوح أعمارهم بين 12-15 شهرا. تم الحصول على الحيوانات من مصادر تجارية (انظر جدول المواد) وتم إيواؤها في ظروف خاضعة للرقابة وبيئة غنية مع حرية الوصول إلى المياه والغذاء القياسي.
1. استرجاع الرحم
ملاحظة: للحصول على تفاصيل حول الإجراء ، يرجى الاطلاع على التقارير المنشورة مسبقا12،13،15.
<ol><li>قم بالتخدير باستخدام الأيزوفلوران والأكسجين داخل حاوية زجاجية مغلقة (14 سم × 25 سم × 13 سم) لمدة 1-2 دقيقة (5٪ إيزوفلوران في O2).<ol><li>تطبيق البوبرينورفين تحت الجلد (0.05 ملغ/كغ) وبوبيفاكايين (0.5٪، 8 ملغ/كغ) تحت الجلد في منطقة شق البطن المخطط له قبل 30 دقيقة من الجراحة.</li>
		<li>حلق كل جلد البطن من الفئران مع ماكينة حلاقة كهربائية.</li>
		<li>استخدم الأشرطة للحفاظ على الحيوان مثبتا على صفيحة تسخين أثناء الجراحة. ضع مرهم العين على كلتا العينين.</li>
		<li>الحفاظ على التخدير أثناء العملية مع 2-4 فول٪ إيزوفلوران في الأكسجين عن طريق الإدارة المستمرة من خلال مخروط الأنف الصغير.</li>
		<li>مراقبة عمق التخدير من خلال المعلمات السريرية دون أدوات متخصصة (معدل التنفس ~ 70-120 / دقيقة - انخفاض معدل بطيء بنسبة 50 ٪ مقبول أثناء التخدير ؛ التحقق من عمق التخدير مع قرصة إصبع القدم ؛ يجب أن يكون لون الأغشية المخاطية وردي ، وليس أزرق أو رمادي) 16 ، وضبط تركيز الأيزوفلوران وفقا لذلك. ملاحظة: اختياري: مراقبة التنفس المتكررة أثناء الجراحة ممكنة بمساعدة مساعد.</li>
		<li>تأكيد عمق التخدير عن طريق إجراء قرصة إصبع القدم.</li>
		<li>نظف جلد البطن بحركة دائرية بثلاث مسحات متناوبة من محلول مطهر وكحول 70٪. السماح ليجف.</li>
		<li>ضع ستارة معقمة (انظر جدول المواد) مع نافذة بطنية فوق الحيوان.</li>
	</ol></li>
	<li>أداء بضع البطن المتوسط.<ol><li>افتح البطن عن طريق شق بطول خط الوسط 6-8 سم ، بدءا من 0.5 سم أسفل xiphisternum باتجاه hypogastrium. استخدم مشرطا رقم 10 لشق الجلد ومقصا حادا صغيرا لشق خط ألبا. لا تضر الكبد أو المثانة.</li>
		<li>حرك الأمعاء خارج تجويف البطن باستخدام مسحات قطنية ، وقم بتغطيتها برفق بشاش مبلل بمحلول ملحي معقم ، وقم بحمايتها بكيس بلاستيكي معقم لعزل أفضل.</li>
		<li>أدخل مبعدات أو مشابك (انظر جدول المواد) في مجلدات جدار البطن الأيسر والأيمن للحفاظ على العضلة البريتونية جانبا والبطن مفتوحا ، للحصول على الوصول الأمثل ورؤية الرحم والأوعية المرتبطة به. إصلاح المشابك / المبعدات مع الأشرطة.</li>
		<li>ضع محلول ملحي مسخن مسبقا للحفاظ على رطوبة المنطقة الجراحية والأمعاء وتجنب جفاف الأحشاء.</li>
	</ol></li>
	<li>حصاد قرن الرحم الأيمن مع تجويف الرحم المشترك وعنق الرحم بالإضافة إلى عنيق الأوعية الدموية ، بما في ذلك الرحم الأيمن والأوعية الداخلية والحرقفية الشائعة.<ol><li>Ligate (4/0 polyglactin ؛ انظر جدول المواد) ، والكي ، وقطع قرن الرحم الأيسر المجاور للتفرع من تجويف الرحم المشترك.</li>
		<li>إزالة الدهون الزائدة المحيطة بالرحم والمهبل. ملاحظة: الحفاظ على الدهون حول نظام الرحم والأوعية الدموية.</li>
		<li>تشريح المثانة عند تعلقها بعنق الرحم مع الكي لجميع أوعية المثانة التصريف والتغذية. أثناء الكي ، حافظ على مسافة كافية بين عنق الرحم والمهبل لتجنب الكي غير الضروري على هذين الهيكلين. خلاف ذلك ، يزيد خطر نخر الكسب غير المشروع. ملاحظة: يجب أن تؤثر معظم عمليات التلاعب الجراحي على المثانة. اسحب المثانة أو اسحبها ذيليا بمشبك وعائي (انظر جدول المواد) للحصول على رؤية أفضل للحفر المذلي.</li>
		<li>كي وقطع الأوعية الرحمية الهابطة على مستوى الحالب بعيدا عن عنق الرحم قدر الإمكان. ملاحظة: الحفاظ على دوران الأوعية الدقيقة حول المهبل وعنق الرحم قدر الإمكان أثناء الانقسام.</li>
		<li>افصل الجزء العنقي / المهبلي من الكسب غير المشروع المستقبلي عن مرفق المستقيم والأربطة المجاورة للمهبل وعنق الرحم. ملاحظة: تجنب أي كي على مهبل الكسب غير المشروع.</li>
		<li>تشريح المهبل بعناية عن طريق الإنفاذ الحراري حول 2-3 مم الذيلية من عنق الرحم. ملاحظة: لا توجد زغابات (عنق الرحم) مرئية داخل تجويف المهبل.</li>
		<li>حدد موقع كل من الشريان الرحمي والوريد في أصولهما. Ligate (8/0 مادة البولي أميد ؛ انظر جدول المواد) ، والكي ، وقطع الأوعية الألوية وجميع الأوعية الذيلية للأوعية الرحمية. ملاحظة: عادة ما يكون الربط المباشر للوريد الحرقفي الذنبي المشترك بالوريد الرحمي ممكنا.</li>
		<li>عن طريق التشريح الحاد ، حرر الأوعية الحرقفية الشائعة من بعضها البعض ، من تشعب الشريان الأورطي والوريد الأجوف وصولا إلى تقسيم الأوعية الرحمية. ملاحظة: يمكن للمرء الحصول على وصول جراحي أفضل إلى المنطقة عن طريق إزالة واحدة أو اثنتين من العقد الليمفاوية المجاورة.</li>
		<li>استئصال قرن الرحم الأيمن 3 مم من قناة فالوب ، بعد كي عنيق الرحم والمبيض على نفس المستوى. وهذا يتيح مفاغرة قرن الرحم الكسب غير المشروع إلى الجزء العلوي من قرن الرحم المتلقي.</li>
		<li>ضع الحروف المركبة (8/0 بولي أميد) مباشرة حول الشريان الحرقفي المشترك الأيمن والوريد ، بالقرب من تشعبات الأبهر والأجوف. قم بعمل شق صغير (0.5-1 مم) في الشريان الحرقفي المشترك الأيمن المجاور للتشعب ، وأدخل إبرة 30 جم منحنية أو إبرة مستقيمة 25 جم في التجويف (للتنظيف). تأمينه مع الرباط (6/0 مادة البولي أميد). ملاحظة: هناك خيار آخر وهو تأمين إضافي بمشبك البلدغ لتجنب إزاحة الإبرة و / أو الوعاء.</li>
		<li>تشريح الوريد الحرقفي المشترك الذيلي للرباط في الوريد الحرقفي المشترك الأيمن لتمكين التدفق أثناء التنظيف.</li>
	</ol></li>
	<li>اغسل الكسب غير المشروع باتباع الخطوات أدناه.<ol><li>اغسل الرحم يدويا باستخدام محاقن سعة 3 مل مع حوالي 9 مل من محلول رينغر البارد (RHX: رينغر مكمل ب 50 وحدة دولية / مل من الهيبارين و 0.4 مجم / مل زيلازين) بمعدل تدفق 6 مل / دقيقة. اغسل مرة أخرى ب 6 مل من محلول حفظ الأعضاء المكمل بالهيبارين (50 وحدة دولية / مل) والزيلازين (0.4 مجم / مل) (انظر جدول المواد). ملاحظة: تجنب ارتفاع ضغط التنظيف وتأكد من وضع الإبرة بشكل صحيح.</li>
		<li>قم بإزالة عملية الزرع عندما يصبح لون أنسجة الرحم شاحبة. قطع الشريان الحرقفي المشترك ذيليا من الرباط عند تشعب الشريان الأورطي البطني.</li>
	</ol></li>
	<li>ضع عملية الزرع في محلول حفظ الأعضاء المبرد (4 درجات مئوية) لإعداد الطاولة الخلفية وتخزينها قبل الزرع.</li>
	<li>بعد إزالة الكسب غير المشروع ، قم بالقتل الرحيم للحيوان عن طريق تحويل إعداد isoflurane أولا إلى الحد الأقصى ثم تحفيز استرواح الصدر الثنائي متبوعا بالاستنزاف17.</li>
</ol>2. زرع الرحم الاصطناعي
ملاحظة: للحصول على تفاصيل حول الإجراء ، يرجى الاطلاع على التقارير المنشورة مسبقا12،13،15.
<ol><li>حث التخدير وإعداد الحيوان كما هو مذكور في الخطوة 1.1.<ol><li>تطبيق تسكين فعال (كما هو موضح في الخطوة 1.1.1) و200 وحدة دولية/كغ من الهيبارين عالي الوزن الجزيئي قبل 30 دقيقة من الجراحة.</li>
	</ol></li>
	<li>أداء بضع البطن المتوسط.<ol><li>افتح البطن عن طريق شق خط الوسط بطول 6-8 سم يبدأ من 0.5 سم تحت xiphisternum باتجاه hypogastrium. استخدم مشرطا رقم 10 لشق الجلد ومقصا حادا صغيرا لشق خط ألبا. لا تضر الكبد والمثانة.</li>
		<li>انقل الأمعاء الدقيقة خارج تجويف البطن باستخدام مسحات قطنية ، ولفها بشاش مبلل معقم ، وقم بتغطيتها بكيس بلاستيكي معقم لعزل أفضل.</li>
		<li>أدخل مبعدات أو مشابك في مجلدات جدار البطن الأيسر والأيمن لإبقاء العضلات البريتونية جانبا والبطن مفتوحا ، للحصول على الوصول الأمثل ورؤية الرحم والأوعية المرتبطة به. إصلاح المشابك / المبعدات مع الأشرطة.</li>
		<li>ضع محلول ملحي مسخن مسبقا للحفاظ على رطوبة المنطقة الجراحية والأمعاء وتجنب جفاف الأحشاء.</li>
	</ol></li>
	<li>إجراء استئصال الرحم مع تشريح وتعبئة الثلث العلوي من المهبل من المستقيم والمثانة.<ol><li>كي الأوعية الدموية الدقيقة حول الرحم وعنق الرحم والمهبل. قطع وفصل الرحم عن الهياكل المحيطة القريبة من العضو لحماية دوران الأوعية الدقيقة في الرحم شريرة.</li>
		<li>إزالة الأنسجة الدهنية من المناطق المحيطة.</li>
		<li>بتر القرن الأيسر عن طريق الكي. على الجانب الأيمن ، الحفاظ على جزء 7-8 ملم من الجزء العلوي من الرحم لمفاغرة في وقت لاحق إلى الكسب غير المشروع الرحم.</li>
	</ol></li>
	<li>إجراء زرع الرحم.<ol><li>تعبئة وفصل الأوعية الحرقفية المشتركة اليمنى ، من أصل الأوعية الرحمية حتى تشعب الأبهر / الأجوف.</li>
		<li>ضع الكسب غير المشروع في تجويف البطن. لف الكسب غير المشروع في شاش غارق في محلول الحفاظ على الأعضاء الباردة. ملاحظة: يجب أن يبقى الكسب غير المشروع باردا أثناء مفاغرة.</li>
		<li>ضع مشابك الأوعية الدموية غير الرضحية على الوريد الحرقفي المشترك الأيمن على كل جانب ، مع تأطير موقع المفاغرة في المستقبل. ملاحظة: خفض التخدير إلى 1-1.5 فول٪ إيزوفلوران للتكيف مع الانخفاض المفاجئ في التحميل المسبق للقلب وانخفاض ضغط الدم الناتج.</li>
		<li>قطع شق أكبر قليلا من فتحة الوريد الكسب غير المشروع في الوريد الحرقفي المشترك.</li>
		<li>ضع الوريد الكسب غير المشروع.</li>
		<li>ضع خيطا واحدا (10/0 بولي أميد ؛ انظر جدول المواد) في كل ركن من أركان الشق الموجود على الوريد الحرقفي المشترك الأيمن. ملاحظة: حافظ على عقدة الخياطة في الزاوية الذيلية مفكوكة لضبط أفضل ولمنع تأثيرات سلسلة المحفظة.</li>
		<li>اغسل منطقة المفاغرة بانتظام باستخدام RHX المبرد أثناء الإجراء لمنع تجلط الدم.</li>
		<li>مفاغرة جانب واحد من الوريد الكسب غير المشروع إلى الوريد المتلقي مع ستة إلى ثمانية حلقات من خياطة مستمرة (الشكل 1). ملاحظة: ابدأ بخياطة البقاء في الجمجمة (10/0 بولي أميد) وقم أولا بمفاغرة الجزء الداخلي من الأوعية.</li>
		<li>مفاغرة الجانب الآخر من السفينة بنفس الطريقة ، هذه المرة تبدأ من الخارج.</li>
		<li>اربط عقدة عند خياطة البقاء في الجمجمة ، ثم عقدة عند خياطة البقاء الذيلية (10/0 بولي أميد) ، بعد الانتهاء من المفاغرة على كلا الجانبين. ملاحظة: شد الغرز المستمرة فقط بقدر ما هو ضروري لمنع تأثيرات سلسلة المحفظة.</li>
		<li>ضع المشابك الوعائية الرضحية على الشريان الحرقفي المشترك الأيمن في كل جانب ، مما يؤطر موقع المفاغرة في المستقبل.</li>
		<li>إجراء مفاغرة الشرايين (الشريان الحرقفي المشترك الأيمن [RCIA] عبر 8-10 حلقات باستخدام الغرز المتقطعة (10/0 بولي أميد). ملاحظة: من السهل التحكم في الغرز المتقطعة مقارنة بالخيوط المستمرة (اختياري باستخدام تقنية "فم السمكة")18. يساعد التنظيف المستمر لمنطقة المفاغرة مع RHX المبرد أثناء العملية على منع تجلط الدم. عند استخدام الغرز المستمرة ، قم بإجراء هذه الخطوة المشابهة للمفاغرة الوريدية.</li>
	</ol></li>
	<li>إجراء نضح الكسب غير المشروع.<ol><li>عندما يظهر كلا موقعي المفاغرة بشكل واضح ويتم إيقاف أي نزيف ، حرر المشابك الوعائية على أوعية الكسب غير المشروع (الشكل 2).</li>
		<li>افحص الطعم بحثا عن علامات إعادة التروية ، مثل الاحمرار أو ملء الوريد أو النبض في شريان الكسب غير المشروع.</li>
		<li>قم بتوصيل الكفة المهبلية لعملية الزرع بالقبو المهبلي للمتلقي باستخدام ستة إلى سبعة خيوط متقطعة داخل اللمعة (6/0 polyglactin). ملاحظة: ابدأ بخياطة واحدة في موضع الساعة 12 أولا ، وضع الخيوط التالية في مواضع الساعة 10 و 1. يجب ربط الغرز في مواضع الساعة 9 و 3 بعد الغرز في الصف الأمامي19,20.</li>
		<li>مفاغرة قرن الرحم الكسب غير المشروع من طرف إلى طرف إلى الجزء الرحمي القحفي المتبقي من الرحم المتلقي باستخدام خمسة إلى سبعة خيوط متقطعة (7/0 بولي أميد). ملاحظة: لا تقم بخياطة التجويف.</li>
	</ol></li>
	<li>أغلق البطن بخياطة مستمرة. استخدم 4/0 بولي جلاكتين لخياطة طبقة العضلات ، و 6/0 بولي أميد أو مشابك جرح جراحية للجلد.</li>
	<li>دع الحيوان يتعافى في قفص دافئ بمجرد اكتمال عملية الزرع. البقاء مع الحيوان حتى يستعيد القدرة على الاستلقاء القصي ، والحفاظ على السكن الفردي حتى الشفاء التام. يجب توفير علاج التسكين البسودوبيرتايفي عن طريق إعطاء البوبرينورفين تحت الجلد (0.05 ملغ/كغ) ومضادات الالتهاب غير الستيروئيدية المناسبة، ولكن ليس قبل 4-8 ساعات من الجرعة الأولى من التخدير. توفير مستمر مع البوبرينورفين عن طريق مياه الشرب (1 ملغ / كغ ، عن طريق الفم ، 5 مل من البوبرينورفين في 160 مل من مياه الشرب (0.3 ملغ / مل)) لمدة ثلاثة أيام بعد الجراحة.</li>
	<li>تتم إزالة خياطة الجلد بعد 10-14 يوما من الضمان.</li>
</ol>

<ol><li>Richards, E. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uterus+transplantation%3A+state+of+the+art+in+2021%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">Uterus transplantation: state of the art in 2021.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 38 (9), 2251-2259 (2021).</li>
<li>Jones, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Options+for+acquiring+motherhood+in+absolute+uterine+factor+infertility%3B+adoption%2C+surrogacy+and+uterine+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Obstetrician+%26+Gynaecologist%22%5BJournal%5D)">Options for acquiring motherhood in absolute uterine factor infertility; adoption, surrogacy and uterine transplantation.</a> The Obstetrician & Gynaecologist. 23 (2), 138-147 (2021).</li>
<li>Brannstrom, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+clinical+trial+of+uterus+transplantation%3A+surgical+technique+and+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The first clinical trial of uterus transplantation: surgical technique and outcome.</a> American Journal of Transplantation. 14, 44(2014).</li>
<li>Ejzenberg, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Livebirth+after+uterus+transplantation+from+a+deceased+donor+in+a+recipient+with+uterine+infertility%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Livebirth after uterus transplantation from a deceased donor in a recipient with uterine infertility.</a> Lancet. 392 (10165), 2697-2704 (2018).</li>
<li>Lavoue, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+donor+for+uterus+transplants%3A+brain-dead+donor+or+living+donor%3F+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Which donor for uterus transplants: brain-dead donor or living donor? A systematic review.</a> Transplantation. 101 (2), 267-273 (2017).</li>
<li>O'Donovan, L., Williams, N. J., Wilkinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethical+and+policy+issues+raised+by+uterus+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22British+Medical+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Ethical and policy issues raised by uterus transplants.</a> British Medical Bulletin. 131 (1), 19-28 (2019).</li>
<li>Kisu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+outcome+and+rejection+after+allogeneic+uterus+transplantation+in+cynomolgus+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Medicine%22%5BJournal%5D)">Long-term outcome and rejection after allogeneic uterus transplantation in cynomolgus macaques.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (10), 1572(2019).</li>
<li>Ozkan, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uterus+transplantation%3A+From+animal+models+through+the+first+heart+beating+pregnancy+to+the+first+human+live+birth%5BTitle%5D)+AND+%22Womens+Health%22%5BJournal%5D)">Uterus transplantation: From animal models through the first heart beating pregnancy to the first human live birth.</a> Womens Health. 12 (4), 442-449 (2016).</li>
<li>Favre-Inhofer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involving+animal+models+in+uterine+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Surgery%22%5BJournal%5D)">Involving animal models in uterine transplantation.</a> Frontiers in Surgery. 9, 830826(2022).</li>
<li>El-Akouri, R. R., Wranning, C. A., Molne, J., Kurlberg, G., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+in+transplanted+mouse+uterus+after+long-term+cold+ischaemic+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Pregnancy in transplanted mouse uterus after long-term cold ischaemic preservation.</a> Human Reproduction. 18 (10), 2024-2030 (2003).</li>
<li>Sahin, S., Selcuk, S., Eroglu, M., Karateke, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uterus+transplantation%3A+Experimental+animal+models+and+recent+experience+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Turkish+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Uterus transplantation: Experimental animal models and recent experience in humans.</a> Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 12 (1), 38-42 (2015).</li>
<li>Wranning, C. A., Akhi, S. N., Diaz-Garcia, C., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+after+syngeneic+uterus+transplantation+and+spontaneous+mating+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Pregnancy after syngeneic uterus transplantation and spontaneous mating in the rat.</a> Human Reproduction. 26 (3), 553-558 (2011).</li>
<li>Wranning, C. A., Akhi, S. N., Kurlberg, G., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uterus+transplantation+in+the+rat%3A+Model+development%2C+surgical+learning+and+morphological+evaluation+of+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Obstetricia+et+Gynecologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Uterus transplantation in the rat: Model development, surgical learning and morphological evaluation of healing.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 87 (11), 1239-1247 (2008).</li>
<li>Brannstrom, M., Wranning, C. A., Altchek, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+uterus+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Update%22%5BJournal%5D)">Experimental uterus transplantation.</a> Human Reproduction Update. 16 (3), 329-345 (2010).</li>
<li>Diaz-Garcia, C., Akhi, S. N., Wallin, A., Pellicer, A., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+report+on+fertility+after+allogeneic+uterus+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Obstetricia+et+Gynecologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">First report on fertility after allogeneic uterus transplantation.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 89 (11), 1491-1494 (2010).</li>
<li>R, E., Brown, M. J., Karas, A. Z. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aR%2C+E+%22Anesthesia+and+Analgesia+in+Laboratory+Animals.+2nd+edn%22">Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. 2nd edn</a>. , Elsevier. (2008).</li>
<li>Donovan, J., Brown, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Euthanasia%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols%22%5BJournal%5D)">Euthanasia.</a> Current Protocols. , Chapter 1, Unit 1 8(2006).</li>
<li>Rutledge, C., Raper, D. M. S., Abla, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+I+do+it%3A+superficial+temporal+artery-middle+cerebral+artery+bypass+for+flow+augmentation+and+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica%22%5BJournal%5D)">How I do it: superficial temporal artery-middle cerebral artery bypass for flow augmentation and replacement.</a> Acta Neurochirurgica. 162 (8), 1847-1851 (2020).</li>
<li>Kuo, S. C. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+multiple-U+technique%3A+a+novel+microvascular+anastomosis+technique+that+guarantees+everted+anastomosis+sites+with+solid+intima-to-intima+contact%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">The multiple-U technique: a novel microvascular anastomosis technique that guarantees everted anastomosis sites with solid intima-to-intima contact.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 149 (5), 981(2022).</li>
<li>Magee, D. J., Manske, R. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMagee%2C+DJ+%22Pathology+and+Intervention+in+Musculoskeletal+Rehabilitation.+2nd+edn%22">Pathology and Intervention in Musculoskeletal Rehabilitation. 2nd edn</a>. , Elsevier. 25-62 (2016).</li>
<li>Diaz-Garcia, C., Johannesson, L., Shao, R. J., Bilig, H., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+after+allogeneic+uterus+transplantation+in+the+rat%3A+perinatal+outcome+and+growth+trajectory%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Pregnancy after allogeneic uterus transplantation in the rat: perinatal outcome and growth trajectory.</a> Fertility and Sterility. 102 (6), 1545-1552 (2014).</li>
<li>Canovai, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IGL-1+as+a+preservation+solution+in+intestinal+transplantation%3A+a+multicenter+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+International%22%5BJournal%5D)">IGL-1 as a preservation solution in intestinal transplantation: a multicenter experience.</a> Transplant International. 33 (8), 963-965 (2020).</li>
<li>Habran, M., De Beule, J., Jochmans, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IGL-1+preservation+solution+in+kidney+and+pancreas+transplantation%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">IGL-1 preservation solution in kidney and pancreas transplantation: A systematic review.</a> PLoS One. 15 (4), 0231019(2020).</li>
<li>Mosbah, I. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IGL-1+solution+reduces+endoplasmic+reticulum+stress+and+apoptosis+in+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">IGL-1 solution reduces endoplasmic reticulum stress and apoptosis in rat liver transplantation.</a> Cell Death & Disease. 3 (3), 279(2012).</li>
<li>Wiederkehr, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+IGL-1+preservation+solution+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Use of IGL-1 preservation solution in liver transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 46 (6), 1809-1811 (2014).</li>
<li>Tilney, N. L., Guttmann, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+initial+ischemia%2Freperfusion+injury+on+the+transplanted+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of initial ischemia/reperfusion injury on the transplanted kidney.</a> Transplantation. 64 (7), 945-947 (1997).</li>
<li>de Rougemont, O., Dutkowski, P., Clavien, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+modulation+of+liver+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Organ+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Biological modulation of liver ischemia-reperfusion injury.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 15 (2), 183-189 (2010).</li>
<li>Jakubauskiene, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relaxin+and+erythropoietin+significantly+reduce+uterine+tissue+damage+during+experimental+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Relaxin and erythropoietin significantly reduce uterine tissue damage during experimental ischemia-reperfusion injury.</a> International Journal of Molecular Sciences. 23 (13), 7120(2022).</li>
<li>Wang, Y., Wu, Y., Peng, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resveratrol+inhibits+the+inflammatory+response+and+oxidative+stress+induced+by+uterine+ischemia+reperfusion+injury+by+activating+PI3K-AKT+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Resveratrol inhibits the inflammatory response and oxidative stress induced by uterine ischemia reperfusion injury by activating PI3K-AKT pathway.</a> PLoS One. 17 (6), 0266961(2022).</li>
<li>Kisu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risks+for+donors+in+uterus+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">Risks for donors in uterus transplantation.</a> Reproductive Sciences. 20 (12), 1406-1415 (2013).</li>
<li>Jones, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uterine+transplantation+in+transgender+women%5BTitle%5D)+AND+%22BJOG%3A+an+International+Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology%22%5BJournal%5D)">Uterine transplantation in transgender women.</a> BJOG: an International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 126 (2), 152-156 (2019).</li>
</ol>

يعلن أصحاب البلاغ أنه ليس لديهم مصالح متنافسة.

يقدم البروتوكول المقدم هنا تعليمات مفصلة للنهج الجراحي وراء زرع الرحم في الفئران. تم تحسين البروتوكول لزيادة احتمالات الولادات الحية بعد UTx والتزاوج اللاحق. تم أخذ البروتوكول الأصلي من مجموعة Brännström 12،13 ، مستوحى من عمل الماوس ل Akouri et al.10 ، وتم تعديله بناء على تجارب المؤلفين على مدار السنوات الماضية. على هذا النحو ، كانت التعديلات مدفوعة بمنحنيات التعلم الحقيقية التي تعكس التطور من عمليات الزرع الفاشلة إلى النتائج القابلة للتكر...

زرع الرحم (UTx) هو علاج جديد لعقم عامل الرحم المطلق (AUFI). ينتج AUFI عن غياب (خلقي أو مكتسب) أو تشوه في الرحم ويؤثر على 3٪ -5٪ من النساء في جميع أنحاء العالم1. أسباب أخلاقية أو قانونية أو دينية تستبعد التبني أو تأجير الأرحام للعديد من النساء اللواتي لديهن رغبة في الأمومة ولكنهن يعانين من AUFI2. بالنسبة لهؤلاء النساء ، يظل UTx الخيار الوحيد لبدء أسرهن. تم تطبيق UTx في العيادة ، وإن كان ذلك بنجاح متفاوت. الإجراء صعب تقنيا ويتطلب تحسينا مطردا لإنشائه السريري.
في عام 2014 ، تم إجراء أول عملية زرع للرحم من متبرع حي (LD) - مما أدى إلى نجاح الحمل - من قبل المجموعة السويدية الرائدة Brännström3. تم الإبلاغ عن أول ولادة بعد UTx من متبرع متوفى (DD) في عام 2016 في البرازيل4. بحلول عام 2021 ، تم إجراء أكثر من 80 UTxs في جميع أنحاء العالم ، ولكن بمعدل نجاح يبلغ حوالي 50٪ ومع الطعوم القادمة من LD للغالبية1.
على الرغم من أنه ليس منقذا للحياة ، إلا أن UTx هو إجراء شائع بشكل متزايد لتلبية رغبات ذريتهم. على هذا النحو ، يتزايد الطلب على الطعوم ، مما يضع التبرع ب DD في التركيز المستقبلي. ومع ذلك ، فإن التبرع ب DD معقد بسبب التعرض لنقص تروية البرد لفترة أطول بكثير (وفي حالة الموت القلبي ، دافئ أيضا) ، مما يزيد من مخاطر اختلال الكسب غير المشروع والرفض 5,6. تظل التقنية الجراحية ، ومطابقة التوافق المطلوبة ، وكبت المناعة المرتبط بها من القضايا الحرجة فيما يتعلق بنتائج UTx7.
لإدارة المخاطر المذكورة أعلاه في العيادة ، هناك حاجة إلى نماذج حيوانية مناسبة لاستكشاف نقص التروية وكبت المناعة. تظل نقطة النهاية الأكثر صلة سريريا بالنماذج الحيوانية هي الولادة الناجحة. حتى الآن ، تم تحقيق حالات الحمل بعد UTx التجريبي في الفئران والجرذان والأغنام والأرانب cynomolgus8. في حين أن الحيوانات الكبيرة مقدرة مسبقا لاكتساب التقنيات الجراحية وتحسينها ، فإن القوارض تأتي مع ميزة واضحة تتمثل في فترات الحمل القصيرة. لذلك ، فإن نماذج القوارض متفوقة فيما يتعلق بالاعتبارات العملية والمالية والأخلاقية9. ومع ذلك ، فإن التحدي الرئيسي ل UTx في الفئران هو التشريح الصغير ، مع الجراحة الصعبة للغاية المرتبطة بانخفاض قابلية استنساخ الفئران UTx10. على النقيض من ذلك ، يمكن الوصول إلى الفئران جراحيا وتحتفظ بمزايا أوقات الحمل القصيرة. على هذا النحو ، أصبح الجرذ النموذج المفضل ل UTx9. قدم Wranning et al. نموذج الفئران من UTx orthotopic في عام 2008 ، وباستخدام هذا النموذج ، تم الإبلاغ عن أول ولادة حية بعد UTx والتزاوج الطبيعي11،12،13. كان للدراسات اللاحقة مساهمات حاسمة في تنفيذ UTx في البشر9.
ومع ذلك ، لا يزال UTx يمثل تحديا في الفئران ، ولم يتقن سوى عدد قليل من المجموعات حتى الآن هذه التقنية الجراحية. تتمثل إحدى العقبات ذات الصلة أمام انتشار UTx للفئران بين الباحثين في عدم وجود وصف دقيق لخطوات الجراحة المجهرية الفردية ، والمزالق ، والتدابير وفقا لاستكشاف الأخطاء وإصلاحها14. يهدف هذا البروتوكول إلى توفير دليل مفصل لهذا الإجراء الجراحي المجهري المعقد للغاية لتسهيل تنفيذ هذا النموذج الحيواني في الأبحاث المستقبلية.

<table><tbody><tr><td>مقص بزاوية إلى الجانب 5 مم</td><td>FST</td><td>15008-08</td><td></td></tr><tr><td>مشبك ورق كبير</td><td>لا يستخدم</td><td></td><td>محددا كضام</td></tr><tr><td>إبرة بانحناء حادة G30</td><td>Unimed SA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>بوبيفاكين 0.5٪</td> <td>سينتيتيكا</td><td></td><td></td></tr><tr><td>بوبرينورفين 0.3 مجم / مل</td><td>تيمجيسيك</td><td></td><td></td></tr><tr><td>دوسيرنادل G25</td><td>H.SIGRIST & الشريك AG</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF ملقط</td><td>FST</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 10/0</td><td>Ethicon</td><td>2810G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 6/0</td><td>Ethicon</td><td>667H</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 7/0</td><td>Ethicon</td><td>EH7446H</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 8/0</td><td>Ethicon</td><td>2808G</td><td></td></tr><tr><td>Femal Brown Norway Rats (150-170 g)</td><td>Janvier</td><td></td><td></td></tr><tr><td>فطائر لويس الفخذ (150-170 جم)</td>مقص <td>تشارلز ريفر دويتشلاند</td><td></td><td></td></tr><tr><td>فاين - شارب</td><td>FST</td><td>14060-09</td><td>أي مقص صغير آخر يعمل أيضا</td></tr> حامل <tr><td>إبرة هالسي مايكرو</td><td>FST</td><td>12500-12</td><td>أي حاجز صغير آخر يعمل أيضا</td></tr><tr><td>Heparin Natrium 25000 IE / 5 مل</td><td>B. Braun</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Institute Georges Lopez Perfusion Solution ( IGL)</td> <td>معهد جورج لوبيز</td><td></td><td>لحل الحفاظ على الأعضاء&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>ذكور لويس جرذان (300-320 جم)</td><td>تشارلز ريفر دويتشلاند</td><td></td><td></td></tr><tr><td>مايكرو سيريفين 13 مم</td><td>FST</td><td>18055-04&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Micro Serrefines 16 مم gebogen</td><td>FST</td><td>18055-06</td><td></td></tr><tr><td>قضيب مشبك Micro-Serrefine مع قفل &nbsp ؛ &nbsp;</td><td>ف.س.ت</td><td>18056-14&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>م & أومل; lnlyncke منشفة Op</td><td>M & ouml; lnlyncke</td><td>800300</td> ستارة <td>معقمة</td></tr><tr><td>كلوريد الصوديوم 0.9٪</td> <td>B.Braun</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Octenisept</td><td>Sch &uuml; lke</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ورقة الشريط</td><td>Tesa</td><td></td><td>لإصلاح</td></tr><tr><td>Philips Avent Schneller Flaschenw & auml; rmer SCF358 / 02</td><td>Philips</td><td>12824216</td><td></td></tr><tr><td>Ringerfundin</td><td>B.Braun</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rompun 2٪</td> <td>باير</td><td></td><td>زيلازين</td></tr><tr><td>حاملات إبرة ذات مقبض دائري</td><td>FST</td><td>12075-12</td><td></td></tr><tr><td>حاملات إبرة ذات مقبض دائري</td><td>FST</td><td>12075-12</td><td></td></tr><tr><td>S & ملقط توسيع الوعاء T - بزاوية 45 درجة ؛</td><td>FST</td><td>00276-13</td><td></td></tr><tr><td>Sacryl Naht</td><td>KRUUSE</td><td>152575</td><td></td></tr><tr><td>Scapel No 10</td><td>Swann Morton</td><td>201</td><td></td></tr><tr><td>حاوية هيستو</td><td></td><td></td> صغيرة <td>تعمل بشكل جيد للتخزين البارد للكسب غير</td></tr> المشروع <tr><td>أكياس</td><td></td><td></td> بلاستيكية صغيرة <td>أي أكياس بلاستيكية شفافة ناعمة</td></tr><tr><td>مسحة قطنية معقمة</td><td>Lohmann-Rauscher</td><td></td><td>أي قطعة قطن معقمة ناعمة</td></tr><tr><td>شاش معقم</td><td>Lohmann-Rauscher</td><td></td><td>أي شاش معقم جيد</td></tr><tr><td>مقص مستقيم 8 مم</td><td>FST</td><td>15024-10</td><td></td></tr><tr><td>مجهر جراحي & ndash ؛ SZX9</td><td>أوليمبوس</td><td>أولي-SZX9-B</td><td></td></tr><tr><td>مزرع غير لاصق GLISS 0.4 مم</td><td>Sutter</td><td>78 01 69 SLS</td><td></td></tr><tr><td>خياطة ربط ملقط &nbsp;</td><td>FST</td><td>00272-13</td><td></td></tr><tr><td>حصيرة الاحترار ThermoLux</td> ملقط الأنسجة <td>ThermoLux</td><td></td><td></td></tr><tr><td>للجلد</td><td></td><td></td><td>أي ملقط نسيجي ناعم</td></tr><tr><td>ملقط السفينة</td><td>FST</td><td>00125-11</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl&nbsp; بالإضافة إلى 4/0</td><td>Ethicon</td><td>VCP292H</td><td></td></tr></tbody></table>

النهج الجراحي والتحديات والقرارات لزراعة الرحم في الفئران

Surgical Approach, Challenges, and Resolutions for Uterus Transplantation in Rats

زرع الرحم (UTx) هو نهج جديد لعلاج النساء المصابات بالعقم الرحمي المطلق (AUFI). تشير التقديرات إلى أن 3٪ -5٪ من النساء يعانين من AUFI. حرمت هؤلاء النساء من خيار إنجاب الأطفال حتى ظهور UTx. كان التطبيق السريري ل UTx مدفوعا بالدراسات التجريبية على الحيوانات ، وتم تحقيق أول UTx ناجح في الفئران. نظرا لخصائصها الفسيولوجية والمناعية والجينية والإنجابية ، تعد الفئران نظاما نموذجيا مناسبا لعمليات الزرع هذه. على وجه الخصوص ، تعد فترة الحمل القصيرة ميزة واضحة ، حيث أن نقطة النهاية المعتادة ل UTx التجريبية هي الحمل الناجح مع الولادة الحية. يبقى التحدي الأكبر لنماذج الفئران هو التشريح الصغير ، الذي يتطلب مهارات وخبرات جراحية مجهرية متقدمة. على الرغم من أن UTx قد أدى إلى الحمل في العيادة ، إلا أن الإجراء لم يتم تأسيسه ويتطلب تحسينا تجريبيا مستمرا. هنا ، يتم تقديم بروتوكول مفصل ، بما في ذلك استكشاف الأخطاء وإصلاحها الأساسية ل rat UTx ، والتي من المتوقع أن تجعل الإجراء بأكمله أسهل في الفهم لأولئك الذين ليس لديهم خبرة في هذا النوع من الجراحة المجهرية.

يتم عرض نتائج من مجموعتين من الفئران. تم تنفيذ UTx قبل (المجموعة 1 ، n = 8) وبعد (المجموعة 2 ، n = 8) تعديل البروتوكول (الجدول 1) لتوضيح آثار تعديلاتنا (يرجى الاطلاع على المناقشة للحصول على شرح لتعديلاتنا)12،15،21.
ترتبط نتيجة الفئران UTx بثلاث مراحل رئيسية. المرحلة الأولى هي الانتعاش الناجح من UTx. عادة ، يجب على المستلمين التعافي خلال أول 2 أيام بعد الجراحة. تتعلق ا...

يصف هذا البروتوكول جميع الخطوات الأساسية لنجاح زرع الرحم (UTx) في الفئران. أثبت نموذج الفئران أنه مناسب لتعزيز التنفيذ السريري ل UTx. ومع ذلك ، فإن الفئران UTx هو إجراء معقد للغاية يتطلب تعليمات دقيقة.

Uterine transplantation (UTx) is a new approach for treating women with absolute uterine factor infertility (AUFI). An estimated 3%-5% of women suffer ...

ينتمي زرع الرحم الأيمن إلى واحدة من أكثر العمليات الجراحية المجهرية تعقيدا التي يتقنها عدد قليل فقط. ينقل بروتوكولنا زراعة الرحم اليمنى من مرحلة تجريبية إلى منهجية قابلة للتطبيق. يؤدي بروتوكولنا إلى ارتفاع معدل الولادات الحية بعد زراعة الرحم.سيعزز قريبا تطبيق زرع الرحم الصحيح للبحث الفعلي. الصبر والقدرة على التحمل هي السمات الرئيسية خلال الإجراء بأكمله. بعد إجراء بضع البطن المتوسط ، على فأر مخدر ، حصاد قرن الرحم الأيمن مع تجويف الرحم المشترك وعنق الرحم جنبا إلى جنب مع عنيق الأوعية الدموية.كي الجرح وربط قرن الرحم الأيسر بخياطة بولي غالاكتين 4-0. الآن قطع قرن الرحم الأيسر المجاور للمتفرعة من تجويف الرحم المشترك. افصل الجزء العنقي والمهبلي من الكسب غير المشروع المستقبلي عن مرفق المستقيم.افصل الكسب غير المشروع المستقبلي عن الأربطة المهبلية وعنق الرحم. باستخدام الإنفاذ الحراري ، تشريح المهبل حوالي 2 إلى 3 ملليمترات الذيلية من عنق الرحم. حدد موقع الشريان الرحمي والأوردة في أصولها.ربط جميع الأوعية الذيلية من الأوعية الرحمية مع 8-0 مكان البولي أميد. المركز 8-0 أربطة البولي أميد مباشرة حول الشريان الحرقفي المشترك الأيمن والوريد القريب من تشعبات الأبهر والأجوف. قم بعمل شق بطول 0.5 إلى ملليمتر واحد في الشريان الحرقفي المشترك الأيمن المجاور مباشرة للتشعب.أدخل إبرة قياس 25 مستقيمة حادة في التجويف لطردها. تأمين الإبرة مع رباط البولي أميد 6-0. لتمكين التدفق أثناء التنظيف ، قم بتشريح الوريد الحرقفي الذنبي المشترك إلى الرباط في الوريد الحرقفي المشترك الأيمن.باستخدام حقنة ثلاثة ملليلتر ، اغسل الرحم بمحلول رينغر البارد ، متبوعا بمحلول الحفاظ على الأعضاء مع كل من الهيبارين والزيلازين. قطع الشريان الحرقفي الشائع الذيلي للرباط عند تشعب الأبهر البطني. ثم باستخدام تشريح حاد ، وقطع الأوعية الحرقفية المشتركة من تشعب الوريد الأبهر الأجوف عند تقسيم الأوعية الرحمية.وإزالة عملية الزرع عندما يصبح نسيج الرحم شاحبا. ضع عملية الزرع في محلول الحفاظ على الأعضاء الباردة لتسهيل تحضير الطاولة الخلفية وتخزينها قبل الزرع. بعد وضع الكسب غير المشروع في تجويف البطن ووضع الوريد غير المشروع ، ضع خيطا واحدا من مادة البولي أميد 10-0 في زاوية الجمجمة وخيطا فضفاضا في الزاوية الذيلية للشق على الوريد الحرقفي المشترك الأيمن.مفاغرة جانب واحد من الوريد الكسب غير المشروع في الوريد المتلقي باستخدام ست إلى ثماني حلقات من خياطة مستمرة. وبالمثل ، مفاغرة الجانب الآخر من السفينة بدءا من الخارج. ثم باستخدام 10-0 بولي أميد ، اربط عقدة واحدة في خياطة البقاء في الجمجمة وعقدة أخرى عند خياطة البقاء الذيلية.إجراء مفاغرة الشرايين باستخدام 10-0 خيوط البولي أميد المتقطعة في الشريان الحرقفي المشترك الأيمن مع ثماني إلى 10 حلقات. لبدء نضح الكسب غير المشروع ، عندما تظهر المواقع براءة اختراع ، حرر المشابك الوعائية على أوعية الكسب غير المشروع وافحص الكسب غير المشروع بحثا عن علامات إعادة التروية. قم بتوصيل الكفة المهبلية لعملية الزرع بالقبو المهبلي باستخدام ستة إلى سبعة خيوط متقطعة من البولي غالاكتين 6-0.باستخدام خمسة إلى سبعة خيوط بولي أميد 7-0 متقطعة ، مفاغرة الرسم البياني قرن الرحم من طرف إلى نهاية إلى الجزء المتلقي المتبقي من الرحم القحفي. مراقبة عملية ما بعد الفئران. بعد زرع الرحم ، أظهر اثنان من الفئران من المجموعة 1 علامات الحمل.ومع ذلك ، كشف الفحص عن توسع الرحم ، مما يشير إلى أن الجراء تطورت بشكل طبيعي ، لكن الفئران فشلت في ولادة الجراء. أظهر الفحص النسيجي في الأجنة أن الجراء تطورت حتى الولادة. أظهرت خمسة فئران من المجموعة 2 الحمل مع ثلاثة أنجبت الجراء.أنجبت أنثى لويس مرتين. نجا جميع الجراء في القمامة الأولى بينما نجا اثنان فقط من الجراء الثلاثة من القمامة الثانية. كما أنجبت الأنثى النرويجية البنية مرتين وأظهرت جميع الجراء الباقين على قيد الحياة نموا طبيعيا.أدى تكييف البروتوكول إلى تحسين كل من النتائج الجراحية المباشرة ومعدل المواليد الأحياء بعد زرع الرحم. وزاد معدل بقاء الكسب غير المشروع لمدة أسبوعين من 50٪ في المجموعة 1 إلى 75٪ في المجموعة 2. من المهم الحفاظ على عقدة الخياطة في الزاوية الذيلية فضفاضة لتعديل أفضل ولمنع تأثيرات السلسلة المتابعة.زراعة الرحم اليمنى مناسبة بشكل خاص لتقييم مناهج ما قبل الزرع التي قد تحسن نتائج زراعة الرحم مثل نضح الأعضاء تحت الجلد خارج الجسم الحي أو تقنيات أخرى للتخفيف من إصابة الأعضاء. بشكل عام ، كان زرع الرحم في الحيوانات ولا بد من إدخاله لإنشاء زرع الرحم في العيادة.

surgical-approach-challenges-resolutions-for-uterus-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

نقدم تنقيحا سهلة لوضع هذه التقنية اثنين الكفة الكلاسيكية لزرع الكبد orthotopic في الفئران.

زراعة كبد في الفئران

زراعة كبد في الفئران هو نموذج تجريبي لا غنى عنه للبحوث الطبية الحيوية. هنا نقدم إجراءاتنا الجراحية لزرع الكبد الفئران مثلي مع إعادة الإعمار كبدي الشرايين باستخدام الكسب غير المشروع 50٪ جزئية.

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

وتظل إعادة إعمار الأجوف فينا سوبراهيباتيك (شفك) خطوة صعبة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسية.

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

الغرض من هذه المخطوطة والبروتوكول هو شرح وتوضيح بالتفصيل الاجراء الجراحي لزرع الكلي التقويمي في الفئران. يتم تبسيط هذه الطريقة لتحقيق التروية الصحيحة من الكلي المتبرع وتقصير الوقت ضخ باستخدام تقنيه انسموسيس الوريدي والكفة حالب.

زرع الكلي الفئران العظام: نهج الجراحية الجديدة والمبسطة

يصف هذا البروتوكول طريقة بسيطة وفعالة لزرع وريقات الصمام الأبهري تحت الكبسولة الكلوية للسماح بدراسة الحساسية لصمامات القلب.

نموذج مبسط لزرع صمام القلب غير المتجانس في القوارض

يساهم نموذج زرع الكلى التقويمي للفئران في التحقيق في آلية رفض اللوغراف الكلوي. يزيد النموذج الحالي من بقاء المتلقين على قيد الحياة دون التدخل في إمدادات الدم والارتجاع الوريدي في الجزء السفلي من الجسم باستخدام مفاغرة شاملة لزرع الكلى وطريقة "نفق" من طرف إلى جانب لمفاغرة الحالب والمثانة.

نموذج زرع الكلى التقويمي للفئران لرفض اللوغراف الكلوي

يؤثر هبوط أعضاء الحوض على ملايين النساء في جميع أنحاء العالم ، ومع ذلك فإن بعض التدخلات الجراحية الشائعة لها معدلات فشل تصل إلى 40٪. عدم وجود نماذج حيوانية قياسية للتحقيق في هذه الحالة يعيق التقدم. نقترح البروتوكول التالي كنموذج لتعليق الرباط الرحمي العجزي واختبار الشد في الجسم الحي .

تطوير نموذج فأر معلق الرباط الرحمي العجزي

يقدم هذا العمل نموذجا حيوانيا للتليف الناجم عن الانتقال البطاني إلى اللحمة المتوسطة ، كما يظهر في عيوب القلب الخلقية مثل تضيق الأبهر الحرج أو متلازمة القلب الأيسر الناقص التنسج ، مما يسمح بإجراء تقييم مفصل للأنسجة النسيجية ، وتحديد مسارات الإشارات التنظيمية ، واختبار خيارات العلاج.

نموذج زراعة قلب الفئران غير المتجانسة لحديثي الولادة لدراسة الانتقال البطاني إلى اللحمة المتوسطة

هنا ، نقدم بروتوكولا لعزل واستزراع الخلايا الجذعية الظهارية لبطانة الرحم للفئران (reESCs) ، مما يؤدي إلى توليد عضيات بطانة الرحم للفئران. تسهل هذه الطريقة الدراسات المختبرية لأمراض بطانة الرحم ، مما يتيح تحرير الجينات والتلاعب الخلوي الآخر.

توليد وتوصيف عضيات الرحم في الفئران من الخلايا الجذعية الظهارية لبطانة الرحم للفئران

يصف هذا البروتوكول تقنية محسنة لزراعة الرئة اليسرى في الفئران ، مع التركيز على تقليل الصعوبة التشغيلية وتحسين معدلات البقاء على قيد الحياة.

زرع الرئة اليسرى تقويم العظام في الفئران

تعلم تقنية زراعة الرحم الأيمن في الفئران باستخدام الجراحة المجهرية المعقدة. يوفر هذا البروتوكول خطوات مفصلة لتحقيق معدلات عالية من الولادات الحية بعد الزراعة.

النهج الجراحي والتحديات والقرارات لزراعة الرحم في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات