تطوير نموذج استنشاق قبل السريري لاختبار نواتج تقطير القنب المتبخرة

نستكشف كيف تؤثر منتجات vape القنب المستنشقة على فسيولوجيا الرئة ، من خلال الجمع بين تقنيات البيولوجيا الجزيئية التقليدية والتقنيات الحسابية الناشئة لاكتساب رؤى حول كيفية تغيير vaping لوظائف الرئة. لقد أظهرنا أن بخار القنب يثير تغيرات نسخية في الخلايا الظهارية للرئة ، على غرار دخان القنب ، مما يشير إلى حدوث تلف. أيضا ، تظهر رؤى ميكانيكية حول إصابات الرئة المرتبطة بال vaping ، لا سيما مع منتجات THC التي تحتوي على أسيتات فيتامين E. تعتمد معظم الدراسات على المنتجات المحتوية على THC على طرق عدم الاستنشاق ، مثل التزقيم عن طريق الفم والحقن ، والتي تقدم رؤى قيمة ، ولكنها تختلف عن الاستخدام البشري النموذجي. هدفنا هو نمذجة التعرض للقنب بطريقة أكثر صلة من الناحية الفسيولوجية ، مع الاستنشاق. توفر فاعلية منتجات القنب الجديدة تحديات في الجرعات. نريد تقليد أنماط الاستخدام البشري ، وتحقيق جرعات ذات صلة من الناحية الفسيولوجية دون آثار ضارة في الفئران. نضع جرعة تعرض موحدة توفر جرعات ذات صلة من الناحية الفسيولوجية من THC للفئران دون آثار سلوكية ضارة.

[مدرب] للبدء ، قم بتجميع جميع مكونات النظام. أدخل أنبوبا مغلقا في الغرفة العازلة لمضخة النفخ لمنع التسرب. قم بتشغيل النظام وتشغيل البرنامج. حدد وحدة جلسات التجريب. حدد دراسة جديدة لبدء جلسة تجريبية جديدة. تحديد المجموعات التجريبية والموضوعات المراد دراستها. ثم اختر القالب التجريبي الذي يطابق نظام التعريض الضوئي المطلوب. في نافذة خصائص جلسة العمل، أكمل قسم المشغل لتوثيق استخدام المعدات. للمعايرة، حدد القناة المطلوبة في البرنامج. اتبع الخطوات الموضحة في برنامج التشغيل. بعد ذلك ، حدد المضخة المطلوبة في البرنامج. قم بإجراء اختبار تدفق النظام باتباع إرشادات برنامج التشغيل. تأكد من توجيه التدفق نحو مقياس الدوران. قم بإلغاء أي مطالبات لبدء تسجيل البيانات إذا لم تكن التجربة جاهزة للبدء. لتحضير ، تأقلم الذكور والإناث C57 BL6 تدريجيا على مدى ثلاثة أيام مع نظام التعرض. لبدء التأقلم ، ضع كل فأر في ضبط ناعم. ابدأ تدفق هواء متحيز لترين في الدقيقة بهواء الغرفة لمدة تعادل تعرضها التجريبي لمدة 10 أو 20 أو 30 دقيقة. سحب المكون الشبكي للتقييد بالكامل. ثم أمسك التقييد بالكامل أمام الماوس ، واسمح للماوس بالدخول إلى مكون المكبس من تلقاء نفسه. تحقق من أن أنف الماوس مرئي في قسم المكبس. قم بتأمين مشبك الموثق خلف الماوس مباشرة لمنع الحركة للخلف. عند التعامل مع الفئران من مختلف الجنسين أو الأنماط الجينية ، استخدم مقاطع الموثق المرمزة بالألوان للتعرف عليها وتمييزها. ضع ستة فئران مقيدة في برج التعرض للأنف فقط في النظام. ابدأ تدفق التحيز بمعدل لترين في الدقيقة مع هواء الغرفة لضمان تدفق هواء كاف عبر الغرفة. في عامل إرساء المهمة ، انقر بزر الماوس الأيمن على ملف تعريف السجائر الإلكترونية الذي تم إنشاؤه وحدد خصائص المهمة. تحت تردد النفخة ، أدخل الفاصل الزمني المطلوب للنفخة ، مثل 30 ثانية لنظام نفثتين في الدقيقة. انقر فوق موافق عندما يطلب منك تأكيد التغييرات. اتبع التعليمات في نهاية الجلسة لحفظ نظام النفخة كنموذج للاستخدام في المستقبل. عندما تكون جاهزا لبدء التعريض الضوئي ، انقر نقرا مزدوجا فوق ملف تعريف السيجارة الإلكترونية المعدل لبدء تشغيله. ابدأ مؤقتا في وقت واحد لتتبع مدة التعريض الضوئي. اختبر كثافة متفاوتة عن طريق الحفاظ على التعرض لمدة 10 دقائق وزيادة وتيرة النفخة إلى نفث واحد واثنان وأربع نفخات في الدقيقة. بعد انتهاء التعريض الضوئي ، أعد تشغيل تدفق التحيز بهواء الغرفة. لتحرير من القيود ، قم بإزالة مشبك الموثق أولا. اسحب الشبكة بالكامل باتجاه المكبس ، واسمح للحيوان بالخروج من ضبط النفس من تلقاء نفسه. إذا لزم الأمر ، اسحب الذيل برفق لتشجيع الحركة للخلف. زادت تركيزات THC-COOH في المصل بشكل ملحوظ بطريقة تعتمد على الوقت مع 10 و 20 و 30 دقيقة من التعرض لبخار THC بجرعة واحدة في الدقيقة. أدت زيادة وتيرة النفخة أثناء التعرض لمدة 10 دقائق إلى ارتفاع يعتمد على الجرعة في مستويات THC-COOH في الدم لنفث واحد واثنان وأربع نفث في الدقيقة. أظهرت الفئران التي تعرضت لبخار THC لمدة 10 دقائق بمعدل نفثتين في الدقيقة وأربع نفخات في الدقيقة حركة كبيرة ، مع تقليل المسافة المقطوعة إلى 0.29 و 0.05 متر على التوالي.