DNA-barcode-based Multiplex Immunofluorescence Imaging to Analyze FFPE Specimens from Genetically Reprogrammed Murine Melanoma

Sachin  S. Surwase; Xin Ming M. Zhou; Kathryn M. Luly; Qingfeng Zhu; Niki Talebian; Robert A. Anders; Jordan J. Green; Stephany Y. Tzeng; Joel C. Sunshine

doi:10.3791/68124

التصوير المناعي متعدد الإرسال القائم على الباركود الشريطي للحمض النووي لتحليل عينات FFPE من الورم...

JoVE Journal
Cancer Research

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Cancer Research

DNA-barcode-based Multiplex Immunofluorescence Imaging to Analyze FFPE Specimens from Genetically Reprogrammed Murine Melanoma

التصوير المناعي متعدد الإرسال القائم على الباركود الشريطي للحمض النووي لتحليل عينات FFPE من الورم الميلانيني الفئراني المعاد برمجته وراثيا

Full Text

1,133 Views

09:58 min

June 6, 2025

DOI: 10.3791/68124-v

Sachin S. Surwase*^1,2,3, Xin Ming M. Zhou*^3,4, Kathryn M. Luly^1,2,3, Qingfeng Zhu^5,6,7, Niki Talebian⁶, Robert A. Anders^5,6,7,8,9, Jordan J. Green^{1,2,3,5,8,9,10,11,12}, Stephany Y. Tzeng^1,2,3, Joel C. Sunshine^{1,3,4,5,6,8,9}

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

يوفر هذا البروتوكول دليلا تفصيليا لتصميم لوحة الأجسام المضادة للتألق المناعي متعددة الإرسال للتصوير المستند إلى الباركود الحمض النووي لأنسجة الورم الميلانيني FFPE في الفئران. نصف أيضا خط أنابيب تحليل الصور باستخدام أدوات مفتوحة المصدر لتوليد رؤى البروتينات المكانية في البيئة المكروية المناعية لورم الورم الميلانيني الفئراني.

نقدم بروتوكولا لتطوير والتحقق من صحة لوحة التألق المناعي متعدد الإرسال لدراسة أنسجة FFPE للفئران وإثبات فائدتها من خلال دراسة عينات من نموذج الورم الميلانيني المعالج بجسيمات نانوية التي تقدم الحمض النووي للبلازما ، وترميز الإشارات المناعية لإعادة برمجة البيئة المكروية للورم. كان الحقل يفتقد إلى بروتوكولات التألق المناعي متعدد الإرسال المطورة والتحقق من صحتها بدقة والمتوافقة مع أنسجة FFPE المضمنة بالبارافين المثبتة بالفورمالين في الفأر.

يحافظ تضمين البارافين الثابت بالفورمالين على مورفولوجيا الأنسجة على المدى الطويل ، ويسهل التعامل معه وتخزينه ، ويتيح إنشاء مصفوفات دقيقة للأنسجة لعرض عينات متعددة على شريحة واحدة.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos