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Bio-Rad Laboratories, Inc.

Bio-Rad Laboratories

&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x5904;&#x63CF;&#x8FF0;&#x65B0;&#x7A33;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x7D20;&#x8D28;&#x8C31;&#x5149;&#x8C31;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6280;&#x672F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA (mtDNA) &#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x589E;&#x957F; (2-4 mo &#x65E7;) &#x548C;&#x91CD;&#x91CF;&#x7A33;&#x5B9A; (8-10 mo &#x65E7;) &#x81EA;&#x53D1;&#x5927;&#x9F20;&#x662F;&#x5F15;&#x7269;&#x4E0E; (2) H (2) O (&#x6C18;&#x6C34;) 2.0-2.5%&#x8EAB;&#x4F53;&#x6C34;&#x6D53;&#x7F29;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8179;&#x8154;&#x6CE8;&#x5C04;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x9274;&#x4E8E; 4%(2) H (2) &#x6FB3;&#x996E;&#x7528;&#x6C34;&#x4E2D; 3 11 &#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x4ECE;&#x5FC3;&#x810F;&#x548C;&#x540E;&#x80A2;&#x808C;&#x8089;&#x548C; mtDNA &#x662F;&#x5B64;&#x7ACB;&#x548C;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x4E3A; deoxyribonucleosides&#x3002;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x6CA1;&#x6709;&#x6838; DNA &#x6C61;&#x67D3;&#x3002;&#x540C;&#x4F4D;&#x7D20;&#x5BCC;&#x96C6;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x817A;&#x82F7;&#x5C5E;&#x8C01;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x7ED3;&#x6784;&#x7531;&#x6C14;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;-&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x65B0; mtDNA &#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5230;&#x63A5;&#x8FD1;&#x5B8C;&#x6210;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D; &#xFF08;&#x9AA8;&#x9AD3;&#xFF09; &#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA &#x6D53;&#x7F29;&#x3002;&#x521D;&#x59CB;&#x6807;&#x7B7E;&#x5C06;&#x7EB3;&#x5165;&#x8131;&#x6C27;&#x817A;&#x82F7;&#x7684; mtDNA &#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684;&#x800C;&#x4E14;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x7684; mtDNA &#x89C2;&#x5BDF;&#x53E6;&#x5916;&#x96CC;&#x9F20; (1.1-1.3%&#x65B0; mtDNA &#x6BCF;&#x5929;&#x5728;&#x5FC3;&#x810F;&#x548C;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x4E2D;&#xFF09;&#x3002;&#x6A21;&#x8D70;&#x66F2;&#x7EBF;&#x7684; mtDNA &#x540E;&#x4E2D;&#x6B62; (2) (2) H O &#x7BA1;&#x7406;&#x7ED9;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x66F4;&#x66FF;&#x7387;&#x5E38;&#x6570;&#x3002;&#x4EBA;&#x4F53;&#x4E5F;&#x7ED9;&#x4E88; (2) (2) O H &#x4E3A;&#x8FBE; 6 wk&#xFF0C;&#x548C;&#x4ECE;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x4E0E;&#x5B75;&#x5316;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6C61;&#x67D3;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA &#xFF1B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; mtDNA &#x5C55;&#x51FA; (2) O (2) H &#x4ECE;&#x7EBF;&#x6027;&#x7EB3;&#x5165;&#x5E76;&#x8FBE;&#x5230;&#x9AD8;&#x539F;&#x503C;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA &#x63D0;&#x53D6;&#x5B8C;&#x5168;&#x7FFB;&#x8F6C; &#xFF08;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09; &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x590D;&#x5236;&#x53EF;&#x4EE5;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x556E;&#x9F7F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x65E0;&#x9700;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x7269;&#x8D28;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x80FD;&#x5141;&#x8BB8;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x5728;&#x5065;&#x5EB7;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5B66;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA &#x5408;&#x6210;&#x4F53;&#x5185;&#x4F7F;&#x7528;&#x7A33;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x7D20;&#x8D28;&#x8C31;&#x5149;&#x8C31;&#x6280;&#x672F;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

We describe here a new stable isotope-mass spectrometric technique for measuring mitochondrial DNA (mtDNA) synthesis. Growing (2-4 mo old) and weight-stable (8-10 mo old) Sprague-Dawley rats were primed with (2)H(2)O (deuterated water) to 2.0-2.5% body water enrichment, via intraperitoneal injection, and then given 4% (2)H(2)O in drinking water for 3-11 wk. Mitochondria were isolated from cardiac and hindlimb muscle, and mtDNA was isolated and enzymatically hydrolyzed to deoxyribonucleosides. PCR confirmed the absence of nuclear DNA contamination. The isotopic enrichment of the deoxyribose moiety of deoxyadenosine was determined by GC-MS analysis, and percent new mtDNA was calculated by comparison to genomic DNA enrichments in a tissue with nearly complete turnover (bone marrow). Initial label incorporation into deoxyadenosine of mtDNA was linear, and turnover of mtDNA was observed in nongrowing adult female rats (1.1-1.3% new mtDNA per day in cardiac and skeletal muscle). Die-away curves of mtDNA after discontinuing (2)H(2)O administration gave a similar turnover rate constant. Human subjects were also given (2)H(2)O for up to 6 wk, and mitochondria from platelets were isolated. Incubation with DNase removed any contaminating genomic DNA; platelet mtDNA exhibited linear incorporation from (2)H(2)O and reached plateau values identical to those in genomic DNA from fully turned over cells (circulating monocytes). In conclusion, replication of mtDNA can be directly measured in vivo in rodents and humans without the use of radioactivity. Use of this technique may allow improved understanding of the regulation of mitochondrial biogenesis in health and disease.

Measurement of mitochondrial DNA synthesis in vivo using a stable isotope-mass spectrometric technique.

Nous d&eacute;crivons ici une nouvelle technique par spectrom&eacute;trie de masse isotopique stable pour mesurer la synth&egrave;se de l&#39;ADN (ADN mitochondrial) mitochondriale. Croissance (vieux de 2-4 mo) et poids stable (8-10 mo vieux) Sprague-Dawley rats ont appr&ecirc;t&eacute; avec (2) H (2) O (l&#39;eau deut&eacute;r&eacute;e) 2.0-2.5 % corps eau enrichissement, par injection intrap&eacute;riton&eacute;ale et ensuite &agrave; raison de 4 % (2) H (2) O dans l&#39;eau potable pour les 3-11 SEM mitochondries ont &eacute;t&eacute; isol&eacute;es du muscle cardiaque et des membres post&eacute;rieurs, et l&#39;ADN mitochondrial a &eacute;t&eacute; isol&eacute; et enzymatiquement hydrolys&eacute; d&eacute;soxyribonucl&eacute;osides. PCR a confirm&eacute; l&#39;absence de contamination de l&#39;ADN nucl&eacute;aire. L&#39;enrichissement isotopique de la portion de d&eacute;soxyribose de d&eacute;soxyad&eacute;nosine a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e par analyse par CPG-SM et ADNmt nouveau pourcentage a &eacute;t&eacute; calcul&eacute; en comparant &agrave; des enrichissements de l&#39;ADN g&eacute;nomiques dans un tissu avec un chiffre d&#39;affaires quasi compl&egrave;te (moelle osseuse). Incorporation de la premi&egrave;re &eacute;tiquette dans d&eacute;soxyad&eacute;nosine d&#39;ADNmt &eacute;tait lin&eacute;aire et chiffre d&#39;affaires de l&#39;ADNmt a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e chez des rats femelles adultes (1.1-1.3 % nouveau ADNmt par jour dans le muscle cardiaque et squelettique). Die-away courbes d&#39;ADNmt apr&egrave;s l&#39;arr&ecirc;t (2) administration O H (2) donne une constante de vitesse de rotation semblable. Des sujets humains ont &eacute;galement &eacute;t&eacute; offerte (2) H (2) O pendant jusqu&#39;&agrave; 6 sem et les mitochondries des plaquettes ont &eacute;t&eacute; isol&eacute;s. L&#39;incubation avec la DNase supprim&eacute; toute contamination de l&#39;ADN g&eacute;nomique ; l&#39;ADNmt plaquettes expos&eacute; incorporation lin&eacute;aire de (2) H (2) O et atteint des valeurs identiques &agrave; celles en g&eacute;nomique de plateau l&#39;ADN d&#39;enti&egrave;rement remises cellules (monocytes circulants). En conclusion, la r&eacute;plication de l&#39;ADN mitochondrial peut &ecirc;tre directement mesur&eacute;e in vivo chez les rongeurs et les humains sans l&#39;utilisation de la radioactivit&eacute;. Utilisation de cette technique pourrait permettre une meilleure compr&eacute;hension de la r&eacute;gulation de la biogen&egrave;se mitochondriale in health and disease.

Mesure de la synth&egrave;se de l&#39;ADN mitochondriale in vivo &agrave; l&#39;aide d&#39;une technique de spectrom&eacute;trie de masse isotopique stable.

Die Messung der mitochondrialen DNA-Synthese in vivo mit Hilfe eines stabilen Isotopen-Massenspektrometrie-Technik.

Descriviamo qui una nuova stabile tecnica spettrometrica di isotopo di massa per la misurazione della sintesi del DNA (mtDNA) mitocondriale. Crescita (2-4 mo vecchio) e peso stabile (8-10 mo vecchio) Sprague-Dawley ratti sono stati vaccinati con (2) (2) O (deuterato acqua) di H 2.0-2.5% corpo acqua arricchimento, mediante iniezione intraperitoneale e poi dato il 4% (2) H (2) O nell&#39;acqua potabile per settimana 3-11 i mitocondri sono stati isolati dal muscolo cardiaco e arto posteriore, e mtDNA &egrave; stato isolato e idrolizzato enzimaticamente a deoxyribonucleosides. PCR ha confermato l&#39;assenza di contaminazione del DNA nucleare. L&#39;arricchimento isotopico del gruppo desossiribosio di deossiadenosina &egrave; stata determinata mediante analisi GC-MS e mtDNA nuova percentuale &egrave; stata calcolata in confronto a arricchimenti di DNA genomici in un tessuto con fatturato quasi completo (midollo osseo). Etichetta iniziale incorporazione deossiadenosina del mtDNA &egrave; stato lineare e fatturato del mtDNA &egrave; stata osservata nei ratti femmina adulti nongrowing (1.1-1.3% nuovo mtDNA al giorno nel muscolo cardiaco e scheletrico). Die-away curve del mtDNA dopo sospensione amministrazione H (2) O (2) ha dato un simile costante di velocit&agrave; di fatturato. Soggetti umani erano anche dato (2) H (2) O per fino a 6 sett, e i mitocondri da piastrine sono stati isolati. Incubazione con dnasi rimosso qualsiasi DNA genomico contaminante; piastrinica mtDNA esposto incorporazione lineare da (2) H (2) O e raggiunto valori altopiano identici a quelli in genomic DNA da completamente capovolta cellule (monociti circolanti). In conclusione, la replica del DNA mitocondriale pu&ograve; essere direttamente misurata in vivo in roditori e gli esseri umani senza l&#39;uso di radioattivit&agrave;. Uso di questa tecnica pu&ograve; consentire una migliore comprensione della regolazione della biogenesi mitocondriale nella salute e nella malattia.

Misurazione della sintesi del DNA mitocondriale in vivo, utilizzando una tecnica di spettrometria di massa dell&#39;isotopo stabile.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA (mtDNA) &#x5408;&#x6210;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5B89;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;(2-4 Mo &#x53E4;&#x3044;) &#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x91CD;&#x91CF;-&#x5B89;&#x5B9A; (8-10 mo &#x53E4;&#x3044;) Sd &#x7CFB;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3044;&#x305F; 3-11 wk. &#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5F8C;&#x80A2;&#x306E;&#x7B4B;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;mtDNA &#x904A;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;, deoxyribonucleosides &#x306B;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3; (2) H (2) O (&#x91CD;&#x6C34;) 2.0 2.5 &#xFF05; &#x4F53;&#x6C34;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3057;&#x3001;&#x8179;&#x8154;&#x5185;&#x6CE8;&#x5165;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x3057;&#x4E0E;&#x3048; 4 &#xFF05; (2) H (2) O &#x6C34;&#x3092;&#x98F2;&#x3080;&#x3092;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;PCR &#x306F; DNA &#x306E;&#x6838;&#x6C5A;&#x67D3;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; &#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30DC;&#x30FC;&#x30B9;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53;&#x6FC3;&#x7E2E; GC-MS &#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; mtDNA &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; DNA &#x5F15;&#x6E21;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x307B;&#x307C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x56DE;&#x8EE2; &#xFF08;&#x9AA8;&#x9AC4;&#xFF09; &#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x521D;&#x671F;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F; mtDNA &#x306E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x3001;mtDNA &#x306E;&#x58F2;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x9AD8;&#x306F; nongrowing &#x6210;&#x719F;&#x96CC;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; (1.1 1.3% &#x65B0;&#x3057;&#x3044; mtDNA &#x5FC3;&#x7B4B;&#x53CA;&#x3073;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; 1 &#x65E5;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#xFF09; &#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x66F2;&#x7DDA; (2) H (2) O &#x6295;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x6B62;&#x5F8C; mtDNA &#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x901F;&#x5EA6;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x88AB;&#x9A13;&#x8005;&#x306F;&#x307E;&#x305F; (2) H (2) O &#x6700;&#x5927; 6 wk &#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DNase &#x3068;&#x306E;&#x5B75;&#x5316;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x6C5A;&#x67D3;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; DNA &#x3092;&#x524A;&#x9664;;&#x7DDA;&#x5F62;&#x5B9A;&#x6B3E; (2) O (2) H &#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; mtDNA &#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3001;&#x9AD8;&#x539F;&#x306E;&#x5024;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x3067;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x306E; DNA &#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE; (&#x5358;&#x7403;&#x5FAA;&#x74B0;&#xFF09; &#x4E0A;&#x306B;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;mtDNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x76F4;&#x63A5;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306B;&#x653E;&#x5C04;&#x80FD;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306A;&#x3057;&#x3067; in vivo &#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x3068;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7406;&#x89E3;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA &#x5408;&#x6210;&#x5B89;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3002;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA (mtDNA) &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC548;&#xC815; &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; &#xC9C8;&#xB7C9; spectrometric &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. (2-4 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xC774;&#xC804;) &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xCCB4;&#xC911; &#xC548;&#xC815; (8-10 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xC624;&#xB798; &#xB41C;) Sprague-Dawley &#xC950; &#xD588;&#xB2E4; 3-11 wk. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; hindlimb &#xC2EC;&#xC7A5; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB410;&#xB2E4; &#xBC0F; Mtdna&#xB294; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418; &#xACE0; enzymatically deoxyribonucleosides&#xC744; &#xBD84;&#xD574; (2) H (2) O (deuterated &#xBB3C;) 2.0-2.5% &#xC2E0;&#xCCB4; &#xBB3C; &#xB18D;&#xCD95;, intraperitoneal &#xC8FC;&#xC785;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; 4% (2) H (2) O &#xC2DD; &#xC218;&#xC5D0; &#xB05D;&#xB0AC;&#xB2E4;. PCR &#xD575; DNA &#xC624;&#xC5FC;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. Isotopic deoxyadenosine&#xC758; deoxyribose moiety &#xB18D;&#xCD95; GC-MS &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xBC31;&#xBD84;&#xC728; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; Mtdna&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xD68C;&#xC804;&#xC728; (&#xACE8; &#xC218;) &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; genomic DNA enrichments&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xAE30; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xC774; deoxyadenosine&#xC5D0; Mtdna&#xC758; &#xC120;&#xD615;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Mtdna&#xC758; &#xB9E4;&#xCD9C;&#xC561; nongrowing &#xC131;&#xC778; &#xC5EC;&#xC131; &#xC950; (1.1-1.3% &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; mtDNA &#xC2EC;&#xC7A5;&#xACFC; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC77C; &#xB2F9;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. (2) (2) H O &#xAD00;&#xB9AC; &#xC911;&#xB2E8; &#xD6C4; Mtdna&#xC758; &#xB2E4; &#xB5A8;&#xC5B4;&#xC838; &#xACE1;&#xC120; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD68C;&#xC804;&#xC728; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218;&#xB97C; &#xC900;. &#xC778;&#xCCB4;&#xB3C4; (2) (2) O H 6 &#xC8FC; &#xCD5C;&#xB300;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. DNase &#xAC00;&#xC9C4; &#xC678;&#xD53C; &#xC81C;&#xAC70; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC624;&#xC5FC; genomic DNA; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; mtDNA &#xC804;&#xC2DC; (2) O (2) H&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD615; &#xBC95;&#xC778; &#xBC0F; &#xC644;&#xC804; &#xC140; (monocytes &#xC21C;&#xD658;)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC124;&#xC815; &#xB418;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC77C; &#xB300; &#xC9C0; &#xAC12;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, mtDNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xC218; &#xC9C1;&#xC811; &#xCE21;&#xC815; &#xC124;&#xCE58;&#xB958;&#xC640; &#xBC29;&#xC0AC;&#xB2A5;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;. &#xC774; &#xAE30;&#xC220; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC18D;&#xC5D0; &#xAC74;&#xAC15;&#xACFC; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA &#xD569;&#xC131; in vivo &#xC548;&#xC815; &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; &#xC9C8;&#xB7C9; spectrometric &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aqu&iacute; describimos una nueva t&eacute;cnica espectrom&eacute;trica estable is&oacute;topo masa para medir la s&iacute;ntesis mitocondrial de la DNA (mtDNA). Crecimiento (2-4 mo viejo) y peso estable (8-10 mo viejo) Sprague-Dawley ratas fueron preparadas con (2) H (2) O (agua deuterado) 2.0-2.5% cuerpo agua enriquecimiento, v&iacute;a la inyecci&oacute;n intraperitoneal y luego dado 4% (2) H (2) O en el agua potable para wk. 3-11 las mitocondrias fueron aisladas del m&uacute;sculo cardiaco y trasera, y mtDNA fue aislado y enzim&aacute;ticamente hidrolizado a deoxyribonucleosides. PCR confirm&oacute; la ausencia de contaminaci&oacute;n de ADN nuclear. El enriquecimiento isot&oacute;pico de la mol&eacute;cula de desoxirribosa de Desoxiadenosina se determin&oacute; mediante an&aacute;lisis por GC-MS, y mtDNA nuevo porcentaje se calcul&oacute; en comparaci&oacute;n a enriquecimientos de ADN gen&oacute;micos en un tejido con una facturaci&oacute;n de casi completa (m&eacute;dula &oacute;sea). Incorporaci&oacute;n de la etiqueta inicial al Desoxiadenosina de mtDNA fue lineal, y facturaci&oacute;n de mtDNA se observ&oacute; en ratas hembra adultas nongrowing (1.1-1.3% nuevo mtDNA por d&iacute;a en el m&uacute;sculo card&iacute;aco y esquel&eacute;tico). Curvas Die-lejos del ADNmt despu&eacute;s de suspender la administraci&oacute;n de H (2) O (2) dieron una constante de velocidad de rotaci&oacute;n similar. Seres humanos tambi&eacute;n recibieron (2) H (2) O por hasta 6 semanas, y las mitocondrias de las plaquetas se aislaron. Incubaci&oacute;n con DNasa retirar cualquier contaminante ADN gen&oacute;mico; plaqueta mtDNA exhibe lineal incorporaci&oacute;n de (2) H (2) O y alcanz&oacute; meseta valores id&eacute;nticos a los de genomic DNA de vuelta completamente c&eacute;lulas (monocitos circulantes). En conclusi&oacute;n, replicaci&oacute;n del mtDNA puede ser directamente medida in vivo en roedores y seres humanos sin el uso de la radiactividad. Uso de esta t&eacute;cnica puede permitir mejorar la comprensi&oacute;n de la regulaci&oacute;n de la biog&eacute;nesis mitocondrial en salud y enfermedad.

Medici&oacute;n de la s&iacute;ntesis de ADN mitocondrial en vivo usando una t&eacute;cnica de espectrometr&iacute;a de masa isot&oacute;pica estable.

&#x6838;&#x82F7;&#x7C7B;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (NRTIs) &#x6709;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; &gamma;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x60A3;&#x8005;&#x611F;&#x67D3;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684; 1&#x3002;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x5408;&#x6210;&#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x7528;&#x5728;&#x556E;&#x9F7F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269; NRTI &#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x7D20;&#x8D28;&#x8C31;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x7684;&#x3002;3&#39;-&#x53E0;-3&#39;-deoxythymidine (AZT) &#x6DFB;&#x52A0;&#x7684;&#x6C34; &#xFF08;1 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#xFF09; &#x6216; 1-8 &#x5468;&#x7684;&#x5973;&#x6027;&#x5927;&#x9F20;&#x7684;&#x91C7;&#x98DF;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7BA1;&#x7406; (n = 4 &#x6216; 5 &#x7684;&#x52A8;&#x7269;/&#x7C97;&#xFF09;&#x3002;&#x65E2;&#x4E0D;&#x8EAB;&#x4F53;&#x91CD;&#x91CF;&#x4E5F;&#x6CA1;&#x6709;&#x98DF;&#x7269;&#x6444;&#x5165;&#x91CF;&#x88AB;&#x53D7; AZT &#x6444;&#x5165;&#x91CF;&#x3002;&#x672A;&#x7ECF;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x548C; AZT &#x6CBB;&#x7597;&#x5927;&#x9F20;&#x90FD;&#x6709; 4 %h2o &#x4F5C;&#x4E3A;&#x996E;&#x7528;&#x6C34;&#x4E3A; 2 &#x5468;&#x3002;AZT (&#x5927;&#x7EA6; 100 &#x6BEB;&#x514B;/&#x516C;&#x65A4; /d) &#x4EA7;&#x751F;&#x91CD;&#x5927; (P &lt; 0.05) &#x5FC3;&#x810F;&#x548C;&#x540E;&#x80A2;&#x808C;&#x8089; mtDNA &#x5206;&#x6570;&#x5408;&#x6210;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E0B;&#x964D; &#xFF08;&#x4ECE; 13.8 + /-4.2%&#x5230; 7.0 + /-4.8%&#x548C; 7.6 + /-1.8%&#x81F3; 4.5 + /-0.4%&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5206;&#x522B;) 4 &#x5468;&#x540E;&#x3002;&#x540E;&#x80A2;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x542B;&#x91CF;&#x4E5F;&#x4E0B;&#x8DCC; 50%&#x7684; AZT &#x6CBB;&#x7597; 4 &#x5468;&#x540E;&#x4E0E;&#x63A7;&#x4EF6;&#x76F8;&#x6BD4; (P &lt; 0.07) &#x548C;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5B66;&#x7387;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7684;&#x6307;&#x6570;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x7701;&#x4E86; 2 &#x5468;&#x7684; AZT (P &lt; 0.05&#xFF09; &#x540E;&#x80A2;&#x808C;&#x8089;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x521D;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; mtDNA &#x6D53;&#x7F29;&#x4E86;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; nDNA &#x5BCC;&#x96C6; &#xFF08;&#x7528;&#x4F5C;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5B8C;&#x5168;&#x8F6C;&#x5411;&#x5BF9;&#x7EC4;&#x7EC7;) &#x5728;&#x5065;&#x5EB7;&#x4EBA;&#x4F53;&#x3002;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; mtDNA &#x7684;&#x5206;&#x6570;&#x5408;&#x6210;&#x540E; 5 &#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x7684; H2O &#x8D34;&#x6807;&#x8FBE;&#x5230; 98 + /-3%&#x3002;&#x5B83;&#x7ED3;&#x675F; NRTIs &#x51CF;&#x5C11;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x6C27;&#x5316;&#x7684;&#x9176;&#x542B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5728;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5B66;&#x5BF9;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5B66; NRTIs &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;-1-&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x539F;&#x5219;&#x4E0A;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x5BF9;&#x5927;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x7C7B;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NRTIs) have been hypothesized to inhibit mitochondrial DNA polymerase gamma, resulting in decreased mtDNA synthesis and mitochondrial insufficiency in HIV-1-infected patients. mtDNA synthesis was measured directly using a stable isotope mass spectrometric method following NRTI treatment in rodents. 3'-Azido-3'-deoxythymidine (AZT) was added to water (1 mg/mL) and administered ad libitum to female Sprague-Dawley rats for 1-8 weeks (n = 4 or 5 animals/timepoint). Neither body weight nor food intake was affected by AZT intake. Untreated controls and AZT-treated rats were given 4% H2O as drinking water for 2 weeks. AZT (approximately 100 mg/kg/d) produced a significant (P < 0.05) decrease in cardiac and hindlimb muscle mtDNA fractional synthesis compared with control groups (from 13.8 +/- 4.2% to 7.0 +/- 4.8% and from 7.6 +/- 1.8% to 4.5 +/- 0.4%, respectively) after 4 weeks. Cytochrome c oxidase content in hindlimb muscle was also decreased by 50% compared with controls after 4 weeks of AZT treatment (P < 0.07) and a calculated index of absolute mitochondrial biogenesis rate was significantly reduced by week 2 of AZT (P < 0.05) in hindlimb muscle. In preliminary studies, platelet mtDNA enrichments were compared to monocyte nDNA enrichments (used as a marker of a fully turned over tissue) in healthy human subjects. Fractional synthesis of mtDNA in platelets reached 98 +/- 3% after 5 weeks of H2O labeling. It is concluded that NRTIs decrease mtDNA synthesis and oxidative enzyme content and thus mitochondrial biogenesis in rodents and that the effects of NRTIs on mitochondrial biogenesis in tissues of HIV-1- infected humans can in principle be measured using this approach.

Effect of nucleoside reverse transcriptase inhibitors on mitochondrial DNA synthesis in rats and humans.

Inhibiteurs nucl&eacute;osidiques de la transcriptase inverse (INTI) ont &eacute;mis l&#39;hypoth&egrave;se pour inhiber mitochondrial DNA polym&eacute;rase gamma, r&eacute;sultant en une diminution de l&#39;ADNmt synth&egrave;se et mitochondrial insuffisance chez les patients infect&eacute;s par le VIH-1. synth&egrave;se de l&#39;ADN mitochondrial a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e directement &agrave; l&#39;aide d&#39;une m&eacute;thode de spectrom&eacute;trie de masse isotopique stable apr&egrave;s un traitement NRTI chez les rongeurs. 3 &laquo; - Azido - 3 &raquo;-d&eacute;soxythymidine (AZT) a &eacute;t&eacute; ajout&eacute; &agrave; l&#39;eau (1 mg/mL) et administr&eacute;e ad libitum &agrave; des rats Sprague-Dawley femelles de 1 &agrave; 8 semaines (n = 4 ou 5 animaux/&eacute;valuation le 6e). Prise de poids ni nourriture ni corps est affect&eacute; par la prise d&#39;AZT. T&eacute;moins et rats trait&eacute;s &agrave; l&#39;AZT ont re&ccedil;u 4 % H2O comme l&#39;eau potable pendant 2 semaines. L&#39;AZT (environ 100 mg/kg/j) a produit une importante (P 0,05 &lt;) diminuer cardiaque du membre post&eacute;rieur muscle ADNmt fractionnaire synth&egrave;se et par rapport aux groupes t&eacute;moins (de 13,8 +/-4,2 % &agrave; 7,0 +/-4,8 % et de 7,6 +/-1,8 % &agrave; 4.5 +/-0,4 %, respectivement) apr&egrave;s 4 semaines. Teneur en cytochrome c oxydase dans le muscle du membre post&eacute;rieur a &eacute;galement diminu&eacute; de 50 % par rapport aux t&eacute;moins apr&egrave;s 4 semaines de traitement &agrave; l&#39;AZT (P &lt; 0,07) et un indice calcul&eacute; du taux absolu de la biogen&egrave;se mitochondriale a &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duit par semaine 2 de l&#39;AZT (P 0,05 &lt;) dans le muscle du membre post&eacute;rieur. Dans des &eacute;tudes pr&eacute;liminaires, les enrichissements de l&#39;ADNmt de plaquettes ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;s aux enrichissements ADNn monocyte (utilis&eacute; comme marqueur d&#39;un enti&egrave;rement tourn&eacute; sur tissu) chez des sujets humains en bonne sant&eacute;. Fractionnaire synth&egrave;se de l&#39;ADN mitochondrial dans les plaquettes atteint 98 +/-3 % apr&egrave;s 5 semaines d&#39;H2O d&#39;&eacute;tiquetage. On en conclut qu&#39;Inti diminuent la synth&egrave;se de l&#39;ADN mitochondrial et teneur enzymatique oxydative et donc la biogen&egrave;se mitochondriale chez les rongeurs et que les effets d&#39;Inti sur la biogen&egrave;se mitochondriale dans les tissus du VIH-1-humains infect&eacute;s peuvent en principe &ecirc;tre mesur&eacute;es &agrave; l&#39;aide de cette approche.

Effet des inhibiteurs nucl&eacute;osidiques de la transcriptase inverse sur la synth&egrave;se de l&#39;ADN mitochondriale chez les rats et les humains.

Einfluss von Nukleosid-Reverse-Transkriptase-Inhibitoren auf die mitochondriale DNA-Synthese bei Ratten und Menschen.

Gli inibitori della trascrittasi inversa nucleosidici (NRTI) hanno ipotizzati per inibire la gamma polimerasi del DNA mitocondriale, con conseguente diminuzione del mtDNA sintesi e insufficienza mitocondriale in pazienti affetti da HIV-1. sintesi del DNA mitocondriale &egrave; stata misurata direttamente utilizzando un metodo di spettrometria di massa dell&#39;isotopo stabile dopo il trattamento di NRTI nei roditori. 3 &#39;-Gruppi - 3&#39;-timidina (AZT) &egrave; stato aggiunto all&#39;acqua (1 mg/mL) e somministrata ad libitum a ratti Sprague-Dawley femmina per 1-8 settimane (n = 4 o 5 animali/timepoint). N&eacute; assunzione di peso n&eacute; cibo del corpo &egrave; stata colpita dalla assunzione di AZT. Controlli non trattati e trattati con AZT ratti erano dato 4% H2O come acqua potabile per 2 settimane. AZT (circa 100 mg/kg/d) prodotto una significativa (P &lt; 0.05) diminuzione cardiaca e arto posteriore muscolo mtDNA frazionale sintesi rispetto ai gruppi di controllo (da 13,8 + 4,2% a 7.0 + 4,8% e da 7,6 &plusmn; 1,8% a 4,5 + /-0,4%, rispettivamente) dopo 4 settimane. Contenuto di citocromo c ossidasi nel muscolo arto posteriore inoltre &egrave; diminuita del 50% rispetto ai controlli dopo 4 settimane di trattamento AZT (P &lt; 0,07) e un indice calcolato del tasso assoluto biogenesi mitocondriale &egrave; stato ridotto significativamente dalla settimana 2 di AZT (P &lt; 0.05) nel muscolo arto posteriore. In studi preliminari, arricchimenti di mtDNA delle piastrine sono stati confrontati con arricchimenti nDNA monocita (utilizzato come marcatore di un completamente girato sul tessuto) in soggetti umani sani. Sintesi frazionaria del mtDNA in piastrine ha raggiunto 98 + /-3% dopo 5 settimane di H2O etichettatura. Si &egrave; concluso che NRTIs diminuire la sintesi del DNA mitocondriale e contenuto di enzimi ossidativi e quindi biogenesi mitocondriale in roditori e che gli effetti di NRTIs sulla biogenesi mitocondriale in tessuti di HIV-1-infettati gli esseri umani possono in linea di principio essere misurati utilizzando questo approccio.

Effetto degli inibitori della trascrittasi inversa nucleosidici sulla sintesi del DNA mitocondriale nei ratti e gli esseri umani.

&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;&#x7CFB;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; &#xFF08;NRTIs&#xFF09; &#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; Dna &#x5408;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073; HIV-1 &#x611F;&#x67D3;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x7D42;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &gamma; &#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x304C;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; Dna &#x5408;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x6B21;&#x306E; NRTI &#x6CBB;&#x7642;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53;&#x6BD4;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;3 &#39;-&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB; - 3&#39;-&#x30C1;&#x30DF;&#x30B8;&#x30F3; &#xFF08;AZT&#xFF09; &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x6C34; (1 mg/mL) &#x3068; 1-8 &#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EA;&#x30D6;&#x96CC;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x6295;&#x4E0E; (n = 4 &#x307E;&#x305F;&#x306F; 5 &#x52D5;&#x7269;/&#x8AAD;&#x307F;&#x53D6;&#x3063;&#x305F;)&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x91CF;&#x3082;&#x98DF;&#x54C1;&#x306E;&#x6442;&#x53D6;&#x91CF;&#x306F; AZT &#x6442;&#x53D6;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068; AZT &#x6295;&#x4E0E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; 4 %h2o &#x306F; 2 &#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x98F2;&#x6599;&#x6C34;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;AZT &#xFF08;&#x7D04; 100 mg/kg/d) &#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5236;&#x4F5C; &#xFF08;P &lt; 0.05) &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7FA4;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x5FC3;&#x81D3;&#x3068;&#x5F8C;&#x80A2;&#x7B4B; mtDNA &#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x5408;&#x6210;&#x4F4E;&#x4E0B; (13.8 &plusmn; 4.2% &#x304B;&#x3089; 7.0 &plusmn; 4.8% &#x3068; &plusmn; 1.8 %4.5 &plusmn; 0.4% &#x306B; 7.6 &#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;) 4 &#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x3002;&#x5F8C;&#x80A2;&#x7B4B;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; c &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; &#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4; &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; AZT &#x6CBB;&#x7642;&#x306E; 4 &#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066; 50 &#xFF05; &#x3082;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F; (P &lt; 0.07) &#x3068;&#x7D76;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x7387;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F; AZT &#x306E;&#x9031; 2 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;P 0.05 &lt;) &#x5F8C;&#x80A2;&#x7B4B;&#x3002;&#x4E88;&#x5099;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; mtDNA &#x5F15;&#x6E21;&#x5358;&#x7403; nDNA &#x5F15;&#x6E21;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F; (&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x30AA;&#x30D5;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x4E0A;) &#x3072;&#x3068;&#x5065;&#x5E38;&#x8005;&#x306E;&#x3002;&#x5C0F;&#x6570;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x306E; mtDNA &#x306E; &plusmn; 3 %98 H2O &#x306E; 5 &#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x9031;&#x9593;&#x306B;&#x5F8C;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F;&#x3002;NRTIs mtDNA &#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50; NRTIs HIV &#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;-1-&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x539F;&#x7406;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x53EF;&#x80FD;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB274; &#xD074;&#xB808; &#xC624; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; (NRTIs) &#xAC10;&#xC18C; mtDNA &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xBD80;&#xC871;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC10;&#xB9C8;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC00;&#xC124; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. mtDNA &#xD569;&#xC131; NRTI &#xCE58;&#xB8CC; &#xC124;&#xCE58;&#xB958;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC548;&#xC815; &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; &#xC9C8;&#xB7C9; spectrometric &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C1;&#xC811; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. 3&#39;-Azido-3&#39;-deoxythymidine (&#xC5B4;)&#xB294; &#xBB3C; (1 mg/mL)&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; 1-8 &#xC8FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; ad libitum &#xC5EC;&#xC131; Sprague-Dawley &#xC950;&#xC5D0; &#xD22C;&#xC5EC; (n = 4 &#xB610;&#xB294; 5 &#xB3D9;&#xBB3C;/timepoint). &#xBAB8; &#xBB34;&#xAC8C; &#xB098; &#xC74C;&#xC2DD; &#xC12D;&#xCDE8; &#xB7C9;&#xB3C4; &#xC5B4; &#xC12D;&#xCDE8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE58;&#xB8CC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xACFC; &#xC950; &#xC5B4; &#xCE58;&#xB8CC; 2 &#xC8FC; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2DD; &#xC218;&#xB85C; 4% &#xBB3C;&#xC744; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5B4; (&#xC57D; 100 mg/kg/d)&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0DD;&#xC0B0; (P &lt; 0.05) &#xC2EC;&#xC7A5; &#xBC0F; hindlimb &#xADFC;&#xC721; mtDNA &#xC18C;&#xC218; &#xD569;&#xC131; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; (13.8 &plusmn; 7.0 &plusmn; 4.8%&#xC640; 7.6 &plusmn; 4.5 &plusmn; 0.4%&#xB85C; 1.8%&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; 4.2%&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC01;&#xAC01;) 4 &#xC8FC; &#xD6C4;. Hindlimb &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xB610;&#xD55C; &#xC5B4; &#xCE58;&#xB8CC; 4 &#xC8FC; &#xD6C4; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 50%&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; (P &lt; 0.07)&#xC640; &#xC808;&#xB300; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC18D; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xACC4;&#xC0B0; &#xB41C; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4; &#xC5B4; &#xC8FC; 2&#xB85C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; (P &lt; 0.05) hindlimb &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;. &#xC608;&#xBE44; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; mtDNA enrichments monocyte nDNA enrichments&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4; (&#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC124;&#xC815; &#xB418;&#xC5B4;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;) &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC778;&#xCCB4;&#xC5D0;. &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC5D0; Mtdna&#xC758; &#xC18C;&#xC218; &#xD569;&#xC131; &#xB77C;&#xBCA8; h2o&#xC758; 5 &#xC8FC; &#xD6C4; 98 &plusmn; 3%&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;. &#xCCB4;&#xACB0; NRTIs mtDNA &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC124;&#xCE58;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC18D; &#xAC10;&#xC18C; HIV&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC18D;&#xC5D0; Nrtis&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;-1-&#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04; &#xC6D0;&#xCE59;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE21;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

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Inhibidores de la transcriptasa inversa an&aacute;logos de los nucle&oacute;sidos (NRTI) han planteado la hip&oacute;tesis para inhibir gamma polimerasa de la DNA mitocondrial, resultando en la s&iacute;ntesis de mtDNA disminuida e insuficiencia mitocondrial en pacientes infectados por VIH-1. s&iacute;ntesis de mtDNA se midieron directamente utilizando un m&eacute;todo de espectrometr&iacute;a de masa de is&oacute;topos estables despu&eacute;s del tratamiento del Inti en roedores. 3&#39;-Azido-3&#39;-timidina (AZT) fue a&ntilde;adido al agua (1 mg/mL) y administrar ad libitum a ratas Sprague-Dawley 1-8 semanas (n = 4 o 5 animales/punto). Ni ingesta de peso ni comida del cuerpo fue afectado por la ingesta de AZT. Controles no tratados y tratados con AZT ratas recibieron 4% H2O como agua potable durante 2 semanas. AZT (aproximadamente 100 mg/kg/d) produjo una significativa (P 0.05 &lt;) disminuci&oacute;n cardiaca y trasera m&uacute;sculo mtDNA fraccional s&iacute;ntesis en comparaci&oacute;n con grupos de control (de 13,8 +/-4,2% a 7.0 +/-4,8% y de 7,6 +/-1,8% a 4.5 + /-0,4%, respectivamente) despu&eacute;s de 4 semanas. Contenido de citocromo c oxidasa en m&uacute;sculo trasera tambi&eacute;n disminuy&oacute; en un 50% en comparaci&oacute;n con controles despu&eacute;s de 4 semanas del tratamiento con AZT (P &lt; 0.07) y un &iacute;ndice calculado de tasa absoluta de la biog&eacute;nesis mitocondrial se redujo significativamente por dos semanas de AZT (P &lt; 0.05) en el m&uacute;sculo del miembro posterior. En estudios preliminares, enriquecimientos de mtDNA de plaquetas se compararon con enriquecimientos de monocitos nDNA (utilizado como marcador de totalmente dado vuelta sobre tejido) en sujetos humanos sanos. Fraccional s&iacute;ntesis del ADNmt en plaquetas alcanzaron 98 +-3% despu&eacute;s de 5 semanas de H2O etiquetado. Se concluye que NRTIs disminuyen s&iacute;ntesis de mtDNA y contenido de enzimas oxidativas y as&iacute; la biog&eacute;nesis mitocondrial en roedores y que los efectos de NRTIs en la biog&eacute;nesis mitocondrial en tejidos del VIH-1-seres humanos infectados pueden en principio ser medidos utilizando este enfoque.

Efecto de inhibidores nucle&oacute;sidos de la transcriptasa inversa en la s&iacute;ntesis de ADN mitocondrial en ratas y seres humanos.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684; M.&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x590D;&#x6742;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; CFP 10 &#x548C;&#x706F;&#x5854; 6 &#x5F62;&#x5F0F;&#x7D27;&#x7EF7;&#xFF0C;1&#xFF1A; 1 &#x7684;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE3;&#x8868;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x5DF2;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x751F;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9A;&#x6027; CFP-10/&#x706F;&#x5854;-6 &#x5BB6;&#x65CF;&#x86CB;&#x767D; (Rv0287/Rv0288 &#x548C; Rv3019c/Rv3020c) &#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E24;&#x5BF9;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x53EF;&#x4EE5;&#x975E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x914D;&#x5BF9;&#xFF0C;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5F62;&#x6210;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x8BF4;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8868;&#x660E; Rv0287/Rv0288 &#x548C; Rv3019c/3020c &#x6784;&#x6210;&#x7D27;&#x5BC6;&#x914D;&#x5408;&#xFF0C;&#x6700;&#x521D;&#x4E3A; CFP-10/&#x706F;&#x5854;-6 &#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; Rv0287/Rv0288 &#x548C; Rv3019c/Rv3020c &#x86CB;&#x767D;&#x4E5F;&#x80FD;&#x591F;&#x5F62;&#x6210;&#x975E;&#x57FA;&#x56E0;&#x6210;&#x5BF9;&#x914D;&#x5408;&#x7269; &#xFF08;Rv0287/Rv3019c &#x548C; Rv0288/Rv3020c&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x80FD;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x591A;&#x8FDC;&#x4EB2; CFP-10/&#x706F;&#x5854;-6 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x590D;&#x6742; CFP-10/&#x706F;&#x5854;-6 &#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x7279;&#x6027;&#xFF1A; &#x5B9E;&#x73B0;&#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C;&#x4ECE;&#x800C;&#x529F;&#x80FD;&#x7075;&#x6D3B;&#x7684;&#x89C4;&#x5219;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

We have previously shown that the secreted M. tuberculosis complex proteins CFP-10 and ESAT-6 form a tight, 1:1 complex, which may represent their functional form. In the work reported here a combination of yeast two-hybrid and biochemical analysis has been used to characterise complex formation between two other pairs of CFP-10/ESAT-6 family proteins (Rv0287/Rv0288 and Rv3019c/Rv3020c) and to determine whether complexes can be formed between non-genome paired members of the family. The results clearly demonstrate that Rv0287/Rv0288 and Rv3019c/3020c form tight complexes, as initially observed for CFP-10/ESAT-6. The closely related Rv0287/Rv0288 and Rv3019c/Rv3020c proteins are also able to form non-genome paired complexes (Rv0287/Rv3019c and Rv0288/Rv3020c), but are not capable of binding to the more distantly related CFP-10/ESAT-6 proteins.

Characterisation of complex formation between members of the Mycobacterium tuberculosis complex CFP-10/ESAT-6 protein family: towards an understanding of the rules governing complex formation and thereby functional flexibility.

Nous avons pr&eacute;c&eacute;demment montr&eacute; que les prot&eacute;ines s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es du complexes tuberculosis M. CFP-10 et ESAT-6 forme un complexe serr&eacute;, 1:1, qui peut-&ecirc;tre repr&eacute;senter leur forme fonctionnelle. Les travaux rapport&eacute;s ici qu&#39;une combinaison d&#39;analyses biochimiques et de deux-hybride de levure a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour caract&eacute;riser la formation d&#39;un complexe entre deux autres paires de CFP-10/ESAT-6 prot&eacute;ines de la famille (Rv0287/Rv0288 et Rv3019c/Rv3020c) et de d&eacute;terminer si les complexes peuvent se former entre les g&eacute;nomes non appari&eacute;s membres de la famille. Les r&eacute;sultats d&eacute;montrent clairement que les Rv0287/Rv0288 et Rv3019c/3020c forment des complexes serr&eacute;s, comme initialement observ&eacute;es pour la CFP-10/ESAT-6. Les prot&eacute;ines de Rv0287/Rv0288 et Rv3019c/Rv3020c &eacute;troitement apparent&eacute;es peuvent aussi former des complexes paires non-g&eacute;nome (Rv0287/Rv3019c et Rv0288/Rv3020c), mais ne sont pas capables de se lier aux prot&eacute;ines CFP-10/ESAT-6 plus apparent&eacute;es.

Caract&eacute;risation de la formation de complexes entre les membres de la famille de la prot&eacute;ine de CFP-10/ESAT-6 complexe Mycobacterium tuberculosis : vers une compr&eacute;hension des r&egrave;gles r&eacute;gissant la formation de complexes et de flexibilit&eacute; fonctionnelle ainsi.

Charakterisierung der Komplexbildung zwischen Mitgliedern des Mycobacterium tuberculosis-Komplexes CFP-10/ESAT-6 Proteinfamilie: zum Verst&#xE4;ndnis der Regeln f&#xFC;r die Komplexbildung und damit funktionale Flexibilit&#xE4;t.

In precedenza abbiamo dimostrato che la secrete M. tubercolosi complesse proteine CFP-10 ed ESAT-6 forma un complesso stretto, 1:1, che possa rappresentare la loro forma funzionale. Nel lavoro riportato qui che una combinazione di analisi di due ibridi e biochimica di lievito &egrave; stata utilizzata per caratterizzare la formazione di complessi tra due altre coppie di proteine famiglie CFP-10/ESAT-6 (Rv0287/Rv0288 e Rv3019c/Rv3020c) e per determinare se si possono formare complessi tra genoma non accoppiati membri della famiglia. I risultati dimostrano chiaramente che Rv0287/Rv0288 e Rv3019c/3020c formano complessi stretti, come inizialmente osservati per CFP-10/ESAT-6. Le proteine strettamente correlate Rv0287/Rv0288 e Rv3019c/Rv3020c sono anche in grado di formare complessi accoppiati non-genoma (Rv0287/Rv3019c e Rv0288/Rv3020c), ma non sono in grado di legarsi alle proteine pi&ugrave; lontanamente correlate CFP-10/ESAT-6.

Caratterizzazione della formazione di complessi tra i membri della famiglia della proteina di Mycobacterium tuberculosis complesso CFP-10/ESAT-6: verso una comprensione delle regole che disciplinano la formazione dei complessi e quindi funzionale flessibilit&agrave;.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x5206;&#x6CCC; M. &#x7D50;&#x6838;&#x8907;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; CFP 10 &#x3068;&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8; &#x30AA;&#x30C6;&#x30EB; 6 &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30BF;&#x30A4;&#x30C8;&#x306A; 1:1 &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x3067;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x9175;&#x6BCD; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x3068;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B; CFP 10/&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8; &#x30AA;&#x30C6;&#x30EB; 6 &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;Rv0287/Rv0288 &#x30FB; Rv3019c/Rv3020c&#xFF09; &#x306E;&#x4ED6;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x932F;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3068;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x975E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x9593;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x5831;&#x544A;&#x3002;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; Rv0287/Rv0288 &#x3068; Rv3019c/3020c &#x5F53;&#x521D; CFP 10/&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8; &#x30AA;&#x30C6;&#x30EB; 6 &#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30C8;&#x306A;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B; Rv0287/Rv0288 &#x3068; Rv3019c/Rv3020c &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x975E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30DA;&#x30A2;&#x932F;&#x4F53; &#xFF08;Rv0287/Rv3019c &#x30FB; Rv0288/Rv3020c&#xFF09; &#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x9060;&#x7E01; CFP 10/&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8; &#x30AA;&#x30C6;&#x30EB; 6 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x6297;&#x9178;&#x83CC;&#x7D50;&#x6838;&#x8907;&#x96D1; CFP 10/&#x30A4;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8; &#x30AA;&#x30C6;&#x30EB; 6 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x9593;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;: &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x30EB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x305F;&#x3002;

&#xBE44; M. &#xACB0;&#xD575; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; c f P-10&#xACFC; ESAT 6 &#xC591;&#xC2DD; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC591;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, 1:1 &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC791;&#xD488; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; characterise c f P-10/ESAT-6 &#xAC00;&#xC871; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Rv0287/Rv0288 &#xBC0F; Rv3019c/Rv3020c)&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xC30D; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44; &#xAC8C;&#xB188; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xC0AC;&#xC774; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xBC0F; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC774; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; Rv0287/Rv0288, Rv3019c/3020c &#xAF49; &#xB2E8;&#xC9C0;, c f P-10/ESAT-6&#xC73C;&#xB85C; &#xCC98;&#xC74C; &#xAD00;&#xCC30; &#xC591;&#xC2DD; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; Rv0287/Rv0288 &#xBC0F; Rv3019c/Rv3020c &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE44; &#xAC8C;&#xB188; &#xC30D;&#xB41C; &#xB2E8;&#xC9C0; (Rv0287/Rv3019c &#xBC0F; Rv0288/Rv3020c)&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB354; &#xBA3C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; c f P-10/ESAT-6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

Mycobacterium &#xACB0;&#xD575; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; c f P-10/ESAT-6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xAC04;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;: &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB85C; &#xC778;&#xD558;&#xC5EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC720;&#xC5F0;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574;.

Previamente hemos demostrado las prote&iacute;nas secretadas M. tuberculosis complejas CFP-10 los ESAT-6 forma un complejo apretado, 1:1, que puede representar su forma funcional. En el trabajo divulgado aqu&iacute; que una combinaci&oacute;n de an&aacute;lisis dos h&iacute;bridos y bioqu&iacute;mico de la levadura se ha utilizado para caracterizar la formaci&oacute;n de complejos entre otros dos pares de CFP-10/ESAT-6 familias prote&iacute;nas (Rv0287/Rv0288 Rv3019c/Rv3020c) y para determinar si se pueden formar complejos entre genoma no apareados miembros de la familia. Los resultados demuestran claramente que el Rv0287/Rv0288 y Rv3019c/3020c forman complejos apretados, como inicialmente observados CFP-10/ESAT-6. Las prote&iacute;nas estrechamente relacionadas de Rv0287/Rv0288 y Rv3019c/Rv3020c tambi&eacute;n son capaces de formar complejos de genoma no apareados (Rv0287/Rv3019c y Rv0288/Rv3020c), pero no son capaces de unirse a las prote&iacute;nas m&aacute;s distante relacionadas de CFP-10/ESAT-6.

Caracterizaci&oacute;n de la formaci&oacute;n de complejos entre los miembros de la familia de prote&iacute;nas CFP-10/ESAT-6 complejo Mycobacterium tuberculosis: hacia una comprensi&oacute;n de las normas que rigen la formaci&oacute;n de complejos y la flexibilidad de tal modo funcional.

Christiana &#x62A4;&#x7406;&#x4FDD;&#x5065;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5185;&#x673A;&#x4F1A;&#x6F14;&#x53D8;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0B;&#x79FB;&#x5355;&#x4F4D;&#x5236;&#x5B9A;&#x62A4;&#x58EB;&#x62DB;&#x8058;&#x6218;&#x7565;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x5927;&#x578B;&#x6559;&#x5B66;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x6709;&#x62A4;&#x7406;&#x6559;&#x80B2;&#x8FD9;&#x9879;&#x4E00;&#x7EA7;&#x7684;&#x7279;&#x6B8A;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x62A4;&#x7406;&#x7684;&#x540C;&#x4E8B;&#x5408;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E0B;&#x79FB;&#x62A4;&#x58EB;&#x5B9E;&#x4E60;&#x8BA1;&#x5212;&#x3002;&#x8BE5;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5305;&#x62EC;&#x4E34;&#x5E8A;&#x65B9;&#x5411;&#x548C;&#x6559;&#x5B66;&#x73ED;&#x3002;&#x5728;&#x5B8C;&#x6210;&#x8BE5;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x610F;&#x4E49;&#x7684;&#x662F;&#x57FA;&#x672C;&#x77E5;&#x8BC6;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5206;&#x6570;&#x6539;&#x8FDB;&#x548C;&#x62A4;&#x58EB;&#x4FDD;&#x7559;&#x7387;&#x3002;

&#x521B;&#x5EFA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E0B;&#x79FB;&#x62A4;&#x58EB;&#x5B9E;&#x4E60;&#x8BA1;&#x5212;&#x3002;

Within Christiana Care Health System, an opportunity evolved to develop a nurse recruitment strategy for our stepdown units. Being a large teaching system, there was specific need for nursing education at this entry level. Through collaboration of nursing colleagues, the Stepdown Nurse Internship Program was created. The program encompassed clinical orientation and didactic classes. Of notable significance at the completion of the program were the Basic Knowledge Assessment Test score improvement and the nurse retention rate.

Creation of a stepdown nurse internship program.

Au sein de Christiana Care Health System, l&#39;occasion a &eacute;volu&eacute; &agrave; &eacute;laborer une strat&eacute;gie de recrutement d&#39;infirmi&egrave;re pour nos unit&eacute;s de soins. Etant un syst&egrave;me grand enseignement, il y avait un besoin sp&eacute;cifique pour l&#39;enseignement &agrave; ce niveau d&#39;entr&eacute;e infirmier. Gr&acirc;ce &agrave; la collaboration de coll&egrave;gues infirmi&egrave;res, le programme de stages d&#39;infirmi&egrave;re abaisseur a &eacute;t&eacute; cr&eacute;&eacute;. Le programme englobe l&#39;orientation clinique et didactiques classes. D&#39;importance notable &agrave; la fin du programme ont &eacute;t&eacute; l&#39;am&eacute;lioration du score base Test d&#39;&eacute;valuation de connaissances et le taux de r&eacute;tention d&#39;infirmi&egrave;re.

Cr&eacute;ation d&#39;un programme de stages d&#39;infirmi&egrave;re abaisseur.

Schaffung einer Untersetzung Krankenschwester Internship-Programm.

All&#39;interno di Christiana Care Health System, un&#39;occasione si &egrave; evoluta per sviluppare una strategia di reclutamento infermiere per le nostre unit&agrave; stepdown. Essendo un sistema di grande insegnamento, c&#39;era bisogno specifico per infermieristica educazione a questo livello di entrata. Attraverso la collaborazione dei colleghi di professione d&#39;infermiera, &egrave; stato creato il programma di Internship Stepdown infermiera. Il programma comprendeva orientamento clinico e didattiche classi. Di notevole importanza al completamento del programma sono stati il miglioramento del punteggio Test di valutazione conoscenze base e il tasso di ritenzione infermiera.

Creazione di un programma di stage stepdown infermiera.

&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x30CA;&#x306E;&#x4ECB;&#x8B77;&#x8001;&#x4EBA;&#x4FDD;&#x5065;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5185;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7; &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x770B;&#x8B77;&#x5E2B;&#x52DF;&#x96C6;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x6559;&#x80B2;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x770B;&#x8B77;&#x6559;&#x80B2;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x770B;&#x8B77;&#x306E;&#x540C;&#x50DA;&#x306E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30DC;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x8ABF;&#x6574;&#x770B;&#x8B77;&#x5A66;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30C3;&#x30D7; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x304C;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x3068;&#x6559;&#x8A13;&#x7684;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x5305;&#x542B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x5B8C;&#x4E86;&#x6642;&#x306B;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x610F;&#x7FA9;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3068;&#x770B;&#x8B77;&#x5E2B;&#x306E;&#x5B9A;&#x7740;&#x7387;&#x3092;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7; &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30CA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30C3;&#x30D7; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x3002;

&#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD2F0; &#xCF00;&#xC5B4; &#xAC74;&#xAC15; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2A4;&#xD15D; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xD638;&#xC0AC; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xC804;&#xB7B5; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC9C4;&#xD654;. &#xB300;&#xD615; &#xAD50;&#xC721; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC774;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;,&#xC774; &#xC5D4;&#xD2B8;&#xB9AC; &#xB808;&#xBCA8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xC721; &#xAC04;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xD638; &#xB3D9;&#xB8CC;&#xC758; &#xD611;&#xB825;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2A4;&#xD15D; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xAC04;&#xD638;&#xC0AC; &#xC778;&#xD134;&#xC27D; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC784;&#xC0C1; &#xBC29;&#xD5A5;&#xACFC; &#xAD50;&#xD6C8; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0;. &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC644;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xBAA9;&#xD560; &#xB9CC;&#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC9C0;&#xC2DD; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC810;&#xC218; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xAC04;&#xD638;&#xC0AC; &#xC720;&#xC9C0; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC2A4;&#xD15D; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xAC04;&#xD638;&#xC0AC; &#xC778;&#xD134;&#xC27D; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC791;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Dentro de Christiana Care Health System, evolucion&oacute; una oportunidad para desarrollar una estrategia de reclutamiento de la enfermera para nuestras unidades de paso descendente. Ser un sistema de ense&ntilde;anza grande, hubo necesidad espec&iacute;fica para la educaci&oacute;n en este nivel de entrada de enfermer&iacute;a. Gracias a la colaboraci&oacute;n de colegas de enfermer&iacute;a, se cre&oacute; el programa de pasant&iacute;as de la enfermera de paso descendente. El programa engloba la orientaci&oacute;n cl&iacute;nica y clases did&aacute;cticas. De notable importancia en la terminaci&oacute;n del programa fueron la mejora de puntuaci&oacute;n de la prueba b&aacute;sica de evaluaci&oacute;n de conocimientos y la tasa de retenci&oacute;n de la enfermera.

Creaci&oacute;n de un programa de pasant&iacute;as de enfermera de paso descendente.

&#x5206;&#x5C42;&#x7684;&#x5B87;&#x5B99;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x661F;&#x7CFB;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x4F1A;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5806;&#x79EF;&#x7684;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x4F53;&#x79EF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6F6E;&#x6C50;&#x4E2D;&#x65AD;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x5BFC;&#x81F4;&#x677E;&#x6563;&#x7684;&#x6052;&#x661F;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x661F;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FBE;&#x5230; 10-100 &#x500D;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x78C1;&#x76D8;&#x534A;&#x5F84;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x3002;&#x6570;&#x76EE;&#x3001; &#x4EAE;&#x5EA6;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x6587;&#x7269;&#x63D0;&#x4F9B;&#x91CD;&#x8981;&#x7EBF;&#x7D22;&#x661F;&#x7CFB;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5386;&#x53F2;&#xFF0C;&#x4F46;&#x83B7;&#x5F97;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x5168;&#x9762;&#x8C03;&#x67E5;&#x5F88;&#x56F0;&#x96BE;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x5934;&#x6655;&#x548C;&#x5927;&#x7247;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4ED9;&#x5973;&#x5EA7;&#x661F;&#x7CFB; (M31) &#x7684;&#x5168;&#x666F;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6052;&#x661F;&#x548C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x80AF;&#x5B9A;&#x662F;&#x77EE;&#x661F;&#x7CFB; M31 &#x6F6E;&#x6C50;&#x9886;&#x57DF;&#x9500;&#x6BC1;&#x9057;&#x7559;&#x7269;&#x7684;&#x62DF;&#x5E8F;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x5C1A;&#x5B58;&#x7684;&#x540C;&#x884C;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x666E;&#x67E5;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x56DB;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E09;&#x7684; M31 &#x7684;&#x536B;&#x661F;&#x6BD4; M(v) &#x7684;&#x4EAE;&#x5EA6; =-6 &#x7B49;&#x5F85;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x6700;&#x806A;&#x660E;&#x7684;&#x540C;&#x4F34;&#xFF0C;Triangulum (M33) &#x5305;&#x56F4;&#x7740;&#x6052;&#x661F;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6709;&#x8BF4;&#x670D;&#x529B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;M31 &#x6700;&#x8FD1;&#x78B0;&#x5230;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5168;&#x666F;&#x56FE;&#x7684;&#x94F6;&#x6CB3;&#x7ED3;&#x6784;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5206;&#x5C42;&#x661F;&#x7CFB;&#x5F62;&#x6210;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x539F;&#x5219;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63ED;&#x793A;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x65AD;&#x79EF;&#x805A;&#x7684;&#x661F;&#x7CFB; M31 &#x548C; M33 &#x7684;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x5386;&#x53F2;&#x3002;

&#x4ECE;&#x8BE5;&#x533A;&#x57DF;&#x5468;&#x56F4; M31 &#x5168;&#x666F;&#x8C03;&#x67E5;&#x661F;&#x7CFB;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x9057;&#x7559;&#x7269;&#x3002;

In hierarchical cosmological models, galaxies grow in mass through the continual accretion of smaller ones. The tidal disruption of these systems is expected to result in loosely bound stars surrounding the galaxy, at distances that reach 10-100 times the radius of the central disk. The number, luminosity and morphology of the relics of this process provide significant clues to galaxy formation history, but obtaining a comprehensive survey of these components is difficult because of their intrinsic faintness and vast extent. Here we report a panoramic survey of the Andromeda galaxy (M31). We detect stars and coherent structures that are almost certainly remnants of dwarf galaxies destroyed by the tidal field of M31. An improved census of their surviving counterparts implies that three-quarters of M31's satellites brighter than M(v) = -6 await discovery. The brightest companion, Triangulum (M33), is surrounded by a stellar structure that provides persuasive evidence for a recent encounter with M31. This panorama of galaxy structure directly confirms the basic tenets of the hierarchical galaxy formation model and reveals the shared history of M31 and M33 in the unceasing build-up of galaxies.

The remnants of galaxy formation from a panoramic survey of the region around M31.

Dans les mod&egrave;les cosmologiques hi&eacute;rarchiques, galaxies se d&eacute;veloppent en masse par l&#39;accr&eacute;tion continuelle des plus petits. La mar&eacute;e perturbation de ces syst&egrave;mes devrait se traduire par des &eacute;toiles faiblement li&eacute;es autour de la galaxie, &agrave; des distances atteignant 10 &agrave; 100 fois le rayon du disque central. Le nombre, la luminosit&eacute; et la morphologie des reliques de ce processus fournissent des indices importants pour l&#39;histoire de la formation de galaxie, mais obtenir une &eacute;tude compl&egrave;te de ces composants est difficile en raison de leur faiblesse intrins&egrave;que et la vaste &eacute;tendue. Nous rapportons ici un sondage panoramique de la galaxie d&#39;Androm&egrave;de (M31). Nous d&eacute;tectons des &eacute;toiles et des structures coh&eacute;rentes qui sont presque certainement des vestiges de galaxies naines, d&eacute;truits par le champ mar&eacute;e de M31. Un recensement am&eacute;lior&eacute; de leurs homologues survivants implique que les trois quarts des satellites de M31 plus lumineux que M(v) = -6 attendent d&eacute;couverte. Le compagnon de brillants, du triangle (M33), est entour&eacute; par une structure stellaire qui fournit des preuves convaincantes d&#39;une r&eacute;cente rencontre avec M31. Ce panorama de la structure de la galaxie directement confirme les principes de base du mod&egrave;le hi&eacute;rarchique galaxie formation et r&eacute;v&egrave;le l&#39;histoire partag&eacute;e de M31 et M33 dans l&#39;accumulation incessante de galaxies.

Les restes de la formation des galaxies d&#39;une enqu&ecirc;te panoramique de la r&eacute;gion autour de M31.

In hierarchischen kosmologischen Modellen wachsen Galaxien in Masse durch die kontinuierliche Akkretion von kleineren. Die Gezeiten St&ouml;rung dieser Systeme wird voraussichtlich f&uuml;hren zu lose gebundenen Sternen rund um die Galaxie, in Abst&auml;nden, die 10 - 100 Mal den Radius der zentralen Scheibe zu erreichen. Anzahl, Leuchtkraft und Morphologie der Reliquien dieses Prozesses geben deutliche Hinweise auf Galaxie-Bildung-Geschichte, sondern erhalten einen umfassenden &Uuml;berblick &uuml;ber diese Komponenten ist schwierig, weil ihre inneren Ohnmacht und riesigen Umfang. Hier berichten wir einen Panorama &Uuml;berblick &uuml;ber die Andromeda-Galaxie (M31). Wir erkennen, Sternen und koh&auml;rente Strukturen, die Reste der Zwerggalaxien, von Gezeiten-Bereich M31 zerst&ouml;rt fast sicher sind. Eine verbesserte Volksz&auml;hlung von &Uuml;berlebenden Gegenst&uuml;cke impliziert, dass drei Viertel der M31s Satelliten heller als M(v) =-6 erwarten Entdeckung. Die hellste Begleiter, Triangulum (M33), umgeben von einer stellaren Struktur, die &uuml;berzeugende Beweise f&uuml;r eine neue Begegnung mit M31 bereitstellt. Dieses Panorama der Galaxie-Struktur direkt best&auml;tigt die Grunds&auml;tze von der hierarchischen Galaxie-Bildung-Modell und zeigt die gemeinsame Geschichte von M31 und M33 in der unaufh&ouml;rlichen Aufbau der Galaxien.

Die Reste der Galaxienbildung ein Panorama Erhebung der Region um M31.

Nei modelli cosmologici gerarchici, galassie crescono in massa attraverso il continuo accrescimento di quelli pi&ugrave; piccoli. Il mareali, di questi sistemi dovrebbe comportare liberamente associati stelle che circonda la galassia, a distanze che raggiungono i 10 - 100 volte il raggio del disco centrale. Il numero, la luminosit&agrave; e la morfologia delle reliquie di questo processo forniscono indizi significativi alla storia di formazione di galaxy, ma ottenendo un sondaggio globale di questi componenti &egrave; difficile a causa della loro debolezza intrinseca e vasta portata. Qui riportiamo un&#39;indagine panoramica della galassia di Andromeda (M31). Individuare stelle e strutture coerenti che sono quasi certamente i resti delle galassie nane distrutte dal campo delle maree di M31. Un censimento del miglioramento delle loro controparti sopravvissuti implica che tre quarti dei satelliti di M31 pi&ugrave; luminosi di M(v) = -6 aspettano di essere scoperti. Il compagno pi&ugrave; brillante, del triangolo (M33), &egrave; circondato da una struttura stellare che fornisce prove convincenti per un recente incontro con M31. Questo panorama della struttura galaxy direttamente conferma i principi di base del modello di formazione gerarchica galassia e rivela la storia condivisa di M31 e M33 nell&#39;accumulo incessante di galassie.

I resti della formazione della galassia da un&#39;indagine panoramica della regione intorno a M31.

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M31 &#x5468;&#x8FBA;&#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x30D1;&#x30CE;&#x30E9;&#x30DE;&#x63A2;&#x67FB;&#x304B;&#x3089;&#x9280;&#x6CB3;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6B8B;&#x9AB8;&#x3002;

&#xACC4;&#xCE35;&#xC801; &#xC6B0;&#xC8FC;&#xB860; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xC791;&#xC740; &#xAC83; &#xB4E4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC00; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C8;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAC2F;&#xBC8C; &#xD30C;&#xAD34; &#xB290;&#xC2A8;&#xD558;&#xAC8C; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC2A4;&#xD0C0; 10-100 &#xBC30; &#xC911;&#xC559; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC758; &#xBC18;&#xC9C0;&#xB984;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC740; &#xD558; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xC0C1;. &#xAD11;&#xB3C4; &#xBC0F;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC720;&#xBB3C;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC740; &#xD558; &#xD615;&#xC131; &#xC5ED;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD80;&#xD488;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC5BB;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; faintness &#xBC0F; &#xAD11;&#xB300; &#xD55C; &#xBC94;&#xC704; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xAC83;&#xC740;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC548;&#xB4DC;&#xB85C;&#xBA54;&#xB2E4;&#xB294; &#xD558; (M31)&#xC758; &#xD30C;&#xB178;&#xB77C;&#xB9C8; &#xC870;&#xC0AC; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCC4;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xAC70;&#xC758; &#xD655;&#xC2E4;&#xD788; M31 &#xC870;&#xB825; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD30C;&#xAD34; &#xD558;&#xB294; &#xC65C;&#xC18C;&#xB294; &#xD558;&#xC758; &#xC794;&#xD574;. &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC740; &#xB4E4;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC13C;&#xC11C;&#xC2A4; &#xC758;&#xBBF8; &#xD558;&#xB294; M(v) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xC740; m31&#xC758; &#xC778;&#xACF5; &#xC704;&#xC131;&#xC758; 3/4 =-6 &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xAE30;&#xB2E4;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB611;&#xB611;&#xD55C; &#xB3D9;&#xBC18;&#xC790; &#xC0BC;&#xAC01;&#xD615; (M33), m31&#xC640; &#xCD5C;&#xADFC; &#xB9CC;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xB4DD;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBCC4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC5EC; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758;&#xC774; &#xD30C;&#xB178;&#xB77C;&#xB9C8; &#xC9C1;&#xC811; &#xACC4;&#xCE35;&#xC740; &#xD558; &#xD615;&#xC131; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2E0;&#xC870;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0;&#xC740; &#xD558;&#xC758; &#xB04A;&#xC784; &#xC5C6;&#xB294; &#xBE4C;&#xB4DC;&#xC5D0; M31 m33&#xC758; &#xACF5;&#xC720; &#xC5ED;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

M31 &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; &#xD30C;&#xB178;&#xB77C;&#xB9C8; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC740; &#xD558; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC794;&#xC7AC;.

En los modelos cosmol&oacute;gicos jer&aacute;rquicos, galaxias crecen en masa a trav&eacute;s de la acumulaci&oacute;n continua de peque&ntilde;os. La interrupci&oacute;n de la marea de estos sistemas es que resulte en estrellas libremente consolidados que rodea la galaxia, en distancias que alcanzan de 10 a 100 veces el radio del disco central. El n&uacute;mero, la luminosidad y la morfolog&iacute;a de las reliquias de este proceso proporcionan pistas importantes a la historia de formaci&oacute;n de galaxia, pero obtener un estudio exhaustivo de estos componentes es dif&iacute;cil debido a su debilidad intr&iacute;nseca y gran alcance. Presentamos un estudio panor&aacute;mico de la galaxia de Andr&oacute;meda (M31). Detectamos estrellas y estructuras coherentes que seguramente son restos de galaxias enanas, destruidas por el campo marea de M31. Un censo mejorado de sus hom&oacute;logos sobrevivientes implica que las tres cuartas partes de los sat&eacute;lites de M31 m&aacute;s brillantes que M(v) = -6 esperan ser descubiertos. El compa&ntilde;ero m&aacute;s brillante, tri&aacute;ngulo (M33), est&aacute; rodeado por una estructura estelar que proporciona evidencia persuasiva para un encuentro reciente con M31. Este panorama de la estructura de la galaxia directamente confirma los principios b&aacute;sicos del modelo de formaci&oacute;n jer&aacute;rquica de la galaxia y revela la historia compartida de M31 y M33 en la incesante acumulaci&oacute;n de galaxias.

Los restos de la formaci&oacute;n de la galaxia de una encuesta panor&aacute;mica de la regi&oacute;n alrededor de M31.

&#x4F7F;&#x7528; ST &#x6BB5;&#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;

Using continuous ST-segment monitoring.

&Agrave; l&#39;aide de surveillance continue du segment ST.

Verwenden die kontinuierliche &Uuml;berwachung von ST-Segment.

Mediante monitoraggio continuo di ST-segmento.

ST &#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

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Michelle L. Collins

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