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Compartmentalization of Human Stem Cell-Derived Neurons within Pre-Assembled Plastic Microfluidic Chips

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University of California, Irvine (UCI)

Xona Microfluidics, LLC

&#x6211;&#x4EEC;&#x7EFC;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528; dbEST &#x548C; UniGene &#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6570;&#x636E;&#x96C6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6709;&#x7F6A;&#x7531;&#x534F;&#x4F1A; &#xFF08;GBA&#xFF09; &#x6765;&#x5206;&#x6790;&#x6B64;&#x6570;&#x636E;&#x96C6;&#x548C;&#x8BC6;&#x522B; coexpressed &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x5757;&#x6216;&#x4E00;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x662F;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x548C;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F; coexpressed&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x80BA;&#x764C;&#x3001; &#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x548C;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4E5F;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x6B64;&#x6A21;&#x5757;&#x5305;&#x542B;&#x81F3;&#x5C11;&#x516D;&#x540D;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E; transcritional &#x8C03;&#x8282; &#xFF08;PDEF&#x3001; H2AFO&#x3001; NUCKS) &#x6216;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x9014;&#x5F84; &#xFF08;PSMD7&#xFF0C;SQSTM1&#xFF0C;FLJ10111)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x8BA4;&#x5171;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7684;&#x610F;&#x89C1;&#x7531;&#x5B9E;&#x65F6;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790; mRNA &#x4ECE;&#x56DB;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x3002;

&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x786E;&#x8BA4;&#x7684; coexpressed &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x3002;

We synthesize a large gene expression data set using dbEST and UniGene. We use guilt-by-association (GBA) to analyze this data set and identify coexpressed genes. One module, or group of genes, was found to be coexpressed mainly in tissue extracted from breast and ovarian cancers, but also found in tissue from lung cancers, brain cancers, and bone marrow. This module contains at least six members that are believed to be involved in either transcritional regulation (PDEF, H2AFO, NUCKS) or the ubiquitin proteasome pathway (PSMD7, SQSTM1, FLJ10111). We confirm these observations of coexpression by real-time RT-PCR analysis of mRNA extracted from four model breast epithelial cell lines.

Identification and confirmation of a module of coexpressed genes.

Nous synth&eacute;tisons un ensemble de donn&eacute;es d&#39;expression de g&egrave;ne grand dbEST et unig&egrave;nes. Nous utilisons la culpabilit&eacute; par association (ACS) pour analyser cet ensemble de donn&eacute;es et d&#39;identifier les g&egrave;nes dynorphin. Un module, ou un groupe de g&egrave;nes, a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; &agrave; &ecirc;tre coexpriment principalement dans le tissu de cancer du sein et les cancers de l&#39;ovaire, mais &eacute;galement trouv&eacute; dans les tissus de cancers du poumon, les cancers du cerveau et la moelle osseuse. Ce module contient au moins six membres qui sont soup&ccedil;onn&eacute;s d&#39;&ecirc;tre impliqu&eacute;s dans la r&eacute;gulation de transcritional (PDEF, H2AFO, NUCKS) ou la voie de prot&eacute;asome ubiquitine (PSMD7, SQSTM1, FLJ10111). Nous confirmer ces observations de coexpression par analyse de RT-PCR en temps r&eacute;el d&#39;ARNm extrait de quatre lign&eacute;es de cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires mod&egrave;le.

L&#39;identification et la confirmation d&#39;un module de g&egrave;nes dynorphin.

Identifizierung und Best&#xE4;tigung eines Moduls coexprimierten Gene.

Sintetizziamo un set di dati di espressione genica grandi utilizzando dbEST e UniGene. Usiamo la colpa di associazione (GBA) per analizzare questo set di dati e identificare i geni Rsc8p. Un modulo o un gruppo di geni, &egrave; stato trovato per essere coespressi principalmente nel tessuto estratta dal seno e tumori ovarici, ma anche trovato nel tessuto da tumori polmonari, tumori del cervello e del midollo osseo. Questo modulo contiene almeno sei membri che si ritiene siano coinvolti nella regolazione transcritional (PDEF, H2AFO, NUCKS) o via del proteasoma ubiquitina (PSMD7, SQSTM1, FLJ10111). Confermiamo queste osservazioni di coexpression da analisi di RT-PCR in tempo reale di mRNA estratte da quattro linee di cellule epiteliali modello materno.

Identificazione e conferma di un modulo di geni Rsc8p.

DbEST &#x3068; UniGene &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; &#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; &#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x7F6A;&#x60AA;&#x611F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5354;&#x4F1A; &#xFF08;GBA &#x306E;&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1 &#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E73;&#x764C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x4E3B;&#x306B;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#xFF09; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x80BA;&#x30AC;&#x30F3;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x764C;&#x3084;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x304B;&#x3089;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x306F;&#x3001;transcritional &#x898F;&#x5236; (PDEF, H2AFO, NUCKS) &#x3084;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D4C;&#x8DEF; (PSMD7&#x3001;SQSTM1&#x3001;FLJ10111&#xFF09; &#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 6 &#x4EBA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 4 &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x884C;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; mRNA &#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; RT-PCR &#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8EAB;&#x5206;&#x8A3C;&#x660E;&#x66F8;&#x3068;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xD569;&#xC131; dbEST Unigene&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD070; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC9D1;&#xD569;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC138;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; coexpressed &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xC8C4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD611;&#xD68C; (GBA)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4C8; &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xACFC; &#xB09C;&#xC18C; &#xC554;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; coexpressed&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD3D0; &#xC554;, &#xB1CC; &#xC554;, &#xACE8; &#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0;&#xB294; transcritional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; (PDEF, H2AFO, NUCKS) &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xD1B5;&#xB85C; (PSMD7, SQSTM1, FLJ10111)&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xC18C; 6 &#xBA64;&#xBC84;&#xAC00; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD55C; Mrna&#xC758; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; RT-PCR &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; coexpression&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; coexpressed &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC758; &#xD655;&#xC778;.

Sintetizamos un conjunto de datos de expresi&oacute;n de gene grande usando dbEST y UniGene. Utilizamos la culpabilidad por asociaci&oacute;n (GBA) para analizar este conjunto de datos e identificar genes coexpressed. Un m&oacute;dulo, o grupo de genes, fue encontrado para ser coexpressed principalmente en tejido extra&iacute;do de mama y ovario, pero tambi&eacute;n se encuentra en el tejido de los c&aacute;nceres de pulm&oacute;n, c&aacute;ncer de cerebro y m&eacute;dula &oacute;sea. Este m&oacute;dulo contiene a por lo menos seis miembros que se creen que est&aacute;n implicados en la regulaci&oacute;n de la transcritional (PDEF, H2AFO, NUCKS) o la ubiquitina proteasoma v&iacute;a (PSMD7, SQSTM1, FLJ10111). Confirmamos estas observaciones de coexpresi&oacute;n por an&aacute;lisis de RT-PCR en tiempo real de mRNA extra&iacute;do de cuatro l&iacute;neas de c&eacute;lulas epiteliales de mama modelo.

Identificaci&oacute;n y confirmaci&oacute;n de un m&oacute;dulo de genes coexpressed.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5EFA;&#x6210;&#x5355;&#x4E00;&#x8D28;&#x7C92;-&#x3001; Tc1 &#x6837;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x57FA;&#x4E8E;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6240;&#x8C13;&#x7684;&#x767D;&#x9A6C;&#x738B;&#x5B50;&#x77E2;&#x91CF; (pPC)&#x3002;PPC &#x77E2;&#x91CF;&#x5EFA;&#x6210;&#x7ED3;&#x624E;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9A71;&#x52A8;&quot;&#x7761;&#x7F8E;&#x4EBA;&quot;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0B;&#x6E38;&#x5230; Tc1 &#x6837;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x5012;&#x7ACB;&#x91CD;&#x590D; (IR) &#x5143;&#x7D20;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x63D2;&#x5165;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x5408;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5242; &#xFF08;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF09; &#x4EE5;&#x53CA;&#x591A;&#x4E2A;&#x514B;&#x9686;&#x7F51;&#x7AD9; (MCS)&#x3001; polyadenylation &#x4FE1;&#x53F7;&#x548C; SV40 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9A71;&#x52A8;&#x65B0;&#x9709;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4FA7;&#x662F;&#x7EA2;&#x5916;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5730;&#x70B9;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30; pPC &#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5230; pPC &#x77E2;&#x91CF;&#x5728; MCS &#x514B;&#x9686; (RFP) &#x7EA2;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528; Effectene &#x7684; pPC RFP &#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4EBA; TE85 &#x9AA8;&#x8089;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x8868;&#x8FBE; RFP &#x5165;&#x9009; G418 &#x786B;&#x9178;&#x548C;&#x4E2A;&#x522B;&#x514B;&#x9686;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;4 &#x5468;&#x540E;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x5206;&#x79BB;&#x53CA;&#x6269;&#x589E;&#xFF0C;99%&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x9009;&#x5B9A;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x514B;&#x9686;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A; RFP &#x5F3A;&#x70C8;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x804C;&#x4E1A;&#x4E86;&#x7136;&#x540E;&#x4FDD;&#x6301;&#x5B58;&#x5728;&#x6216;&#x7F3A;&#x5E2D; G418 &#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x88AB;&#x5468;&#x520A; passaged&#x3002;&#x751A;&#x81F3;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684; G418 &#x7F3A;&#x5E2D; 6 &#x4E2A;&#x6708;&#x786B;&#x9178;&#x540E;&#xFF0C;&#x5927;&#x7EA6; 90%&#x7684;&#x4E2D;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4ECD;&#x4FDD;&#x6301;&#x5F3A;&#x70C8;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; RFP&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x4E86;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x514B;&#x9686;&#x514B;&#x9686;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8981;&#x6C42;&#x4E0D;&#x65AD;&#x9009;&#x62E9;&#x538B;&#x529B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92;-&#x3001; Tc1 &#x6837;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x57FA;&#x4E8E;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8F7D;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x6210;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x3002;

&#x4E00;&#x4EE3;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x7684; Tc1 &#x6837;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x7761;&#x7F8E;&#x4EBA;&#x57FA;&#x4E8E;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8D28;&#x7C92;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x6784;&#x5EFA;&#x3002;

We have constructed a single plasmid-, Tc1-like transposon-based gene transfer vector, termed the Prince Charming vector (pPC). The pPC vector was constructed by ligating the CMV-driven "Sleeping Beauty" transposase gene downstream to the Tc1-like transposon inverted repeat (IR) elements and by inserting the RSV promoter (to drive expression of the gene-of-interest) along with a multiple cloning site (MCS), a polyadenylation signal, and the SV40 promoter-driven neomycin gene, at a site flanked by the transposon IR elements. To assess the utility of the pPC vector, we cloned a red fluorescent protein (RFP) gene into the pPC vector at the MCS and transfected human TE85 osteosarcoma cells with the pPC-RFP expression vector using Effectene. Stable transgenic cell clones expressing RFP were selected with G418 sulfate and individual clones were isolated. After 4 weeks of clonal isolation and expansion, 99% of cells in each randomly selected clone expressed RFP strongly. Aliquots of each clone were then maintained in either the presence or the absence of G418 sulfate and were passaged weekly. Even after 6 months in culture in the absence of G418 sulfate, approximately 90% of the cells in each clone still maintained a strong expression level of RFP, indicating that these transgenic cell clones were stable and that the clonal stability of these clones did not require a constant selection pressure. In conclusion, we have developed a single plasmid-, Tc1-like transposon-based gene transfer vector that can be used to generate stable transgenic mammalian cell clones.

Construction of a Tc1-like transposon Sleeping Beauty-based gene transfer plasmid vector for generation of stable transgenic mammalian cell clones.

Nous avons construit un plasmide unique-, vecteur de transfert de g&egrave;ne bas&eacute;e sur transposon Tc1, appel&eacute; le vecteur de Prince charmant (pPC). Le vecteur de la pPC a &eacute;t&eacute; construit en ligaturant le g&egrave;ne de la transposase ax&eacute;e sur le CMV &laquo; Sleeping Beauty &raquo; en aval aux &eacute;l&eacute;ments transposon Tc1 ressemblant invers&eacute;e r&eacute;p&eacute;t&eacute;es (IR) et en ins&eacute;rant le promoteur de la RSV (&agrave; l&#39;expression de la voiture du g&egrave;ne d&#39;int&eacute;r&ecirc;t) ainsi qu&#39;un site multiple de clonage (MCS) et un signal de polyad&eacute;nylation du g&egrave;ne de n&eacute;omycine ax&eacute;e sur le promoteur SV40, sur un site bord&eacute; par les &eacute;l&eacute;ments de transposon IR. Pour &eacute;valuer l&#39;utilit&eacute; du vecteur pPC, nous avons clon&eacute; un g&egrave;ne de la prot&eacute;ine fluorescente rouge (DP) dans le vecteur de pPC &agrave; la STM et transfected des cellules d&#39;ost&eacute;osarcome TE85 humaines avec le vecteur d&#39;expression de pPC &agrave; la DP &agrave; l&#39;aide de Effectene. Clones stable de cellules transg&eacute;niques exprimant la DP ont &eacute;t&eacute; s&eacute;lectionn&eacute;s avec G418 sulfate et les clones ont &eacute;t&eacute; isol&eacute;s. Apr&egrave;s 4 semaines d&#39;isolement clonale et expansion, 99 % des cellules dans chaque clone choisi au hasard ont exprim&eacute; fortement DP. Aliquotes de chaque clone ont &eacute;t&eacute; ensuite maintenu en pr&eacute;sence ou en l&#39;absence de sulfate G418 et ont &eacute;t&eacute; repiqu&eacute;es par semaine. M&ecirc;me apr&egrave;s que 6 mois de culture en l&#39;absence de G418 sulfate, environ 90 % des cellules dans chaque clone toujours maintenu une forte expression de DP, ce qui indique que ces clones de cellules transg&eacute;niques sont stables et que la stabilit&eacute; clonale de ces clones n&#39;exigeait pas une pression de s&eacute;lection constante. En conclusion, nous avons d&eacute;velopp&eacute; un seul plasmide-, vecteur de transfert de g&egrave;ne bas&eacute;e sur transposon Tc1 qui peut servir &agrave; g&eacute;n&eacute;rer des clones de cellules de mammif&egrave;re transg&eacute;nique stable.

Construction d&#39;un vecteur plasmidique transposon g&eacute;n&eacute;tique ax&eacute;e sur la belle au bois dormant transfert de Tc1-comme pour la production de clones de cellules de mammif&egrave;re transg&eacute;nique stable.

Bau eines Tc1 Transposon-&#xE4;hnliche Dornr&#xF6;schen-basierte Gentransfer-Vektor-Plasmid zur Generierung von stabilen transgenen S&#xE4;ugetier-Zell-Klone.

Noi abbiamo costruito un plasmide - singolo, vettore di trasferimento Tc1-like basata su trasposone gene, chiamato il vettore di principe azzurro (pPC). Il vettore di pPC &egrave; stato costruito da legare il gene ha CMV-driven &quot;addormentata&quot; a valle agli elementi Tc1-come trasposizione invertita ripetizioni (IR) e inserendo il promotore RSV (di espressione del gene di interesse di unit&agrave;) e un sito di clonazione multipla (MCS), un segnale di poliadenilazione e il gene promotore-driven neomicina SV40, presso un sito affiancato da elementi trasposone IR. Per valutare l&#39;utilit&agrave; del vettore pPC, abbiamo clonato un gene proteina fluorescente rossa (RFP) nel vettore pPC presso la MCS e transfected le cellule di osteosarcoma umano TE85 con il vettore di espressione pPC-RFP utilizzando Effectene. Cloni di cellule transgeniche stabili esprimendo RFP sono stati selezionati con il G418 solfato e singoli cloni sono stati isolati. Dopo 4 settimane di isolamento clonale e di espansione, il 99% delle cellule in ogni clone selezionato casualmente espresso fortemente RFP. Aliquote di ogni clone sono stati poi mantenuti in presenza o assenza di solfato G418 ed erano attraversate settimanale. Anche dopo 6 mesi in coltura in assenza di G418 solfato, circa il 90% delle cellule in ogni clone ancora mantenuto un livello di espressione forte di RFP, indicando che questi cloni delle cellule transgeniche erano stabili e che non richiedono una pressione costante selezione clonale stabilit&agrave; di questi cloni. In conclusione, abbiamo sviluppato un plasmide - singolo, vettore di trasferimento Tc1-like basata su trasposone gene che pu&ograve; essere utilizzato per generare cloni delle cellule di mammiferi transgenici stabile.

Costruzione di un vettore del plasmide Tc1-come trasposone Sleeping Beauty-based gene trasferimento per la generazione di cloni delle cellule di mammiferi transgenici stabile.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;-&#x3001;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E3;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &#xFF08;pPC &#x306E;&#xFF09; &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;Tc1 &#x69D8;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;.PPC &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B; CMV &#x99C6;&#x52D5;&#x300C;&#x7720;&#x308C;&#x308B;&#x7F8E;&#x5973;&#x300D;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30B6;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4E0B;&#x6D41;&#x5012;&#x7ACB; Tc1 &#x69D8;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3; &#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8; (IR) &#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3; IR &#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E26;&#x3076;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x591A;&#x91CD;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (MCS)&#x3001;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; SV40 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x99C6;&#x52D5;&#x30CD;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B; RSV &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;&#x8208;&#x5473;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;) &#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5EFA;&#x8A2D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PPC &#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;pPC &#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3001;MCS &#x306B;&#x8D64;&#x8272;&#x3051;&#x3044;&#x5149;&#x305F;&#x3093;&#x3071;&#x304F;&#x8CEA; (RFP) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x9AA8;&#x8089;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A; TE85 Effectene &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; pPC RFP &#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RFP &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3; G418 &#x786B;&#x9178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x62E1;&#x5927;&#x306E; 4 &#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x3001;99 &#xFF05; &#x5404;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; RFP &#x3092;&#x5F37;&#x304F;&#x8868;&#x660E;&#x3002;&#x5404;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x56E0;&#x6570;&#x3044;&#x305F;&#x5B58;&#x5728;&#x307E;&#x305F;&#x306F; G418 &#x786B;&#x9178;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x6BCE;&#x9031;&#x7D99;&#x4EE3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;6 &#x30F6;&#x6708;&#x6587;&#x5316; G418 &#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x786B;&#x9178;&#x5F8C;&#x3001;&#x5404;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D04; 90% &#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x5727;&#x529B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;RFP &#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x4ECA;&#x56DE;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x5358;&#x4E00;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;-&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; Tc1 &#x69D8;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3002;

Tc1 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7720;&#x308C;&#x308B;&#x68EE;&#x306E;&#x7F8E;&#x5973;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x5EFA;&#x8A2D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;-, &#xCC60; &#xBC0D; &#xC655;&#xC790; &#xBCA1;&#xD130; (pPC) &#xB418; &#xB098; transposon &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Tc1 &#xAC19;&#xC740; &#xC804;&#xC1A1; &#xBCA1;&#xD130; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PPC &#xBCA1;&#xD130; CMV &#xAD6C;&#xB3D9; &quot;&#xC7A0;&#xC790;&#xB294; &#xBBF8;&#xB140;&quot; transposase &#xC720;&#xC804;&#xC790; Tc1 &#xAC19;&#xC740; transposon &#xAC70;&#xAFB8;&#xB85C; &#xBC18;&#xBCF5; (IR) &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; ligating &#xBC0F; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; transposon IR &#xC694;&#xC18C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (MCS), polyadenylation &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; SV40 &#xBAA8;&#xD130; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB124;&#xC624; &#xB9C8;&#xC774; &#xC2E0; &#xC9C4; RSV &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (&#xAD00;&#xC2EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;)&#xB97C; &#xC0BD;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC74;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. PPC &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC; MCS&#xC5D0; pPC &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xBE68;&#xAC04;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (RFP) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; Effectene&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; pPC RFP &#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; TE85 &#xB2E4;&#xB9AC; &#xC140; &#xD398;. RFP&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860; G418 &#xD669;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC120;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xD074;&#xB860; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB860; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xD655;&#xC7A5;&#xC758; 4 &#xC8FC; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC784;&#xC758;&#xB85C; &#xC120;&#xD0DD; &#xB41C; &#xAC01; &#xBCF5;&#xC81C;&#xBCF8;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; 99% &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; RFP&#xB97C; &#xD45C;&#xD604;. Aliquots &#xAC01; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; &#xBD80;&#xC7AC; G418 &#xD669;&#xC0B0;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9E4;&#xC8FC; passaged &#xD588;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4;. G418 &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xD654; 6 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xD669;&#xC0B0;, &#xD6C4;&#xC5D0; &#xAC01; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xC57D; 90%&#xB294; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; RFP, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860;&#xC740; &#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD074;&#xB860; &#xD074;&#xB860; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC77C;&#xC815; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xC555;&#xB825;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAC15;&#xD55C; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900; &#xC720;&#xC9C0;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB2E8;&#xC77C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;-, &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; transposon &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Tc1 &#xAC19;&#xC740; &#xC804;&#xC1A1; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Tc1 &#xAC19;&#xC740; transposon &#xC7A0;&#xC790;&#xB294; &#xBBF8;&#xB140; &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xAC74;&#xC124;.

Hemos construido un &uacute;nico pl&aacute;smido, vector de transferencia Tc1-como basadas en el transposon gen, denominado el vector de pr&iacute;ncipe (pPC). El vector de pPC fue construido por ligar el gene de transposasa basadas en CMV &quot;durmiente&quot; aguas abajo a los elementos de (IR) repetici&oacute;n de transposones Tc1-como invertida y metiendo el promotor de RSV (a la expresi&oacute;n de la unidad del gen de inter&eacute;s) junto con un sitio de clonaci&oacute;n m&uacute;ltiple (MCS), una se&ntilde;al de poliadenilaci&oacute;n y el gen de neomicina basadas en promotor de SV40, en un sitio flanqueado por los elementos del transposon IR. Para evaluar la utilidad del vector pPC, hemos clonado un gen de la prote&iacute;na fluorescente rojo (RFP) en el vector de la pPC en los MCS y transfected c&eacute;lulas de osteosarcoma TE85 humanas con el vector de expresi&oacute;n pPC-RFP utilizando Effectene. Se seleccionaron clones de c&eacute;lulas transg&eacute;nicas estable expresando RFP con sulfato de G418 y copias individuales fueron aisladas. Despu&eacute;s de 4 semanas de aislamiento clonal y expansi&oacute;n, 99% de las c&eacute;lulas en cada clon seleccionado al azar expres&oacute; RFP fuertemente. Al&iacute;cuotas de cada clon fueron mantienen en la presencia o la ausencia de G418 sulfato y fueron pasados semanalmente. Incluso despu&eacute;s de 6 meses en la cultura en la ausencia de G418 sulfato, aproximadamente el 90% de las c&eacute;lulas en cada clon mantiene un nivel de expresi&oacute;n fuerte de RFP, indicando que estos clones de c&eacute;lulas transg&eacute;nicas eran estables y que la estabilidad clonal de estos clones no requieren una presi&oacute;n constante de la selecci&oacute;n. En conclusi&oacute;n, hemos desarrollado un &uacute;nico pl&aacute;smido, vector de transferencia Tc1-como basadas en el transposon gene que puede usarse para generar clones de c&eacute;lulas de mam&iacute;fero transg&eacute;nico estable.

Construcci&oacute;n de un vector pl&aacute;smido de Tc1-como transposon gene basadas en durmiente transferencia para generaci&oacute;n de clones de c&eacute;lulas de mam&iacute;fero transg&eacute;nico estable.

p62 &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x80DE;&#x6D46;&#x86CB;&#x767D;&#x80FD;&#x591F;&#x4E0A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6CDB;&#x7D20;&#x548C;&#x591A;&#x79CD;&#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x4E00;&#x79CD;&#x7BA1;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FDE;&#x63A5;&#x5230;&#x6CDB;&#x7D20;-&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x6CA1;&#x6709;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x94FE;&#x63A5; p62 &#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x75C5;&#x7406;&#x7684;&#x56FD;&#x5BB6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C55;&#x793A; p62 &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6076;&#x6027;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E0E;&#x6B63;&#x5E38;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FC7;&#x5269;&#x3002;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x589E;&#x52A0; p62 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x67D3; p62 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x6D3E;&#x751F; Ets &#x56E0;&#x5B50; (PDEF) mRNA &#x76F8;&#x6BD4;&#x6B63;&#x5E38;&#x4E73;&#x817A;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x53EA;&#x6709; PSA &#x548C; maspin &#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x5DF2;&#x4E3A;&#x6B64;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; PDEF &#x523A;&#x6FC0; p62 &#x63A8;&#x9500;&#x5546;&#x901A;&#x8FC7;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F85;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50; pgc-1&#x3002;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x7684;&#x5F85;&#x9047;&#x5E9F;&#x9664; p62 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; PDEF &#x523A;&#x6FC0;&#x589E;&#x52A0; 50%&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x591A;&#x4E2A;&#x673A;&#x5236;&#x8BF1;&#x5BFC; p62 &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; &#xFF08;1&#xFF09; p62 &#x86CB;&#x767D;&#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C; &#xFF1B;(2) p62 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x589E;&#x52A0;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027; &#xFF1B; &#x6CA1;&#x6709;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;(3) PDEF &#x4E0A;&#x8C03; p62 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x901A;&#x8FC7;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9; &#xFF1B;&#x548C; &#xFF08;4&#xFF09; &#x9632;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC; PDEF p62 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;

p62 &#x4E73;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x524D;&#x5217;&#x817A; Ets &#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

p62 is a multifunctional cytoplasmic protein able to noncovalently bind ubiquitin and several signaling proteins, suggesting a regulatory role connected to the ubiquitin-proteasome pathway. No studies to date have linked p62 protein expression with pathological states. Here we demonstrate the overabundance of p62 protein in malignant breast tissue relative to normal breast tissue. The proteasome inhibitor PSI increased p62 mRNA and protein; however, PSI treatment of breast epithelial cells transfected with the p62 promoter did not affect promoter activity. High levels of prostate-derived Ets factor (PDEF) mRNA have been identified in breast cancer compared to normal breast. Only the PSA and maspin promoters have been identified as targets of this transcription factor. Here we show that PDEF stimulates the p62 promoter through at least two sites, and likely acts as a coactivator. PSI treatment abrogates the PDEF-stimulated increase of p62 promoter activity by 50%. Thus, multiple mechanisms for the induction of p62 exist. We conclude that (1) p62 protein is overexpressed in breast cancer; (2) p62 mRNA and protein increase in response to PSI, with no change of basal promoter activity; (3) PDEF upregulates p62 promoter activity through at least two sites; and (4) PSI downregulates PDEF-induced p62 promoter activation through one of these sites.

p62 overexpression in breast tumors and regulation by prostate-derived Ets factor in breast cancer cells.

p62 est une prot&eacute;ine cytoplasmique multifonctionnelle capable de se lier non covalente ubiquitine et plusieurs prot&eacute;ines de signalisation, ce qui sugg&egrave;re un r&ocirc;le r&eacute;glementaire reli&eacute; &agrave; la voie ubiquitine-prot&eacute;asome. Aucune &eacute;tude &agrave; ce jour n&#39;ont li&eacute; expression de la prot&eacute;ine p62 avec &eacute;tats pathologiques. Ici, nous d&eacute;montrons la surabondance de la prot&eacute;ine p62 dans le tissu mammaire maligne par rapport au tissu mammaire normal. L&#39;inhibiteur du prot&eacute;asome PSI a augment&eacute; p62 ARNm et prot&eacute;ines ; Cependant, traitement PSI des cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires transfect&eacute;es avec le promoteur p62 n&#39;affecte pas l&#39;activit&eacute; du promoteur. Des niveaux &eacute;lev&eacute;s de d&eacute;riv&eacute;s de la prostate Ets facteur l&#39;ARNm (PDEF) ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es dans le cancer du sein par rapport au sein normal. Seuls les promoteurs des PSA et maspin ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s comme cibles de ce facteur de transcription. Ici, nous montrons que PDEF stimule le promoteur p62 au moins deux sites et probablement agit comme un co-activateur. Traitement de PSI abroge l&#39;augmentation stimul&eacute;e par le PDEF p62 activit&eacute; de promoteur de 50 %. Ainsi, il existe plusieurs m&eacute;canismes pour l&#39;induction de la p62. Nous concluons que (1) prot&eacute;ine p62 est surexprim&eacute;e dans le cancer du sein ; (2) p62 augmentation de l&#39;ARNm et de prot&eacute;ines en r&eacute;ponse &agrave; PSI, sans variation de l&#39;activit&eacute; du promoteur basal ; (3) PDEF active p62 activit&eacute; promotrice au moins deux sites ; et (4) lb/po2 entra&icirc;ne activation promoteur p62 PDEF-induite par le biais de l&#39;un de ces sites.

p62 surexpression dans les tumeurs du sein et de la r&eacute;glementation par facteur Ets de la prostate dans les cellules canc&eacute;reuses du sein.

p62-&#xDC;berexpression in Brusttumoren und Regulierung von Prostata-Faktor abgeleitet Ets in Brustkrebszellen.

P62 &egrave; una proteina citoplasmatica multifunzionale in grado di associare noncovalently ubiquitina e diverse proteine di segnalazione, suggerendo un ruolo normativo collegato al pathway ubiquitina-proteasoma. No gli studi fino ad oggi hanno legato p62 l&#39;espressione della proteina con stati patologici. Qui dimostriamo la sovrabbondanza di proteine p62 nel tessuto mammario maligno rispetto al tessuto mammario normale. L&#39;inibitore del proteasoma PSI aumentato p62 mRNA e proteina; Tuttavia, trattamento PSI delle cellule epiteliali del seno transfected con il promotore p62 non influenzava le attivit&agrave; del promotore. Alti livelli di Ets prostata derivati fattore mRNA (PDEF) sono state identificate nel cancro della mammella rispetto alla normale del seno. Solo i promotori PSA e maspin sono stati identificati come obiettivi di questo fattore di trascrizione. Qui vi mostriamo PDEF stimola il promotore p62 attraverso almeno due siti che probabilmente agisce come un coactivator. Trattamento PSI abroga l&#39;aumento dell&#39;attivit&agrave; di promotore p62 PDEF stimolato da 50%. Cos&igrave;, esistono meccanismi multipli per l&#39;induzione di p62. Possiamo concludere che la proteina p62 (1) &egrave; overexpressed nel cancro al seno; (2) aumento di mRNA e proteina p62 in risposta al PSI, con nessun cambiamento dell&#39;attivit&agrave; del promotore basale; (3) PDEF sopraregola le p62 promotore attivit&agrave; attraverso almeno due siti; e (4) PSI sottoregola attivazione promotore p62 PDEF-indotta attraverso uno di questi siti.

P62 sovraespressione in tumori al seno e regolamento di prostata-derived factor Ets in cellule di cancro al seno.

p62 &#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x975E;&#x5171;&#x6709;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;-&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P62 &#x86CB;&#x767D;&#x767A;&#x73FE;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x65E5;&#x4ED8;&#x306B;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053; p62 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x6B63;&#x5E38;&#x4E73;&#x623F;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x60AA;&#x6027;&#x80F8;&#x306E;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x904E;&#x591A;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; PSI p62 mRNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;PSI &#x6CBB;&#x7642; p62 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; Ets &#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x7531;&#x6765;&#x56E0;&#x5B50; (PDEF) mRNA &#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6B63;&#x5E38;&#x4E73;&#x623F;&#x306B;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PSA &#x3068; maspin &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067; PDEF &#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; p62 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304A;&#x305D;&#x308C;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x884C;&#x70BA;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PSI &#x6CBB;&#x7642; PDEF &#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x5897;&#x52A0; p62 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E; 50% &#x3092;&#x8B70;&#x6C7A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;p62 &#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;(1) p62 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x3067;&#x904E;&#x5270;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x7D50;&#x8AD6;;(p62 2) &#x306E; mRNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066; PSI&#x3001;&#x57FA;&#x5E95;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x306F;;(3) PDEF &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; p62 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;;(4) PSI PDEF &#x8A98;&#x8D77; p62 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3002;

p62 &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x4E73;&#x623F;&#x816B;&#x760D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x7531;&#x6765; Ets &#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x3002;

p62 &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; noncovalently &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xADDC;&#xC81C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;-&#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;. &#xB0A0;&#xC9DC; &#xC5C6;&#xC74C; &#xC5F0;&#xAD6C; p62 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC720; &#xBC29; &#xC870;&#xC9C1; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC545;&#xC131; &#xC720; &#xBC29; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; p62 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACFC;&#xC789;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; PSI &#xC99D;&#xAC00; p62 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, p62 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; PSI &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Ets &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC694;&#xC18C; (PDEF) Mrna&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18; &#xC720;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CC; PSA&#xC640; maspin &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC774; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PDEF &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; p62 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558; &#xACE0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB294; coactivator &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PSI &#xCE58;&#xB8CC; 50 %p62 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; PDEF &#xC790;&#xADF9; &#xC99D;&#xAC00; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB294;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, p62 &#xC720;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC774; &#xC874;&#xC7AC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; (1) p62 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;;&#xC5D0; overexpressed &#xACB0;&#xB860; (&#xAE30;&#xC800; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;; &#xBCC0;&#xD654; &#xC5C6;&#xC774; PSI&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; 2) p62 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC99D;&#xAC00; (3) PDEF upregulates p62 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD1B5;&#xD574; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; (4) PSI downregulates &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; PDEF&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; p62 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

&#xC720; &#xBC29; &#xC885;&#xC591; &#xBC0F; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC720;&#xB798; Ets &#xC778;&#xC790;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; p62 overexpression.

P62 es una prote&iacute;na citopl&aacute;smica multifuncional capaz de enlazar subunidades ubiquitina y varias prote&iacute;nas de se&ntilde;alizaci&oacute;n, sugiriendo un papel regulador conectado a la v&iacute;a ubiquitina-proteasoma. Ning&uacute;n estudio hasta la fecha ha relacionado la expresi&oacute;n de la prote&iacute;na p62 con estados patol&oacute;gicos. Aqu&iacute; demostramos la sobreabundancia de la prote&iacute;na p62 en el tejido mamario maligno en relaci&oacute;n con el tejido mamario normal. El inhibidor de la proteasoma PSI aument&oacute; p62 mRNA y prote&iacute;na; sin embargo, tratamiento PSI de c&eacute;lulas epiteliales de mama transfectadas con el promotor de p62 no afect&oacute; la actividad del promotor. Altos niveles de Ets derivados de pr&oacute;stata factor mRNA (PDEF) se han identificado en el c&aacute;ncer de mama en comparaci&oacute;n con mama normal. S&oacute;lo los PSA y maspin promotores han sido identificados como objetivos de este factor de transcripci&oacute;n. Aqu&iacute; mostramos que PDEF estimula el promotor p62 a trav&eacute;s de al menos dos sitios y probablemente act&uacute;a como un coactivador. Tratamiento PSI abroga PDEF-estimulado incremento de la actividad del promotor de p62 en un 50%. As&iacute;, existen m&uacute;ltiples mecanismos para la inducci&oacute;n de p62. Concluimos que (1) prote&iacute;na p62 se sobreexpresa en c&aacute;ncer de mama; (2) p62 mRNA y prote&iacute;na incremento en respuesta a PSI, sin cambio de la actividad basal del promotor; (3) Actividad de promotor de p62 PDEF estimula a trav&eacute;s de al menos dos sitios; y (4) PSI algo p62 PDEF inducida por activaci&oacute;n de promotor a trav&eacute;s de uno de estos sitios.

P62 sobreexpresi&oacute;n en tumores de mama y la regulaci&oacute;n por factor derivado de pr&oacute;stata de Ets en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama.

&#x52C3;&#x8D77;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D; (ED) &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5171;&#x540C;&#x548C;&#x8870;&#x5F31;&#x5F71;&#x54CD;&#x8FBE; 75%&#x7684;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x523A;&#x6FC0;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x5B89;&#x88C5;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x5BFC;&#x81F4; ED &#x548C;&#x6270;&#x4E71;&#x58F0;&#x6CE2;&#x523A;&#x732C; (Shh) &#x5C42;&#x53E0;&#x7684;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x5618;&#x5176;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6307;&#x6807;&#x5728;&#x9634;&#x830E;&#x53D1;&#x80B2;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x8BED;&#x6599;&#x5E93;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x5F62;&#x6001;&#x53CA;&#x8C03;&#x8282;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x3002;Shh &#x5C42;&#x53E0;&#x7684;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8BED;&#x6599;&#x5E93;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x5F62;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4; ED&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x662F;&#x9634;&#x830E;&#x7684;&#x5728;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x75C5;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53; ed.&#x4E2D;&#x65AD;&#x5728; Shh &#x5C42;&#x53E0;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5;&#x9634;&#x830E;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x53D8;&#x5316;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6539;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x51CB;&#x4EA1;&#x53CA;&#x6EB4;&#x8131;&#x6C27;&#x5C3F;&#x7519;&#x5217;&#x5165; BB/&#x7A9D;&#x5927;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3002;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x9E7F;&#x97AD;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x9000;&#x5316;&#x966A;&#x540C;&#x6DF1;&#x523B;&#x6559;&#x80B2;&#x7F72;&#x3001; &#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11; Shh &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#xFF0C;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x9634;&#x830E; Shh RNA &#x8868;&#x8FBE;&#x5B8C;&#x6574;&#x9634;&#x830E; &#xFF08;&#x795E;&#x7ECF;&#x3001; &#x8BED;&#x6599;&#x5E93;&#x548C;&#x5C3F;&#x9053;&#xFF09; &#x4E2D;&#x3002;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C; Shh &#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E5F;&#x53D7;&#x5230;&#x5E72;&#x6270;&#x5728;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1; Shh &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x6DF1;&#x5165;&#x89C1;&#x89E3;&#x6539;&#x5584;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x9633;&#x75FF;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;

&#x6539;&#x53D8;&#x58F0;&#x6CE2;&#x523A;&#x732C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x4E0E;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x5F02;&#x5E38;&#x7684; BB/&#x7A9D;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x5927;&#x9F20;&#x9634;&#x830E;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

Erectile dysfunction (ED) is a common and debilitating pathological development that affects up to 75% of diabetic males. Neural stimulation is a crucial aspect of the normal erection process. Nerve injury causes ED and disrupts signaling of the Sonic hedgehog (Shh) cascade in the smooth muscle of the corpora cavernosa. Shh and targets of its signaling establish normal corpora cavernosal morphology during postnatal differentiation of the penis and regulate homeostasis in the adult. Interruption of the Shh cascade in the smooth muscle of the corpora cavernosa results in extensive changes in corpora cavernosal morphology that lead to ED. Our hypothesis is that the neuropathy observed in diabetics causes morphological changes in the corpora cavernosa of the penis that result in ED. Disruption of the Shh cascade may be involved in this process. We tested this hypothesis by examining morphological changes in the penis, altered gene and protein expression, apoptosis, and bromodeoxyuridine incorporation in the BB/WOR rat model of diabetes. Extensive smooth muscle and endothelial degradation was observed in the corpora cavernosa of diabetic penes. This degradation accompanied profound ED, significantly decreased Shh protein in the smooth muscle of the corpora cavernosa, and increased penile Shh RNA expression in the intact penis (nerves, corpora, and urethra). Localization and expression of Shh targets were also disrupted in the corpora cavernosa. Increasing our understanding of the molecular mechanisms that regulate Shh signaling may provide valuable insight into improving treatment options for diabetic impotence.

Altered Sonic hedgehog signaling is associated with morphological abnormalities in the penis of the BB/WOR diabetic rat.

La dysfonction &eacute;rectile (ED) est une commune et d&eacute;bilitante d&eacute;veloppement pathologique qui affecte jusqu&#39;&agrave; 75 % des hommes diab&eacute;tiques. Neurostimulation est un aspect crucial du processus de l&#39;&eacute;rection normale. L&eacute;sions du nerf provoque ED et perturbe la signalisation de la cascade de Sonic hedgehog (Shh) dans le muscle lisse du cavernosa de corpus. SHH et cibles de sa signalisation &eacute;tablissent la morphologie normale corpus caverneuse durant la diff&eacute;renciation post-natale du p&eacute;nis et r&eacute;gulent l&#39;hom&eacute;ostasie chez l&#39;adulte. Interruption de la cascade de Shh dans le muscle lisse du cavernosa de corpus se traduit par des changements importants dans la morphologie des corpus caverneuse qui conduisent &agrave; l&#39;ED. Notre hypoth&egrave;se est que la neuropathie observ&eacute;e chez les diab&eacute;tiques provoque des changements morphologiques dans les corps caverneux du p&eacute;nis que r&eacute;sultat ED. perturbation de la cascade de Shh peut-&ecirc;tre &ecirc;tre impliqu&eacute; dans ce processus. Nous avons test&eacute; cette hypoth&egrave;se en examinant les changements morphologiques dans le p&eacute;nis, alt&eacute;r&eacute; g&egrave;ne et expression de la prot&eacute;ine, l&#39;apoptose et bromod&eacute;oxyuridine incorporation dans le mod&egrave;le de rat BB/WOR du diab&egrave;te. Des muscles lisses et endoth&eacute;liale d&eacute;gradation a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e dans les corps caverneux de penes diab&eacute;tiques. Cette d&eacute;gradation accompagn&eacute; ED profond, significativement diminu&eacute; la prot&eacute;ine Shh dans le muscle lisse du cavernosa de corpus et a augment&eacute; l&#39;expression de Shh RNA du p&eacute;nis dans le p&eacute;nis intact (nerfs, corpus et l&#39;ur&egrave;tre). Localisation et expression de Shh cibles ont &eacute;t&eacute; &eacute;galement perturb&eacute;s dans les corps caverneux. Une meilleure compr&eacute;hension des m&eacute;canismes mol&eacute;culaires qui r&eacute;gissent la signalisation Shh peut fournir un aper&ccedil;u pr&eacute;cieux en vue d&#39;am&eacute;liorer les options de traitement pour l&#39;impuissance diab&eacute;tique.

Signalisation alt&eacute;r&eacute;e de Sonic hedgehog est associ&eacute;e &agrave; des anomalies morphologiques dans le p&eacute;nis du rat diab&eacute;tique BB/WOR.

Altered Sonic-Hedgehog-Signalisierung wird mit morphologischen Abnormit&#xE4;ten in den Penis des BB / WOR diabetischen Ratten assoziiert.

La disfunzione erettile (de) &egrave; un comune e debilitante sviluppo patologico che colpisce fino al 75% dei maschi diabetici. La stimolazione neurale &egrave; un aspetto cruciale del processo di erezione normale. Lesione del nervo provoca ED e sconvolge la segnalazione della cascata del Sonic hedgehog (Shh) nella muscolatura liscia del corpo cavernoso. SHH e gli obiettivi della sua segnalazione stabilire morfologia cavernosi normali corpora durante la differenziazione postnatale del pene e regolano l&#39;omeostasi nell&#39;adulto. Interruzione della cascata della Shh nella muscolatura liscia del corpo cavernoso si traduce in vasti cambiamenti nella morfologia di corpora cavernosi che portano a ED. La nostra ipotesi sono che la neuropatia osservato nei pazienti diabetici provoca cambiamenti morfologici nei corpi cavernosi del pene che risultato in ED. perturbazione della cascata della Shh pu&ograve; essere coinvolto in questo processo. Abbiamo testato questa ipotesi esaminando cambiamenti morfologici nel pene, alterato il gene e l&#39;espressione della proteina, l&#39;apoptosi e bromodeoxyuridine incorporazione nel modello di ratto BB/WOR del diabete. Ampio muscolo liscio e degrado endoteliale &egrave; stata osservata in cavernosi di penes diabetica. Questa degradazione accompagnato ED profondo, significativamente diminuito proteina Shh nella muscolatura liscia del corpo cavernoso e aumentata espressione di Shh RNA del pene del pene intatto (nervi, corpora e uretra). Localizzazione ed espressione di Shh obiettivi inoltre sono stati perturbati nei corpi cavernosi. Aumentare la nostra comprensione dei meccanismi molecolari che regolano Shh segnalazione pu&ograve; fornire informazioni preziose nel migliorare le opzioni di trattamento per l&#39;impotenza diabetica.

Alterata Sonic hedgehog signaling &egrave; associato con anomalie morfologiche del pene del ratto diabetico BB/WOR.

&#x52C3;&#x8D77;&#x4E0D;&#x5168; &#xFF08;ED&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x5171;&#x901A;&#x3068;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x306E; 75 &#xFF05; &#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x75C5;&#x7684;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x8870;&#x5F31;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x52C3;&#x8D77;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x640D;&#x50B7;&#x306F; ED &#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3057;&#x3001;&#x6D77;&#x7DBF;&#x4F53;&#x306E;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x97F3;&#x6CE2; hedgehog (Shh) &#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x3083;&#x3079;&#x308B;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x751F;&#x5F8C; 5900&#x4E07;&#x4E2D;&#x306B;&#x9670;&#x830E;&#x901A;&#x5E38;&#x30B3;&#x30FC;&#x30D1;&#x30B9; cavernosal &#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;&#x6D77;&#x7DBF;&#x4F53;&#x306E;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x306F;&#x30A8;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30B3;&#x30FC;&#x30D1;&#x30B9; cavernosal &#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306F;&#x3001;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x969C;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;Shh &#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x7DE8;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x6D77;&#x7DBF;&#x3067;&#x5F62;&#x614B;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E; BB/WOR &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30E2;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x5B9A;&#x6B3E;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x3084;&#x5185;&#x76AE;&#x52A3;&#x5316;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB;&#x30DA;&#x30CB;&#x30B9;&#x306E;&#x6D77;&#x7DBF;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306F;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A; ED &#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; Shh &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6D77;&#x7DBF;&#x4F53;&#x306F;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3001;(&#x795E;&#x7D4C;, &#x30B3;&#x30FC;&#x30D1;&#x30B9;, &#x3068;&#x5C3F;&#x9053;&#xFF09; &#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x9670;&#x830E;&#x9670;&#x830E;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067; RNA &#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5F0F;&#x3082;&#x6D77;&#x7DBF;&#x3067;&#x4E71;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E;&#x52C3;&#x8D77;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x80A2;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0; BB/WOR &#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBC1C;&#xAE30; &#xBD80;&#xC804; (ED)&#xC740; &#xACF5;&#xD1B5; &#xBC0F; &#xC1E0; &#xC57D;&#xD558;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB0A8;&#xC131;&#xC740; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC758; 75%&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC790;&#xADF9;&#xC740; &#xC815;&#xC0C1; &#xBC1C;&#xAE30; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB4DC; &#xC6D0;&#xC778;&#xACFC; corpora cavernosa&#xC758; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC18C;&#xB2C9; &#xB354; &#xD5E4;&#xC9C0;&#xD638;&#xADF8; (Shh) &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC26C;&#xC774; &#xC787;&#xC758; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xC131; &#xAE30;&#xC758; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; corpora cavernosal &#xD615;&#xD0DC; &#xC124;&#xC815; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778;&#xC5D0; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC870;&#xC808; &#xBC0F;. Corpora cavernosa&#xC758; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB4DC; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; corpora cavernosal &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC00;&#xC124;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7A5; &#xD574; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC26C; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; ed. &#xC911;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC74C; &#xACBD;&#xC758; corpora cavernosa&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC74C; &#xACBD;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xC815;, apoptosis, &#xBC0F; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC758; BB/WOR &#xC950; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; bromodeoxyuridine &#xC815; &#xAD00; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC;&#xACFC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC800;&#xD558; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; penes corpora cavernosa&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC800;&#xD558; &#xC2EC;&#xC624;&#xD55C;&#xC5D0; &#xB4DC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;, &#xD06C;&#xAC8C; &#xC26C; corpora cavernosa&#xC758; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; penile &#xC26C; RNA &#xC2DD; (&#xC2E0;&#xACBD;, &#xBAA8;&#xC74C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC694;&#xB3C4;) &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC74C; &#xACBD;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; &#xC26C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xB610;&#xD55C; corpora cavernosa &#xC911;&#xB2E8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xBC1C;&#xAE30; &#xBD80;&#xC804;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC635;&#xC158;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xC18C;&#xB2C9; &#xD5E4; &#xC9C0; &#xD638; &#xADF8;&#xB294; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; BB/WOR &#xB2F9;&#xB1E8; &#xC950;&#xC758; &#xC131; &#xAE30;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La disfunci&oacute;n er&eacute;ctil (ED) es com&uacute;n y debilitante desarrollo patol&oacute;gico que afecta hasta un 75% de los hombres diab&eacute;ticos. La estimulaci&oacute;n neural es un aspecto fundamental del proceso normal de la erecci&oacute;n. Lesi&oacute;n del nervio causa a ED e interrumpe la se&ntilde;alizaci&oacute;n de la cascada de Sonic hedgehog (Shh) en el m&uacute;sculo liso de los cuerpos cavernosos. SHH y objetivos de su se&ntilde;alizaci&oacute;n establecen morfolog&iacute;a de normal corpora cavernosa durante la diferenciaci&oacute;n postnatal del pene y regulan la homeostasis en el adulto. Interrupci&oacute;n de la cascada de Shh en el m&uacute;sculo liso de los cuerpos cavernosos da lugar a grandes cambios en la morfolog&iacute;a de corpora cavernosa que conducen a ED. Nuestra hip&oacute;tesis es que la neuropat&iacute;a observada en diab&eacute;ticos provoca cambios morfol&oacute;gicos en los cuerpos cavernosos del pene que dan como resultado ED. interrupci&oacute;n de la cascada de Shh puede estar involucrado en este proceso. Hemos probado esta hip&oacute;tesis examinando cambios morfol&oacute;gicos en el pene, alterado genes y expresi&oacute;n de la prote&iacute;na, apoptosis y bromodeoxiuridina incorporaci&oacute;n en el modelo de rata BB/WOR de la diabetes. Extensa del m&uacute;sculo liso y degradaci&oacute;n endotelial se observ&oacute; en los cuerpos cavernosos de penes diab&eacute;ticas. Esta degradaci&oacute;n hab&iacute;a acompa&ntilde;ado a ED profundo, significativamente disminuy&oacute; Shh prote&iacute;nas en el m&uacute;sculo liso de los cuerpos cavernosos y aument&oacute; el pene expresi&oacute;n de ARN de Shh en el pene intacto (nervios, Corpus y uretra). Localizaci&oacute;n y expresi&oacute;n de Shh objetivos tambi&eacute;n se interrumpen en los cuerpos cavernosos. Aumentar nuestra comprensi&oacute;n de los mecanismos moleculares que regulan la se&ntilde;alizaci&oacute;n Shh puede proporcionar informaci&oacute;n valiosa sobre mejorar las opciones de tratamiento para la impotencia diab&eacute;tica.

Alterado Sonic hedgehog se&ntilde;alizaci&oacute;n se asocia con anormalidades morfol&oacute;gicas en el pene de la rata diab&eacute;tica BB/WOR.

&#x76EE;&#x524D;&#x6B63;&#x5728;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x5411;&#x98DF;&#x7BA1;&#x817A;&#x764C;&#x7684;&#x764C;&#x524D;&#x5DF4;&#x96F7;&#x7279;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5316;&#x751F; (BM) &#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x591A;&#x80BD;&#x6FC0;&#x7D20;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4E13;&#x95E8;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; B/Akt (PKB/Akt&#xFF09; &#x6297;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x4F4E;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316; PKB/Akt &#x7684;&#x98DF;&#x7BA1;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x53EF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5916;&#x6E90;&#x9170;&#x80FA;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B; PKB/Akt &#x9AD8;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x6302;&#x94A9;&#xFF0C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x4E0E; 2 &#x578B;&#x80C6;&#x56CA;&#x6536;&#x7F29;&#x7D20; (CCK-2R) &#x53D7;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;CCK-2R &#x7684; variant &#x7C7B;&#x578B;&#x4E00;&#x6D3B;&#x52A8;&#x63A5;&#x5934;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53E6;&#x5916;&#x589E;&#x52A0; PKB/Akt &#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x5B83;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x884C;&#x4E8B;&#x4EE5;&#x81EA;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x65B9;&#x5F0F;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ECF;&#x56FD; 2R &#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x8868;&#x8FBE;&#x6FC0;&#x6D3B; PKB/Akt &#x548C;&#xFF0C;&#x548C; BM &#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x589E;&#x52A0;&#x7ECF;&#x56FD; 2R &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x53EF;&#x80FD;&#x63F4;&#x52A9;&#x901A;&#x8FC7;&#x6297;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6269;&#x589E; BM &#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5177;&#x4F53;&#x4E0A;&#x8C03; PKB/Akt &#x7684; BM &#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8FD9;&#x9879;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x548C;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;/CCK-2 &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x98DF;&#x7BA1;&#x7684;&#x6297;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Mechanisms by which premalignant Barrett's metaplasia (BM) progresses to esophageal adenocarcinoma are currently being sought. This study investigated the role played by the polypeptide hormone gastrin, specifically its antiapoptotic effects through activation of protein kinase B/Akt (PKB/Akt). In esophageal cell lines with low basal levels of activated PKB/Akt, phosphorylation could be induced by exogenous amidated gastrin. High basal levels of activated PKB/Akt were linked to endogenous gastrin expression and were reduced by treatment with a cholecystokinin-type 2 receptor (CCK-2R) antagonist. Expression of a constitutively active splice variant of the CCK-2R additionally increased basal activation of PKB/Akt. It is proposed that gastrin acting in an autocrine and endocrine manner via a CCK-2R isoform may activate PKB/Akt and that with expression of gastrin and CCK-2R isoforms increasing in BM samples, gastrin may aid progression of BM through amplification of antiapoptotic pathways. Evidence for this proposal was provided through the observed specific up-regulation of PKB/Akt in BM samples.

An antiapoptotic role for gastrin and the gastrin/CCK-2 receptor in Barrett's esophagus.

M&eacute;canismes de m&eacute;taplasie de laquelle Barrett pr&eacute;canc&eacute;reuses (BM) progresse vers un ad&eacute;nocarcinome oesophagien est actuellement recherch&eacute;s. Cette &eacute;tude examine le r&ocirc;le jou&eacute; par la gastrine hormone polypeptidique, plus pr&eacute;cis&eacute;ment ses effets anti-apoptotiques gr&acirc;ce &agrave; l&#39;activation de la prot&eacute;ine kinase B/Akt (PKB/Akt). Lign&eacute;es cellulaires oesophagienne ayant un faible niveau basal d&#39;activ&eacute;s PKB/Akt phosphorylation peut &ecirc;tre induite par la gastrine amid&eacute; exog&egrave;ne. Taux de base &eacute;lev&eacute; de PKB/Akt activ&eacute; &eacute;tait li&eacute;s &agrave; l&#39;expression de la gastrine endog&egrave;ne et ont &eacute;t&eacute; r&eacute;duites par un traitement avec un antagoniste des r&eacute;cepteurs (CCK-2R) chol&eacute;cystokinine-type 2. En outre, expression d&#39;une variante d&#39;&eacute;pissage constitutivement actif de la CCK-2R augment&eacute;e basale d&#39;activation de PKB/Akt. Il est propos&eacute; que la gastrine, agissant de mani&egrave;re endocrine via une isoforme de la CCK-2R et autocrine peut s&#39;activer PKB/Akt et qui avec l&#39;expression de la gastrine et CCK-2R isoformes augmentant dans les &eacute;chantillons de la BM, la gastrine pourrait favoriser la progression de la BM par amplification des voies anti-apoptotiques. Preuve de cette proposition &eacute;tait fournie par l&#39;observ&eacute;e sp&eacute;cifique r&eacute;gulation de PKB/Akt dans les &eacute;chantillons de la BM.

Un r&ocirc;le d&#39;anti-apoptotiques de la gastrine et du r&eacute;cepteur de la gastrine/CCK-2 dans le &oelig;sophage de Barrett.

Eine antiapoptotische Rolle f&#xFC;r Gastrin und der gastrin/CCK-2 Rezeptor im Barrett-&#xD6;sophagus.

Meccanismi di metaplasia di Barrett che precancerose (BM) progredisce per adenocarcinoma esofageo attualmente vengono ricercate. Questo studio ha studiato il ruolo svolto dalla gastrina ormone polipeptide, in particolare gli effetti antiapoptotici attraverso l&#39;attivazione della chinasi di proteina B/Akt (PKB/Akt). In linee cellulari esofagea con bassi livelli basali di PKB/Akt attivato, fosforilazione potrebbe essere indotta da gastrina amidati esogeno. Elevati livelli basali di PKB/Akt attivato erano legati all&#39;espressione di gastrina endogena e sono stati ridotti dal trattamento con un antagonista 2 di tipo colecistochinina (CCK-2R). L&#39;espressione di una variante di splice costitutivamente attivo di CCK-2R aumenta ulteriormente basale attivazione di Akt/PKB. Si propone che la gastrina che agisce in maniera endocrina tramite un&#39;isoforma CCK-2R e autocrino pu&ograve; attivare Akt/PKB e che con espressione di gastrina e CCK-2R isoforme aumentando nei campioni di BM, gastrina pu&ograve; essere di aiuto progressione della BM attraverso amplificazione delle vie antiapoptotici. Prove per questa proposta &egrave; stata fornita attraverso l&#39;osservato up-regolamento specifico di Akt/PKB nei campioni di BM.

Un ruolo antiapoptotici per gastrina e il gastrina/CCK-2 recettore nell&#39;esofago di Barrett.

&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x75C5;&#x5909;&#x30D0;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5316;&#x751F; (BM) &#x9032;&#x884C;&#x98DF;&#x9053;&#x817A;&#x764C;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x6C42;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; B/Akt &#xFF08;PKB/Akt) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6297;&#x52B9;&#x679C;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PKB/Akt &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x98DF;&#x9053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x5316;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x8A98;&#x8D77;&#x3067;&#x304D;&#x305F;.&#x9AD8;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027; PKB/Akt &#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x306F;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 2 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (CCK-2R) &#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6052;&#x5E38;&#x6D3B;&#x6027;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E; CCK 2R &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x57FA;&#x5E95;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; PKB/Akt &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x65B9;&#x6CD5; CCK 2R &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D4C;&#x7531;&#x3067;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; PKB/Akt &#x3068;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x5024;&#x306E;&#x5F0F;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059; CCK 2R &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; BM &#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; BM &#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x6297;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x3092;&#x63F4;&#x52A9;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x63D0;&#x6848;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x63D0;&#x6848;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; PKB/Akt BM &#x8A66;&#x6599;&#x4E2D;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6297;&#x5F79;&#x5272;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D0;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x98DF;&#x9053;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;/CCK-2 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3002;

&#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC5B4;&#xB290; premalignant &#xBC30; &#xB7FF;&#xC758; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xC120; &#xC554; metaplasia (BM)&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558; &#xC5EC; &#xD604;&#xC7AC; &#xCD94;&#xC801;&#xC744; &#xBC1B;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xC0AC; polypeptide &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; gastrin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; B/Akt (PKB/Akt)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; antiapoptotic &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAE30;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; PKB/Akt&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;, &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; exogenous amidated gastrin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; PKB/Akt&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xC0C1;&#xBD80; &#xC0DD; gastrin &#xC2DD; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB410;&#xB2E4; &#xACE0; cholecystokinin &#xD0C0;&#xC785; 2 (CCK-2R) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. CCK 2 &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xC758; constitutively &#xD65C;&#xC131; &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; variant&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xB610;&#xD55C; PKB/Akt&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC99D;&#xAC00;. Gastrin autocrine &#xBC0F; CCK-2R isoform &#xD1B5;&#xD574; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9; PKB/Akt&#xC640; &#xADF8; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; gastrin &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; CCK-2R isoforms BM &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0;, gastrin antiapoptotic &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD655;&#xB300;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; BM&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548;. &#xC774; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; PKB/Akt&#xC758; BM &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

Gastrin&#xACFC; &#xBC30; &#xB7FF;&#xC758; &#xC2DD;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; gastrin/CCK-2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; antiapoptotic &#xC5ED;&#xD560;.

Actualmente se buscan mecanismos por progresa de metaplasia (BM) de que Barrett premalignas adenocarcinoma del es&oacute;fago. Este estudio investig&oacute; el papel desempe&ntilde;ado por la hormona gastrina de polip&eacute;ptido, espec&iacute;ficamente sus efectos antiapopt&oacute;tico a trav&eacute;s de la activaci&oacute;n de la prote&iacute;na quinasa B/Akt (PKB/Akt). En l&iacute;neas de c&eacute;lulas del es&oacute;fago con bajos niveles basales de PKB/Akt activada, se pod&iacute;a inducir la fosforilaci&oacute;n por gastrina amidated ex&oacute;gena. Altos niveles basales de PKB/Akt activada se vincularon a la expresi&oacute;n de gastrina end&oacute;geno y fueron reducidos por el tratamiento con un antagonista de los receptores (CCK-2R) colecistoquinina-tipo 2. Expresi&oacute;n de una variante de empalme constitutivamente activa de la CCK-2R adem&aacute;s aument&oacute; la activaci&oacute;n basal de PKB/Akt. Se propone que actuando de una manera endocrino v&iacute;a una isoforma CCK-2R y autocrina de gastrina puede activar PKB/Akt y con expresi&oacute;n de gastrina y CCK-2R isoformas aumentando en muestras de BM, gastrina puede ayudar a progresi&oacute;n de BM a trav&eacute;s de la ampliaci&oacute;n de v&iacute;as antiapopt&oacute;tico. Evidencia de esta propuesta fue prove&iacute;do por medio de la observada para arriba-regulaci&oacute;n espec&iacute;fica de PKB/Akt en muestras de BM.

Un papel de antiapopt&oacute;ticos de gastrina y el receptor de gastrina/CCK-2 en el es&oacute;fago de Barrett.

&#x5C06;&#x7F16;&#x7801; zibra (&#x950C;&#x3001; &#x5728;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x65E0;&#x540D;&#x6307;&#x3001; &#x6CDB;&#x7D20;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x57DF;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x524D;&#x79F0;&#x4E3A; FLJ10111 &#x6216; RNF31 &#x7684;&#x5047;&#x60F3;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; mRNA &#x8868;&#x793A;&#x51E0;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3001; &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6216; zibra &#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; RNA &#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5FEB;&#x901F;&#x6269;&#x589E; cDNA &#x672B;&#x7AEF; &#xFF08;RLM-&#x79CD;&#x65CF;&#xFF09;&#xFF0C;&#x514B;&#x9686;&#x5168;&#x957F; zibra &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x65B0;&#x9896;&#x7684;&#x5916;&#x663E;&#x5B50;&#x3001; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A;&#x5305;&#x62EC; + 1 &#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x548C; 3 &#x4E2A;&#x526A;&#x63A5; zibra &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x3002;Zibra &#x86CB;&#x767D;&#x5305;&#x542B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x950C;&#x73AF;&#x624B;&#x6307;&#x56FE;&#x6848;&#x3001; &#x6CDB;&#x7D20;&#x76F8;&#x5173;&#x57DF;&#x548C;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x65E0;&#x540D;&#x6307;&#x7684;&#x57DF;&#xFF0C;&#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x6297;&#x4F53;&#x7684; zibra&#xFF0C;&#x5E76;&#x9996;&#x6B21;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x7684; zibra &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7814;&#x7A76;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5BF9; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A; 14 bp &#x5730;&#x533A;&#x57FA;&#x5E95;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x5143;&#x7D20;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728; zibra &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4E2D;&#x6709;&#x8BB8;&#x591A;&#x5171;&#x8BC6; Ets &#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x4ECE; Ets-1&#x3001; PDEF &#x6216;&#x8C4C;&#x8C46;-3/E1A-F.&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597; &#xFF08;PSI&#xFF09; &#x51CF;&#x5C11;&#x5230;&#x65E0;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; zibra &#x86CB;&#x767D;&#x540E; 8 h.Zibra &#x4ECD;&#x7136;&#x540E; 32 h&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x65E0;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x800C; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0D;&#x53D8;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;zibra &#x662F;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5047;&#x5B9A;&#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x5E38;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x6297;&#x539F;&#x3002;

Zibra &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3001; &#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

The mRNA that encodes zibra (zinc, in-between-ring finger, ubiquitin-associated domain), previously known as hypothetical protein FLJ10111, or RNF31 is expressed in several distinct cancers. Little is known about the genomic organization, expression, or regulation of zibra. Using RNA ligase-mediated rapid amplification of cDNA ends (RLM-RACE), we cloned the full-length zibra cDNA from a transformed breast cell line. We identified a novel exon, the 5' untranslated region including the +1 start site, and three alternatively spliced zibra transcripts. The zibra protein contains three zinc ring-finger motifs, an ubiquitin-associated domain, and an in-between-ring-finger domain, characteristic of ubiquitin ligases. We obtained an antibody to zibra and confirmed the presence of translated zibra protein for the first time. Promoter studies localized a core element responsible for basal activity to a 14-bp region in the 5' untranslated region. Although there are numerous consensus Ets factor binding sites in the zibra promoter, we found no affect on promoter activity from Ets-1, PDEF, or PEA-3/E1A-F. Treatment of cells with the proteasome inhibitor I (PSI) decreased zibra protein to an undetectable level after 8 h. Zibra remained undetectable even after 32 h, while mRNA levels remained essentially unchanged. In conclusion, zibra is a translationally regulated putative ubiquitin ligase that is frequently overexpressed in different forms of cancer.

Identification of the protein Zibra, its genomic organization, regulation, and expression in breast cancer cells.

L&#39;ARNm codant pour zibra (zinc, in-between-annulaire, domaine ubiquitine-associ&eacute;s), pr&eacute;c&eacute;demment appel&eacute;e prot&eacute;ine hypoth&eacute;tique FLJ10111, ou RNF31 est exprim&eacute;e dans plusieurs types de cancers distincts. On conna&icirc;t mal l&#39;organisation g&eacute;nomique, expression ou r&egrave;glement de zibra. &Agrave; l&#39;aide de RNA ligase-mediated amplification rapide des extr&eacute;mit&eacute;s d&#39;ADNc (RLM-RACE), nous avons clon&eacute; l&#39;ADNc pleine longueur zibra d&#39;une lign&eacute;e de cellules transform&eacute;es du sein. Nous avons identifi&eacute; un nouveau exon, la r&eacute;gion 5&#39; non traduite notamment le site de d&eacute;part de + 1, et trois alternativement &eacute;piss&eacute; zibra transcriptions. La prot&eacute;ine zibra contient trois motifs doigt de zinc et un domaine d&#39;ubiquitine associ&eacute;s &agrave; un domaine in-between-annulaire, caract&eacute;ristique de l&#39;ubiquitine ligases. Nous avons obtenu un anticorps zibra et a confirm&eacute; la pr&eacute;sence de la prot&eacute;ine zibra traduit pour la premi&egrave;re fois. &Eacute;tudes de promoteur localis&eacute; un &eacute;l&eacute;ment central responsable de l&#39;activit&eacute; basale &agrave; une r&eacute;gion de bp-14 dans la r&eacute;gion 5&#39; non traduite. Bien qu&#39;il existe de nombreux sites de liaison Ets un consensus dans le promoteur zibra, nous avons ne constat&eacute; aucun effet sur l&#39;activit&eacute; du promoteur de Ets-1, PDEF ou pois-3/E1A-F. Traitement des cellules avec l&#39;inhibiteur du prot&eacute;asome je (lb/po2) a diminu&eacute; de zibra prot&eacute;ines &agrave; un niveau ind&eacute;tectable apr&egrave;s que 8 h. Zibra est rest&eacute; ind&eacute;tectable m&ecirc;me apr&egrave;s 32 h, tandis que les niveaux d&#39;ARNm est rest&eacute; essentiellement inchang&eacute;s. En conclusion, zibra est une ligase ubiquitine putatif translationnelle r&eacute;glement&eacute; qui est souvent surexprim&eacute;e dans diff&eacute;rentes formes de cancer.

Identification de la prot&eacute;ine Zibra son organisation g&eacute;nomique, r&egrave;glement et expression dans les cellules canc&eacute;reuses du sein.

Identifizierung des Proteins Zibra, seine Genom-Organisation, Regulierung, und die Expression in Brustkrebszellen.

il mRNA che codifica zibra (zinco, in-tra-anulare, dominio di ubiquitin-associati), precedentemente noto come ipotetica proteina FLJ10111, o RNF31 &egrave; espresso in diversi tumori distinti. Poco si sa circa l&#39;organizzazione genomica, espressione o regolamento di zibra. Mediante amplificazione RNA ligasi-mediata rapida delle estremit&agrave; del cDNA (RLM-RACE), abbiamo clonato zibra full-length cDNA da una linea cellulare trasformato al seno. Abbiamo identificato un romanzo esone, 5&#39; untranslated regione tra cui il sito start + 1, e tre splicing zibra trascrizioni. La proteina zibra contiene tre motivi anulare di zinco, un dominio di ubiquitin-associati e un dominio in-tra--anulare, caratteristico dell&#39;ubiquitina ligasi. Abbiamo ottenuto un anticorpo a zibra e confermata la presenza della proteina zibra tradotti per la prima volta. Studi promotore localizzata in un elemento di nucleo responsabile attivit&agrave; basale per una regione 14-bp della regione 5&#39; non tradotta. Anche se ci sono numerosi siti di legame del fattore di Ets di consenso nel promotore zibra, abbiamo non trovato alcun effetto sull&#39;attivit&agrave; del promotore da Ets-1, PDEF o pisello-3/E1A-F. Trattamento delle cellule con l&#39;inibitore del proteasoma io (PSI) &egrave; diminuito di zibra proteine ad un livello non rilevabile dopo 8 h. Zibra &egrave; rimasto non rilevabili anche dopo 32 h, mentre i livelli di mRNA &egrave; rimasto sostanzialmente invariati. In conclusione, zibra &egrave; una translationally regolamentati putativo ubiquitina ligasi che frequentemente &egrave; overexpressed in diverse forme di cancro.

Identificazione della proteina Zibra, sua organizzazione genomica, regolamento ed espressione in cellule di cancro al seno.

&#x4EE5;&#x524D;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; FLJ10111&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; RNF31 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; zibra &#xFF08;&#x4E9C;&#x925B;&#x306E;&#x9593;&#x85AC;&#x6307;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;) &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; mRNA &#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x660E;&#x77AD;&#x306A;&#x304C;&#x3093;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x5F0F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; zibra &#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;RNA &#x306E; cDNA &#x306E;&#x7AEF; (RLM-RACE) &#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E; zibra cDNA &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30F3;&#x3001;+1 &#x958B;&#x59CB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3066; 3 &#x3064;&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B; zibra &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8; &#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Zibra &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x306F; 3 &#x4E9C;&#x925B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6307;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6307;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA; &#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Zibra &#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3055;&#x308C;&#x305F; zibra &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x5E95;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x62C5;&#x5F53; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; 14 bp &#x9818;&#x57DF;&#x3078;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x8981;&#x7D20;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3002;Zibra &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9; Ets &#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092; Ets 1&#x3001;PDEF&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x8C46; 3/E1A F. &#x304B;&#x3089;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;MRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x6A2A;&#x9019;&#x3044;&#x306E;&#x4E2D; &#xFF08;8 h. Zibra &#x3082; 32 h &#x5F8C; svr &#x5F8C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x79C1;&#x306F; &#xFF08;PSI&#xFF09; zibra &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x691C;&#x51FA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;zibra &#x306F;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x764C;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x5F62;&#x3067;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x4E26;&#x9032;&#x898F;&#x5236;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA; &#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Zibra &#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x898F;&#x5236;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x3002;

Zibra (&#xC544;&#xC5F0;, &#xC0AC;&#xC774;-&#xBC18;&#xC9C0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D;, &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;), FLJ10111, &#xB610;&#xB294; RNF31 &#xAC00;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; Mrna&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC554;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC791;&#xC740; &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xC9C1;, &#xC2DD; &#xB610;&#xB294; zibra&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCC0;&#xD615;&#xB41C; &#xC720; &#xBC29; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; zibra cDNA &#xBCF5;&#xC81C; RNA cDNA &#xB05D; (RLM-&#xACBD;&#xC8FC;)&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD655;&#xB300; &#xB9AC;&#xAC00; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC18C;&#xC124; exon + 1 &#xC2DC;&#xC791; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; 5&#39; &#xB9DE;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; 3 &#xB610;&#xB294; zibra &#xC131;&#xC801;&#xD45C; &#xBC30;&#xC120;. Zibra &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 3 &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xBC18;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;, &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; ligases&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC774; &#xBC18;&#xC9C0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; zibra&#xC5D0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD558; &#xACE0; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC88;&#xC5ED; &#xB41C; zibra &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC5F0;&#xAD6C; 5&#39; &#xB9DE;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; 14-bp &#xC9C0;&#xC5ED; &#xAE30;&#xC800; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB2F4;&#xB2F9; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;. &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC6B0;&#xB9AC; Ets 1, PDEF, &#xB610;&#xB294; &#xC644;&#xB450;&#xCF69; 3/E1A F.&#xC5D0;&#xC11C; zibra &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xD569;&#xC758; Ets &#xC694;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xAC00; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; 8 H. Zibra &#xB0A8;&#xC544; 32 h &#xD6C4;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; mRNA &#xC218;&#xC900; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD6C4; &#xC140; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB098; (PSI) &#xBC1C;&#xACAC;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; zibra &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, zibra&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC554;&#xC5D0; overexpressed &#xC790;&#xC8FC; translationally &#xADDC;&#xC81C; &#xC0C1; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Zibra&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xC9C1;, &#xADDC;&#xC815;, &#xBC0F; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;.

El ARNm que codifica zibra (cinc, in-between-anillo de dedo, dominio de ubiquitina-asociado), anteriormente conocido como prote&iacute;na hipot&eacute;tica FLJ10111, o RNF31 se expresa en varios tipos de c&aacute;ncer distintos. Poco se sabe sobre la organizaci&oacute;n gen&oacute;mica, expresi&oacute;n o regulaci&oacute;n de zibra. Usando la amplificaci&oacute;n r&aacute;pida mediada por ligasa de RNA de cDNA extremos (RLM-raza), nos hab&iacute;an clonado el cDNA de zibra integral de una l&iacute;nea de c&eacute;lulas de mama transformada. Identificamos una novela ex&oacute;n, el 5&#39; regi&oacute;n sin traducir incluyendo el sitio de inicio de + 1, y tres alternativamente empalmados zibra transcripciones. La prote&iacute;na zibra contiene tres motivos de anillo-dedo de cinc, un dominio de ubiquitina-asociados y un dominio in-between-anillo-dedo, caracter&iacute;stico de ligasas de ubiquitina. Obtuvimos un anticuerpo zibra y confirm&oacute; la presencia de la prote&iacute;na zibra traducido por primera vez. Estudios promotor localizan un elemento central responsable de la actividad basal a una regi&oacute;n 14-bp en la regi&oacute;n no traducida 5&#39;. Aunque hay numerosos sitios de Uni&oacute;n consenso Ets factor en el promotor de zibra, no encontramos ning&uacute;n efecto sobre la actividad del promotor de Ets-1, PDEF o guisante-3/E1A-F. Tratamiento de c&eacute;lulas con el inhibidor de la proteasoma (PSI) disminu&iacute; zibra prote&iacute;na a un nivel indetectable despu&eacute;s de 8 h. Zibra permanec&iacute;a indetectable incluso despu&eacute;s de 32 horas, mientras que los niveles de mRNA segu&iacute;a siendo esencialmente sin cambios. En conclusi&oacute;n, zibra es una ligasa de ubiquitina supuesta forma regulada que con frecuencia se sobre expresa en diferentes formas de c&aacute;ncer.

Identificaci&oacute;n de la prote&iacute;na Zibra, su organizaci&oacute;n gen&oacute;mica, regulaci&oacute;n y expresi&oacute;n en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama.

26S &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210; 20S &#x6838;&#x5FC3;&#x548C; 19 &#x5C81;&#x76D1;&#x7BA1;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x964D;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;19 &#x5C81;&#x76D1;&#x7BA1;&#x590D;&#x6742;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684; 19 &#x5C81;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x6210;&#x5206;&#x80FD;&#x6709;&#x6548;&#x8C03;&#x8282; 26S &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;26S &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5F71;&#x54CD;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x7684; 19 &#x5C81;&#x4E9A;&#x57FA;&#x989D;&#x5916;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;S12 (Rpn8)&#x3001; &#x4EBA;&#x7C7B;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; Mov-34 &#x662F;&#x975E; ATPase 19 &#x5C81;&#x7684; 26S &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; S12&#x3002;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5177;&#x6709;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x5C5E;&#x6027;&#x6807;&#x8BC6;&#x6539;&#x6027;&#x7684; S12 &#x9F3B;&#x606F;&#x8089; (S12-M)&#x3002;S12-M &#x9F3B;&#x606F;&#x8089; 6 &#x6B63;&#x5E38;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; 4 &#x6539;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x7684;&#x52A0;&#x6CD5;&#x4F53;&#x5916; S12 &#x86CB;&#x767D;&#x6539;&#x6027;&#x3002;&#x4FEE;&#x6539;&#x8FC7;&#x7684;&#x548C;&#x672A;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684; S12 &#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5374;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7B49;&#x7535;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4FEE;&#x6539; S12 &#x540C;&#x4F19;&#x4E0E; 26S &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#xFF0C;&#x800C;&#x4FEE;&#x6539;&#x540E;&#x7684; S12-M &#x5219;&#x4E0D;&#x80FD;&#x3002;&#x800C;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBF;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x5305;&#x542B;&#x65E2; S12 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x672A;&#x4FEE;&#x6539; S12 &#x4E0E; S12-M &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x6E38;&#x79BB;&#x3002;19 &#x5C81;&#x4E9A;&#x57FA;&#x4E2D;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#xFF0C;S12 &#x548C; eIF3 &#x548C; TFIIH &#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;coelution &#x4E0E; immunoproteasome &#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;&#x548C;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x548C;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x8FC7;&#x7684;&#x548C;&#x672A;&#x4FEE;&#x6539; S12 &#x5FAE;&#x5206;&#x6838;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;

Post-translationally &#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x4FEE;&#x6539; S12&#xFF0C;&#x5728;&#x8F6C;&#x6362;&#x540E;&#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; 26S &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x5173;&#x8054;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;

The 26S proteasome, consisting of the 20S core and 19S regulatory complexes, regulates intracellular protein concentration through proteolytic degradation of targeted substrates. Composition of the 19S regulatory complex as well as posttranslational modifications of the 19S subunits can effectively regulate the activity of the 26S proteasome. Aberrant activity of the 26S proteasome affects the cell cycle, apoptosis and other cellular processes related to cancer. Recent data show an additional proteasome-independent role of 19S subunits in transcriptional regulation. S12 (Rpn8), the human homologue of mouse Mov-34, is a non-ATPase 19S regulatory subunit of the 26S proteasome. Previous studies have identified phosphorylated S12. In our study, we identify a modified S12 isoform (S12-M) with distinct biochemical properties. The S12-M isoform was found in 6 normal, but not 4 transformed, breast epithelial cell lines. Modification of S12 protein can be induced in vitro by addition of the proteasome inhibitor PSI. Modified and unmodified S12 have similar mass, but different isoelectric points, consistent with phosphorylation. In normal cells, unmodified S12 associates with the 26S proteasome, while modified S12-M does not. Whereas transformed cell line nuclei contain neither S12 isoform, S12-M is predominantly cytosolic in normal cells, with the unmodified S12 present in both the nuclei and cytosol. Together with the role of 19S subunits in transcriptional regulation, homology between S12 and eIF3 and TFIIH subunits, coelution with immunoproteasome subunits, and differential posttranslational modification and nuclear localization, these data suggest a differential nuclear function of modified and unmodified S12 in cancer.

Post-translationally modified S12, absent in transformed breast epithelial cells, is not associated with the 26S proteasome and is induced by proteasome inhibitor.

Le prot&eacute;asome 26 s, consistant en 20 s core et 19 s r&eacute;glementaires complexes, r&eacute;gule la concentration intracellulaire des prot&eacute;ines par la d&eacute;gradation prot&eacute;olytique de substrats cibl&eacute;s. Composition les modifications r&eacute;glementaires 19 s complexes ainsi que post-traductionnelle des sous-unit&eacute;s 19 s peut r&eacute;glementer efficacement l&#39;activit&eacute; du prot&eacute;asome 26 s. Activit&eacute; aberrante du prot&eacute;asome 26 s influe sur le cycle cellulaire, l&#39;apoptose et autres processus cellulaires li&eacute;s au cancer. Les donn&eacute;es r&eacute;centes montrent un r&ocirc;le ind&eacute;pendant du prot&eacute;asome suppl&eacute;mentaire de 19 s sous-unit&eacute;s dans la r&eacute;gulation transcriptionnelle. S12 (Rpn8), l&#39;homologue humain de souris Mov-34, est une sous-unit&eacute; r&eacute;gulatrice 19 s non-ATPase du prot&eacute;asome 26 s. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures ont identifi&eacute; S12 phosphoryl&eacute;s. Dans notre &eacute;tude, nous identifions une isoforme de S12 modifi&eacute;e (S12-M) avec des propri&eacute;t&eacute;s biochimiques distinctes. L&#39;isoforme S12-M a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; dans 6 normale, mais pas 4 transform&eacute;, lign&eacute;es de cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires. Modification de la prot&eacute;ine S12 peut &ecirc;tre induite in vitro par addition de l&#39;inhibiteur du prot&eacute;asome lb/po2. S12 modifi&eacute;es et non modifi&eacute;es ont la m&ecirc;me masse, mais diff&eacute;rents points iso&eacute;lectriques, conformes &agrave; la phosphorylation. Dans les cellules normales, non modifi&eacute; S12 s&#39;associe avec le prot&eacute;asome 26 s, mais pas modifi&eacute; S12-M. Alors que les noyaux de ligne des cellules transform&eacute;es ne contiennent ni isoforme S12, S12-M est principalement cytosolique dans les cellules normales, avec le S12 non modifi&eacute;s pr&eacute;sents dans les noyaux et le cytosol. Ainsi que le r&ocirc;le des sous-unit&eacute;s de 19 s dans la r&eacute;gulation transcriptionnelle, l&#39;homologie entre S12 et eIF3 et sous-unit&eacute;s TFIIH, &eacute;lution avec les sous-unit&eacute;s immunoprot&eacute;asome et la modification post-traductionnelle diff&eacute;rentielle et localisation nucl&eacute;aire, ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent une fonction diff&eacute;rentielle nucl&eacute;aire de S12 modifi&eacute;es et non modifi&eacute;es dans le cancer.

Modifi&eacute;es post-traductionnellement S12, absents dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales mammaires transform&eacute;es, n&#39;est pas associ&eacute; par le prot&eacute;asome 26 s et est induite par l&#39;inhibiteur du prot&eacute;asome.

Posttranslational modifizierten S12, fehlen in transformierten Brustepithelzellen, nicht mit dem 26S Proteasom assoziiert und wird durch Proteasom-Inhibitor induziert.

Il proteasoma 26S, costituito da 20S core e 19S complessi normativi, regola la concentrazione intracellulare della proteina attraverso proteolitico degradazione dei substrati mirati. Composizione delle 19S normativo cos&igrave; complesso come posttranslational modifiche delle subunit&agrave; 19S pu&ograve; regolare efficacemente l&#39;attivit&agrave; del proteasoma 26S. Aberrante attivit&agrave; del proteasoma 26S influisce sul ciclo cellulare, apoptosi e altri processi cellulari correlati al cancro. Dati recenti mostrano un ruolo indipendente del proteasoma supplementare di subunit&agrave; 19S nella regolazione trascrizionale. S12 (Rpn8), l&#39;omologo umano del mouse Mov-34, &egrave; una non-ATPasi 19S normativo subunit&agrave; del proteasoma 26S. Precedenti studi hanno identificato S12 fosforilato. Nel nostro studio, ci identifichiamo un&#39;isoforma modificato S12 (S12 M) con propriet&agrave; biochimiche distinte. L&#39;isoforma S12-M &egrave; stato trovato in 6 normale, ma non 4 trasformato, linee di cellule epiteliali del seno. Modificazione della proteina S12 pu&ograve; essere indotta in vitro tramite l&#39;aggiunta dell&#39;inibitore del proteasoma PSI. S12 modificati e non modificate hanno massa simile, ma diversi punti isoelettrici, coerente con la fosforilazione. In cellule normali, non modificato S12 associates con il proteasoma 26S, mentre non modificato S12-M. Considerando che la cellula trasformata linea nuclei contengono n&eacute; isoforma S12, S12-M &egrave; prevalentemente citosolica in cellule normali, con il S12 non modificati presenti nuclei sia nel citosol. Insieme con il ruolo di subunit&agrave; 19S nella regolazione trascrizionale, omologia tra S12 ed eIF3 e subunit&agrave; TFIIH, coelution con immunoproteasome subunit&agrave; e differenziale modificazione post traduzionale e localizzazione nucleare, questi dati suggeriscono una funzione differenziale nucleare di S12 modificati e non modificato in cancro.

Traduzionali modificato S12, assenti nelle cellule epiteliali trasformate al seno, non &egrave; associato con il proteasoma 26S ed &egrave; indotta dall&#39;inibitore del proteasoma.

20 &#x4EE3;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x3068; 19S &#x898F;&#x5236;&#x932F;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B; 26 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;19S &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; 19S &#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B; 26 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;26 S &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x764C;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5F79;&#x5272; 19S &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S12 (Rpn8) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Mov 34 &#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x76F8;&#x540C; 26 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x975E; ATPase 19S &#x8ABF;&#x7BC0;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; S12 &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x5909;&#x66F4; S12 &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; (S12-M) &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S12 M &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; 6 &#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x5909;&#x63DB;&#x3001;&#x3044;&#x306A;&#x3044; 4 &#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x7DDA;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;S12 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6539;&#x8CEA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; PSI &#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308A; in vitro &#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3046;&#x308B;&#x3002;&#x5909;&#x66F4;&#x3001;&#x672A;&#x5909;&#x66F4;&#x306E; S12 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x7B49;&#x96FB;&#x70B9;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x66F4; S12-M &#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F; S12 &#x30A2;&#x30BD;&#x30B7;&#x30A8;&#x30A4;&#x30C4; 26 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x672A;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3002;&#x5909;&#x8EAB;&#x30BB;&#x30EB; &#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x6838;&#x3069;&#x3061;&#x3089; S12 &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x672A;&#x4FEE;&#x6B63;&#x306E; S12 &#x3068; S12 M &#x304C;&#x4E3B;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;S12 &#x3068; eIF3 &#x3068; coelution &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x5DEE;&#x5206;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3068;&#x6838;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; TFIIH &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x3067; 19S &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x5909;&#x66F4;&#x3001;&#x672A;&#x5909;&#x66F4;&#x306E; S12 &#x304C;&#x3093;&#x3067;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x6838;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6B20;&#x5E2D; S12&#x3001;post-translationally &#x5909;&#x66F4;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C; 26 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

20 &#xB300; &#xD575;&#xC2EC; &#xBC0F; 19S &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xC9C0;, &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; 26S &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 19S &#xADDC;&#xC815; posttranslational &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC218;&#xC815; 19S subunits&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; 26S &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 26S &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC758; &#xD0C8; &#xC120; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;, apoptosis &#xBC0F; &#xC554; &#xAD00;&#xB828; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; transcriptional &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; 19S subunits&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. S12 (Rpn8), &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Mov 34&#xC758; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; homologue 26S &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC758; 19S &#xBE44; ATPase &#xADDC;&#xC81C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; phosphorylated S12 &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xC720; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; S12 isoform (S12-M)&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. S12-M isoform 6 &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; 4 &#xBCC0;&#xD615;, &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. S12 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC218;&#xC815; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; PSI&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; &#xCCB4; &#xC678; &#xC720;&#xB3C4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; S12 &#xB2E4;&#xB978; isoelectric &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;, &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC9C8;&#xB7C9;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; S12 M &#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; S12 &#xB3D9;&#xB8CC; 26S &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC640; &#xC218;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. S12 isoform&#xB3C4; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC140; &#xC120; &#xD575;, S12-M&#xC740; &#xC218;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; S12 &#xD575; cytosol&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xB85C; cytosolic. Transcriptional &#xADDC;&#xC81C;, homology S12 &#xBC0F; eIF3 &#xBC0F; TFIIH &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704;, immunoproteasome &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; &#xBC0F; &#xCC28;&#xB3D9; posttranslational &#xC218;&#xC815; &#xBC0F; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; coelution &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; 19S subunits&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; S12 &#xC554;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD575; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC81C;&#xC548;.

Post-translationally &#xACB0; &#xC11D; S12, &#xC218;&#xC815;, &#xBCC0;&#xD615;&#xB41C; &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; 26S &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418; &#xACE0; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El proteasoma 26S, consistiendo en los 20S n&uacute;cleo y 19S regulatorios complejos, regula la concentraci&oacute;n de la prote&iacute;na intracelular a trav&eacute;s de la degradaci&oacute;n proteol&iacute;tica de sustratos espec&iacute;ficos. Composici&oacute;n de las 19S regulatorio complejo como posttranslational modificaciones de las subunidades de 19S puede regular con eficacia la actividad del proteasoma 26S. Actividad aberrante del proteasoma 26S afecta el ciclo celular, apoptosis y otros procesos celulares relacionados con el c&aacute;ncer. Datos recientes muestran un papel independiente del proteasoma adicional de 19S subunidades en la regulaci&oacute;n transcripcional. S12 (Rpn8), el hom&oacute;logo humano del rat&oacute;n Mov-34, es una subunidad reguladora no-ATPasa 19S del proteasoma 26S. Estudios previos han identificado S12 fosforilado. En nuestro estudio, identificamos una isoforma modificada de S12 (S12-M) con distintas propiedades bioqu&iacute;micas. La isoforma S12-M se encontr&oacute; en 6 normal, pero no 4 transformado, l&iacute;neas de c&eacute;lulas epiteliales de mama. Modificaci&oacute;n de prote&iacute;na S12 puede ser inducida in vitro por la adici&oacute;n del inhibidor de la proteasoma PSI. S12 modificados y no modificados tienen masa similar, pero diferentes puntos isoel&eacute;ctricos, consistentes con la fosforilaci&oacute;n. En las c&eacute;lulas normales, sin modificar el S12 asociados con el proteasoma 26S, mientras que no modificado S12-M. Mientras que los n&uacute;cleos de l&iacute;nea de c&eacute;lula transformada contienen ni isoforma S12, S12-M es citos&oacute;lica predominante en las c&eacute;lulas normales, con el S12 presentes en los n&uacute;cleos y el citosol. Junto con el papel de 19S subunidades en la regulaci&oacute;n transcripcional, homolog&iacute;a entre S12 y eIF3 y TFIIH subunidades, coelution con immunoproteasome subunidades y modificaci&oacute;n postraduccional diferencial y localizaci&oacute;n nuclear, estos datos sugieren una funci&oacute;n nuclear diferencial de S12 modificada y sin modificar en c&aacute;ncer.

Modificaci&oacute;n postraduccional S12, ausente en las c&eacute;lulas epiteliales de mama transformada, no est&aacute; asociado con el proteasoma 26S y es inducida por el inhibidor de la proteasoma.

&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x4E2D;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x65E8;&#x5728;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5176;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7535;&#x963B;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x5316;&#x7597;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x4E24;&#x4EBA;&#x80F0;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884C;&#xFF0C;&#x5976;&#x9505; 1 &#x548C; BXPC3&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x7684; RNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x4E3A;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x7684;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x88AB;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6D88;&#x9664;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x548C;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x53CD;&#x4E49;&#x8D28;&#x7C92;&#x8F6C;&#x67D3;&#x3002;&#x534F;&#x540C;&#x6CF0;&#x7D22;&#x5E1D;&#x548C;&#x5409;&#x897F;&#x4ED6;&#x6EE8;&#x5976;&#x9505; 1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x4ECE; 12.7%&#x589E;&#x52A0;&#x5230;&#x4E0E;&#x6CF0;&#x7D22;&#x5E1D;&#x7684; 70.2%&#x7684;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x957F;&#x6291;&#x5236;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x6297;&#x8840;&#x6E05; (P &lt; 0.05) &#x548C;&#x5409;&#x897F;&#x4ED6;&#x6EE8;&#x7684; 28.6%(P &lt; 0.01) &#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0A;&#x7684;&#x534F;&#x540C;&#x4F5C;&#x7528;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x53EA;&#x6709;&#x8FBE;&#x5230; BXPC3 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7531; 22.9%&#x589E;&#x81F3; 50.0%&#x7684;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x6CF0;&#x7D22;&#x5E1D;&#x540E; (P &lt; 0.005)&#x3002; &#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x4E49;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x4F4E;&#x8840;&#x6E05;&#x6761;&#x4EF6;&#x548C;&#x88AB;&#x4E0D;&#x5F53;&#x81F4;&#x7624;&#x88F8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5976;&#x9505; 1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x6297;&#x589E;&#x6B96;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5409;&#x897F;&#x4ED6;&#x6EE8;&#x5BF9;&#x654F;&#x611F;&#x6027; &#xFF08;IC50 &gt; 100 microg/ml &#x51CF;&#x5C11;&#x5230; 0.1 microg/ml&#xFF09; &#x548C;&#x6CF0;&#x7D22;&#x5E1D; (IC50 20ml microg &#x964D;&#x4F4E;&#x5230; &lt; 0.01 microg/ml) &#x539F;&#x4F4D;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002; &#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x4E49;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5F53;&#x4E0E;&#x77E2;&#x91CF;&#x63A7;&#x5236;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x5976;&#x9505; 1 &#x53CD;&#x4E49;&#x7684;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7684;&#x63D0;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x6B63;&#x503C;&#x589E;&#x52A0;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; B/Akt &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5409;&#x897F;&#x4ED6;&#x6EE8;&#x548C;&#x6CF0;&#x7D22;&#x5E1D;&#x7684;&#x56DE;&#x5E94;&#x3002;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x89C4;&#x907F;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6700;&#x4F18;&#x8F85;&#x52A9;&#x5316;&#x7597;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#xFF0C;&#x5982;&#x6CF0;&#x7D22;&#x5E1D;&#x548C;&#x5409;&#x897F;&#x4ED6;&#x6EE8;&#xFF0C;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;

&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

The gastrin gene is expressed widely in pancreatic adenocarcinomas and the study aimed to assess its role in both the resistance of cancer cells to apoptosis and the sensitivity of cells to chemotherapeutic agents. Two human pancreatic cell lines, PAN1 and BXPC3, expressed gastrin at both the RNA and protein levels and are shown to be representative of human pancreatic adenocarcinomas in terms of gastrin expression. Inhibition of endogenous gastrin production by tumor cells was achieved with neutralizing gastrin antiserum and transfection with a gastrin antisense plasmid. Gastrin antiserum synergized with both taxotere and gemcitabine in inhibiting the in vitro growth of the PAN1 cell line with the inhibitory effect of the antiserum increasing from 12.7% to 70.2% with taxotere (P < 0.05) and 28.6% with gemcitabine (P < 0.01) after controlling for the effects of the cytotoxics. Synergy was only achieved with taxotere in BXPC3 cells with the inhibitory effect of gastrin antiserum increasing from 22.9% to 50.0% (P < 0.005). Cells transfected with gastrin antisense had reduced in vitro growth in low serum conditions and were poorly tumorigenic in nude mice at an orthotopic site. Gastrin antisense-transfected PAN1 cells had increased sensitivity to the antiproliferative effects of both gemcitabine (IC50 of > 100 microg/ml reduced to 0.1 microg/ml) and taxotere (IC50 of 20 microg/ml reduced to < 0.01 microg/ml) when compared with vector controls. The increased sensitivity of PAN1 antisense coincided with increased caspase-3 activity and reduced protein kinase B/Akt phosphorylation in response to both gemcitabine and taxotere. Gastrin gene circumvention may be an optimal adjunct to chemotherapeutic agents, such as taxotere and gemcitabine, in pancreatic adenocarcinoma.

The biological and therapeutic importance of gastrin gene expression in pancreatic adenocarcinomas.

Le g&egrave;ne de la gastrine est largement exprim&eacute; dans les ad&eacute;nocarcinomes pancr&eacute;atiques et l&#39;&eacute;tude visait &agrave; &eacute;valuer son r&ocirc;le dans les deux la r&eacute;sistance des cellules canc&eacute;reuses &agrave; l&#39;apoptose et la sensibilit&eacute; des cellules aux agents chimioth&eacute;rapeutiques. Deux lign&eacute;es de cellules pancr&eacute;atiques humaines, PAN1 et BXPC3, exprime la gastrine au niveau de l&#39;ARN et des prot&eacute;ines et ne semblent pas repr&eacute;senter des ad&eacute;nocarcinomes pancr&eacute;atiques humaines en termes d&#39;expression de la gastrine. L&#39;inhibition de la production endog&egrave;ne de la gastrine par les cellules tumorales a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e avec neutralisant l&#39;antis&eacute;rum de la gastrine et transfection avec un plasmide antisens de la gastrine. Antis&eacute;rum de gastrine en synergie avec taxotere et gemcitabine dans l&#39;inhibition de la croissance in vitro de la lign&eacute;e cellulaire PAN1 avec l&#39;effet inhibiteur de l&#39;antis&eacute;rum, passant de 12,7 % &agrave; 70,2 % avec taxotere (P 0,05 &lt;) et 28,6 % avec la gemcitabine (P 0,01 &lt;) apr&egrave;s les effets de la synergie de cytostatiques. r&eacute;sultait uniquement avec taxotere dans les cellules de BXPC3 avec l&#39;effet inhibiteur de l&#39;antis&eacute;rum de la gastrine, passant de 22,9 % &agrave; 50,0 % (P &lt; 0,005). cellules transfect&eacute;es avec antisens de gastrine a r&eacute;duit la croissance in vitro dans des conditions de taux s&eacute;rique et &eacute;taient mal tumorig&egrave;nes chez les souris nues &agrave; un site orthotopique. gastrine transfect&eacute;es antisens PAN1 cellules avaient augment&eacute; la sensibilit&eacute; aux effets antiprolif&eacute;ratifs de gemcitabine (IC50 = &amp;gt; 100 microg/ml r&eacute;duite &agrave; 0,1 microg/ml) et taxotere (IC50 de 20 microg/ml r&eacute;duit &agrave; 0,01 &lt; microg/ml) par rapport aux t&eacute;moins de vecteur. L&#39;augmentation de la sensibilit&eacute; des antisens PAN1 co&iuml;ncide avec augmentation de l&#39;activit&eacute; caspase-3 et r&eacute;duit de prot&eacute;ine kinase B/Akt phosphorylation en r&eacute;ponse &agrave; la gemcitabine et taxotere. Contournement de g&egrave;ne de gastrine peut &ecirc;tre un compl&eacute;ment optimal &agrave; des agents chimioth&eacute;rapeutiques, tels que taxotere et gemcitabine, dans l&#39;ad&eacute;nocarcinome pancr&eacute;atique.

L&#39;importance biologique et th&eacute;rapeutique de l&#39;expression g&eacute;nique de la gastrine dans ad&eacute;nocarcinomes pancr&eacute;atiques.

Die biologische und therapeutische Bedeutung von Gastrin Genexpression in Pankreasadenokarzinomen.

Il gene di gastrina &egrave; espresso ampiamente in adenocarcinomi del pancreas e lo studio finalizzato a valutare il suo ruolo in entrambi la resistenza delle cellule tumorali all&#39;apoptosi e la sensibilit&agrave; delle cellule agli agenti chemioterapici. Due linee di cellule del pancreas umano, PAN1 e BXPC3, espresso gastrina a livelli sia il RNA e proteine e sono indicati per essere rappresentante di adenocarcinoma del pancreas umano in termini di espressione di gastrina. L&#39;inibizione della produzione endogena di gastrina da parte delle cellule tumorali &egrave; stato raggiunto con neutralizzante antisiero gastrina e transfezione con un plasmide antisenso di gastrina. Antisiero gastrina sinergizzata con taxotere e Gemcitabina nell&#39;inibire la crescita in vitro della linea cellulare PAN1 con l&#39;effetto inibitorio dell&#39;antisiero aumentando dal 12,7% al 70,2% con taxotere (P &lt; 0,05) e 28,6% con gemcitabina (P &lt; 0,01) dopo controllo per gli effetti di citostatici. sinergia &egrave; stato raggiunto solo con taxotere in cellule BXPC3 con l&#39;effetto inibitorio di antisiero gastrina aumenta dal 22,9% al 50,0% (P &lt; 0,005). celle transfected con antisenso gastrina avevano ridotto la crescita in vitro in condizioni di bassa siero ed erano scarsamente tumorigeno in topi nudi in un sito ortotopico. gastrina antisenso transfected le cellule PAN1 erano aumentata sensibilit&agrave; agli effetti antiproliferativi di gemcitabina (CL50 &amp;gt; 100 microg/ml ridotto a 0,1 microg/ml) e di taxotere (CL50 di 20 microg/ml ridotto a &lt; 0,01 microg/ml) Quando confrontato con i controlli vettoriali. La sensibilit&agrave; aumentata di PAN1 antisenso coincise con maggiore attivit&agrave; di caspase-3 e ridotta della proteina chinasi Akt/B fosforilazione in risposta a gemcitabina e taxotere. Elusione gene gastrina pu&ograve; essere un complemento ottimo per agenti chemioterapici, come il taxotere e gemcitabina, in adenocarcinoma pancreatico.

L&#39;importanza biologica e terapeutica dell&#39;espressione genica gastrina in adenocarcinomi del pancreas.

&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x5E83;&#x304F;&#x3059;&#x3044;&#x81D3;&#x817A;&#x764C;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x85AC;&#x5264;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3068;&#x4E21;&#x65B9;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x76EE;&#x6307;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PAN1 &#x3068; BXPC3&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x3059;&#x3044;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x7DDA;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; RNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x81B5;&#x817A;&#x764C;&#x306B;&#x4EE3;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6291;&#x5236;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x5024;&#x3068;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4E2D;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068; 70.2 &#xFF05; &#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E; 12.7 &#xFF05; &#x304B;&#x3089;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x52B9;&#x679C;&#x3068; PAN1 &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; in vitro &#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x30B2;&#x30E0;&#x30B7;&#x30BF;&#x30D3;&#x30F3;&#x3068;&#x65E9;&#x6669;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x6297;&#x8840;&#x6E05; (P &lt; 0.05) 28.6% &#x5869;&#x9178;&#x30B2;&#x30E0;&#x30B7;&#x30BF;&#x30D3;&#x30F3;&#x3068; &#xFF08;P &lt; 0.01&#xFF09; &#xF0A3; &#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30B8;&#x30FC;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB; BXPC3 &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x6297;&#x8840;&#x6E05; 22.9 &#xFF05; &#x304B;&#x3089; 50.0 &#xFF05; &#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C; (P &lt; 0.005). &#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE; in vitro &#x6210;&#x9577;&#x4F4E;&#x8840;&#x6E05;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3001;&#x540C;&#x6240;&#x6027;&#x540C;&#x7A2E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x305F; PAN1 &#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x30B2;&#x30E0;&#x30B7;&#x30BF;&#x30D3;&#x30F3; (0.1 microg/ml &#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x76EE; 100 microg/ml IC50&#xFF09; &#x3068;&#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB; &#xFF08;20 microg/ml &lt; 0.01 microg/ml &#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E; IC50&#xFF09; &#x3078;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30CC;&#x30FC;&#x30C9;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3002;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x5411;&#x4E0A; PAN1 &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x30B2;&#x30E0;&#x30B7;&#x30BF;&#x30D3;&#x30F3;&#x3068;&#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5FDC;&#x3048;&#x3066;&#x4F4E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; B/Akt &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8FC2;&#x56DE;&#x30BF;&#x30AD;&#x30BD;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x30B2;&#x30E0;&#x30B7;&#x30BF;&#x30D3;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x88DC;&#x52A9;&#x81B5;&#x81D3;&#x817A;&#x764C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x81B5;&#x817A;&#x764C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

Gastrin &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xCDCC; &#xC7A5; adenocarcinomas &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; apoptosis &#xC800;&#xD56D; &#xD558; &#xACE0; &#xD654;&#xD559;&#xC694;&#xBC95; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC140;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xAD6C;. &#xB450; &#xC778;&#xAC04; &#xCDCC;&#xC7A5;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;, PAN1 &#xBC0F; BXPC3, RNA&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; gastrin &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; gastrin &#xC2DD; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCDCC; &#xC7A5; adenocarcinomas&#xC758; &#xB300;&#xD45C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD; gastrin &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB294; &#xC911;&#xD654; gastrin &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; transfection gastrin &#xC13C;&#xC2A4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. Gastrin &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; taxotere&#xC640; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; taxotere 70.2%&#xC5D0;&#xC11C; 12.7% &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC00;&#xC9C4; PAN1 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; gemcitabine synergized (P &lt; 0.05)&#xACFC; gemcitabine&#xACFC; 28.6% (P &lt; 0.01)&#xB9CC; taxotere gastrin &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; 50.0%&#xC5D0;&#xC11C; 22.9% &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC00;&#xC9C4; BXPC3 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;&#xC758; cytotoxics. &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD6C4; (P &lt; 0.005). gastrin antisense&#xC640; &#xD398; &#xC140; &#xB0AE;&#xC740; &#xD608; &#xCCAD; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC131;&#xC7A5; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; tumorigenic&#xC5D0; orthotopic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;. Gastrin antisense &#xD398; &#xB204;&#xB4DC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; PAN1 &#xC140; &#xB450; gemcitabine antiproliferative &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; (IC50 &amp;gt; 100 microg/ml&#xC758; 0.1 microg/ml&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C;)&#xC640; taxotere (IC50 20 microg/ml&#xC758; &lt; 0.01 microg/ml&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C;) &#xBCA1;&#xD130; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. PAN1 antisense &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xB3C4; caspase 3 &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; B/Akt &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; gemcitabine&#xC640; taxotere &#xACB9; &#xCCE4; &#xB2E4;. Gastrin &#xC9C4; &#xC6B0;&#xD68C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC120; &#xC554; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC678;&#xB798; taxotere &#xB4F1;&#xACFC; gemcitabine, &#xD654;&#xD559;&#xC694;&#xBC95; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCDCC; &#xC7A5; adenocarcinomas&#xC5D0;&#xC11C; gastrin &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801;, &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;.

El gen de la gastrina se expresa ampliamente en los adenocarcinomas pancre&aacute;ticos y el estudio pretende evaluar su papel en tanto la resistencia de las c&eacute;lulas cancerosas a la apoptosis y la sensibilidad de las c&eacute;lulas a los agentes quimioterap&eacute;uticos. Dos l&iacute;neas de c&eacute;lulas pancre&aacute;ticas humanas, PAN1 y BXPC3, expresaron gastrina en tanto el RNA y prote&iacute;nas y se muestran para ser representante de adenocarcinomas pancre&aacute;ticos humanos en t&eacute;rminos de expresi&oacute;n de la gastrina. Inhibici&oacute;n de la producci&oacute;n end&oacute;gena de gastrina por las c&eacute;lulas tumorales se logr&oacute; con neutralizaci&oacute;n de antisuero de gastrina y transfecci&oacute;n con un pl&aacute;smido antisentido de gastrina. Antisuero de gastrina sinergizado con taxotere y gemcitabina en inhibir el crecimiento in vitro de la l&iacute;nea celular de PAN1 con el efecto inhibitorio del antisuero aumentando de 12,7% a 70,2% con taxotere (P &lt; 0.05) y 28.6% con gemcitabina (P 0.01 &lt;) despu&eacute;s de controlar los efectos de la Sinergia de citot&oacute;xicos. logr&oacute; s&oacute;lo con taxotere en c&eacute;lulas BXPC3 con el efecto inhibitorio de antisuero de gastrina, aumentando de 22,9% a 50.0% (P &lt; 0.005). las C&eacute;lulas transfectadas con antisentido de gastrina hab&iacute;a reducido crecimiento in vitro en condiciones de bajo del suero y fueron mal tumor&iacute;gena en ratones desnudos en un sitio de orthotopic. Gastrina antisentido-transfectada PAN1 c&eacute;lulas hab&iacute;an aumentado la sensibilidad a los efectos antiproliferativos de ambos gemcitabina (IC50 de &gt; 100 microg/ml reducido a 0,1 microg/ml) y taxotere (IC50 de 20 microg/ml reducido a &lt; 0.01 microg/ml) en comparaci&oacute;n con controles de vector. El aumento de la sensibilidad de PAN1 antisentido coincidi&oacute; con mayor actividad de la caspasa-3 y la reducci&oacute;n de la prote&iacute;na quinasa B/Akt fosforilaci&oacute;n en respuesta a gemcitabina y taxotere. Elusi&oacute;n del gene de gastrina puede ser un complemento &oacute;ptimo de agentes quimioterap&eacute;uticos, tales como taxotere y gemcitabina, en adenocarcinoma de p&aacute;ncreas.

La importancia biol&oacute;gica y terap&eacute;utica de la expresi&oacute;n g&eacute;nica de gastrina en los adenocarcinomas pancre&aacute;ticos.

&#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x53D7; multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x8C03;&#x63A7;&#x5143;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8981;&#x7D20;&#x7684;&#x7EFC;&#x5408;&#x9274;&#x5B9A;&#x662F;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x7684;&#x5B9E;&#x9645;&#x5229;&#x76CA;&#xFF0C;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E00;&#x79CD;&#x9AD8;&#x901A;&#x91CF;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x76D1;&#x7BA1;&#x5185;&#x5BB9;&#x3002;&#x5B9E;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E00;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E00;&#x79CD;&#x8868;&#x9762;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5171;&#x632F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x539F;&#x59CB;&#x7684; DNA &#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x533A;&#x57DF;&#x6838;&#x88C2;&#x89E3;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x5230;&#x5FB7;&#x5DDE;&#x4EEA;&#x5668; Spreeta&#xFF0C;&#x8868;&#x9762;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5171;&#x632F;&#x4F20;&#x611F;&#x5668; SQSTM1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; 16 basepair &#x53CC;&#x94FE; DNA &#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x63A7;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5728;&#x53E6;&#x4E00;&#x9879;&#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x4E00;&#x5757;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; DNA &#x7684;&#x53EA;&#x6709;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x78B1;&#x57FA;&#x5BF9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x8868;&#x9762;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5171;&#x632F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53D1;&#x751F;&#x91CD;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#x65F6;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x53D7;&#x5230;&#x539F;&#x6599;&#x6838;&#x88C2;&#x89E3;&#x4ECE; NIH/3T3 &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6C;&#x67D3;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x62A5;&#x544A;&#x8F7D;&#x4F53;&#x6D3B; NIH/3T3 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; DNA &#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x6027;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x8868;&#x9762;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5171;&#x632F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x80FD;&#x8BC6;&#x522B;&#x751F;&#x7406;&#x91CD;&#x5927;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x8C03;&#x63A7;&#x5143;&#x4EF6;&#x3002;

&#x8868;&#x9762;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5171;&#x632F;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x786E;&#x5B9A;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x76D1;&#x7BA1;&#x5185;&#x5BB9;&#x3002;

In eukaryotes, transcription is regulated by multiprotein complexes binding to specific regions of genomic DNA, called cis-regulatory elements. Comprehensive identification of these elements is an important goal of functional genomics. Hence, it is of practical interest to develop a high-throughput assay to identify cis-regulatory elements. Toward that goal, we demonstrate that a surface plasmon resonance-based assay can identify whether a specific region of DNA binds to proteins present in raw nuclear lysate. Specifically, we immobilized a 16-basepair double-stranded DNA region of the SQSTM1 promoter to the Texas Instruments Spreeta, a surface plasmon resonance sensor. As a control, in a separate experiment, we immobilized a similar piece of DNA that differed by only a single base pair. We observed a significant difference in surface plasmon resonance signal when these two probes were exposed to raw nuclear lysate from NIH/3T3 cells. Using a luciferase-reporter vector transfected into live NIH/3T3 cells, we measured a significant difference in transcriptional activity between the two pieces of DNA. We conclude that a surface plasmon resonance-based sensor is capable of identifying physiologically significant cis-regulatory elements.

Surface plasmon resonance-based sensors to identify cis-regulatory elements.

Chez les eucaryotes, la transcription est r&eacute;glement&eacute;e par des complexes multiprot&eacute;iques contraignant &agrave; des r&eacute;gions sp&eacute;cifiques de l&#39;ADN g&eacute;nomique, appel&eacute;s &eacute;l&eacute;ments cis-r&eacute;gulateurs. Identification compl&egrave;te de ces &eacute;l&eacute;ments est un objectif important de la g&eacute;nomique fonctionnelle. Par cons&eacute;quent, c&#39;est d&#39;un int&eacute;r&ecirc;t pratique pour d&eacute;velopper un test &agrave; haut rendement afin d&#39;identifier les &eacute;l&eacute;ments cis-r&eacute;gulateurs. Atteindre ce but, nous d&eacute;montrons qu&#39;un test par r&eacute;sonance plasmonique de surface peut d&eacute;terminer si une r&eacute;gion sp&eacute;cifique de l&#39;ADN se lie aux prot&eacute;ines pr&eacute;sentes dans raw nucl&eacute;aire lysate. Plus pr&eacute;cis&eacute;ment, nous avons immobilis&eacute; une r&eacute;gion d&#39;ADN double brin 16 r&eacute;gions du promoteur SQSTM1 &agrave; la Spreeta de Texas Instruments, un capteur de r&eacute;sonance plasmonique de surface. Comme t&eacute;moin, dans une autre exp&eacute;rience, nous avons immobilis&eacute; une pi&egrave;ce similaire de l&#39;ADN qui diff&eacute;raient par qu&#39;une seule paire de base. Nous avons observ&eacute; une diff&eacute;rence significative dans le signal de r&eacute;sonance plasmonique de surface lorsque ces deux sondes ont &eacute;t&eacute; expos&eacute;s aux crues nucl&eacute;aire lysat de cellules NIH/3 t 3. En utilisant un vecteur de journaliste de luciferase transfect&eacute; dans des cellules NIH/3 t 3 en direct, nous avons mesur&eacute; une diff&eacute;rence significative dans l&#39;activit&eacute; transcriptionnelle entre les deux morceaux d&#39;ADN. Nous concluons qu&#39;un capteur &agrave; base de r&eacute;sonance plasmonique de surface est capable d&#39;identifier les &eacute;l&eacute;ments cis-r&eacute;gulateurs physiologiquement significatives.

Capteurs &agrave; base de r&eacute;sonance plasmonique de surface pour identifier des &eacute;l&eacute;ments cis-r&eacute;gulateurs.

Oberfl&#xE4;chen-Plasmonen-Resonanz-basierte Sensoren, um cis-regulatorische Elemente zu identifizieren.

Negli eucarioti, la trascrizione &egrave; regolata da complessi multiproteici vincolante a specifiche regioni di DNA genomic, chiamato elementi cis-regolatori. Completa identificazione di questi elementi &egrave; un obiettivo importante della genomica funzionale. Quindi, &egrave; di interesse pratico per sviluppare un&#39;analisi di alto-rendimento per identificare elementi cis-regolatori. Verso quell&#39;obiettivo, abbiamo dimostrato che un dosaggio basato su risonanza plasmonica di superficie pu&ograve; identificare se una regione specifica di DNA si lega alle proteine presenti nel greggio nucleare lisato. In particolare, abbiamo immobilizzato una regione di DNA double-stranded 16-basepair del promotore SQSTM1 per la Texas Instruments Spreeta, un sensore di risonanza plasmonica di superficie. Come controllo, in un esperimento separato, abbiamo immobilizzato un simile pezzo di DNA che differiva da soltanto una singola coppia di basi. Abbiamo osservato una differenza significativa nel segnale di risonanza plasmonica di superficie quando queste due sonde sono stati esposti a crudo nucleare lisato da cellule NIH/3T3. Utilizzando un vettore reporter luciferasi transfected in vivono le cellule NIH/3T3, abbiamo misurato una differenza significativa nelle attivit&agrave; trascrizionale tra due pezzi di DNA. Possiamo concludere che un sensore basato su risonanza plasmonica di superficie &egrave; in grado di identificare elementi cis-regolatori fisiologicamente significativi.

Surface plasmon resonance-sensori per identificare elementi cis-regolatori.

&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x591A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; DNA &#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x7DB2;&#x7F85;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x76EE;&#x6A19;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x6545;&#x306B;&#x3001;cis &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x5B9F;&#x8DF5;&#x7684;&#x306A;&#x8208;&#x5473;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x6838;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x751F;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B; DNA &#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E2;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;SQSTM1 &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B9;&#x8A08;&#x5668; Spreeta&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E2;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E; 16 basepair &#x4E8C;&#x672C;&#x9396; DNA &#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3002;&#x7570;&#x306A;&#x308B; DNA &#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x90E8;&#x5206;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x306F;&#x5225;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x5BFE;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x304C; raw &#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x6211;&#x3005; &#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E2;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x5DEE;&#x6838;&#x304B;&#x3089; NIH/3T3 &#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30FC;&#x30C8;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3002;&#x5C0E;&#x5165;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; NIH/3T3 &#x30BB;&#x30EB;&#x4F4F;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; DNA &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x9593;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E2;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x304C;&#x30DB;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x898B;&#x6975;&#x3081;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Cis &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E2;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;

&#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;, &#xC804;&#xC0AC; cis &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; &#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xB294; genomic DNA&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; multiprotein &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xC885;&#xD569; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xBBC0;&#xB85C;, cis &#xADDC;&#xC815; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD45C;&#xBA74; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xBAAC; &#xACF5;&#xBA85; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; DNA&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC6D0;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; lysate. &#xD2B9;&#xD788;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD14D;&#xC0AC;&#xC2A4; &#xC778; &#xC2A4; &#xD2B8;&#xB8E8;&#xBA3C; &#xD2B8; Spreeta, &#xD45C;&#xBA74; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xBAAC; &#xACF5;&#xBA85; &#xC13C;&#xC11C;&#xB97C; SQSTM1 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; 16 basepair &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; DNA &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4; DNA&#xC758; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC870;&#xAC01;&#xC744; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218; &#xC790;&#xB8CC; &#xC30D;&#xB9CC; &#xC5EC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAD00;&#xCC30; &#xD45C;&#xBA74; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xBAAC; &#xACF5;&#xBA85; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xC774; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xD588;&#xB2E4; &#xC6D0;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xBA74; &#xD575; lysate NIH/3T3 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xB85C; &#xD398; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xAE30;&#xC790; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; NIH/3T3 &#xC138;&#xD3EC;, DNA&#xC758; &#xB450; &#xC870;&#xAC01; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; transcriptional &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xCE21;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD45C;&#xBA74; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xBAAC; &#xACF5;&#xBA85; &#xAE30;&#xBC18; &#xC13C;&#xC11C;&#xB294; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; cis &#xADDC;&#xC815; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xD45C;&#xBA74; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xBAAC; &#xACF5;&#xBA85; &#xAE30;&#xBC18; &#xC13C;&#xC11C; cis &#xADDC;&#xC815; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;.

En eucariotas, la transcripci&oacute;n est&aacute; regulada por Complejos Multiproteinas vinculante a regiones espec&iacute;ficas de ADN gen&oacute;mico, llamado elementos cis-reguladores. Identificaci&oacute;n completa de estos elementos es un objetivo importante de la gen&oacute;mica funcional. Por lo tanto, resulta de inter&eacute;s pr&aacute;ctico para desarrollar un an&aacute;lisis de alto rendimiento para identificar elementos cis-reguladores. Hacia ese objetivo, demostramos que un ensayo basado en la resonancia de plasmones puede determinar si una regi&oacute;n espec&iacute;fica de ADN se une a prote&iacute;nas presentes en el cruda nuclear lisado. Espec&iacute;ficamente, nos inmoviliza una regi&oacute;n de ADN de doble hebra 16-basepair del promotor SQSTM1 a la Spreeta de Texas Instruments, un sensor de resonancia de plasmones. Como control, en un experimento independiente, inmoviliz&oacute; una pieza similar de ADN que difiere por s&oacute;lo un &uacute;nico par de base. Observamos una diferencia significativa en la se&ntilde;al de resonancia de plasmones cuando estas dos sondas fueron expuestas a crudo nuclear lisado de c&eacute;lulas NIH/3T3. Usando un vector reportero de luciferasa transfectado en viven las c&eacute;lulas NIH/3T3, medimos una diferencia significativa en la actividad transcripcional entre los dos trozos de ADN. Concluimos que un sensor basadas en la resonancia de plasmones es capaz de identificar elementos cis-reguladoras fisiol&oacute;gico importantes.

Sensores de plasm&oacute;n superficial basado en resonancia para identificar elementos cis-reguladores.

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x662F;&#x5426;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (HB EGF) &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x901A;&#x8FC7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8110;&#x5E26;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8110;&#xFF09; &#x88AB;&#x8BC4;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x9170;&#x80FA;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;-17 (G17) &#x548C;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x5EF6;&#x957F;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;-17 (GlyG17) &#x591A;&#x80BD;&#x3002;HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55; PCR&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#xFF0C;&#x548C; HB &#x8868;&#x76AE;&#x8131;&#x843D;&#x7684;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2&#x3001; &#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x9E21;&#x80DA;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x5C3F;&#x56CA;&#x819C;&#x819C;&#x7814;&#x7A76;&#x8861;&#x91CF;&#x4F53;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x6F5C;&#x529B;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x548C;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6; (MVD) &#x7684;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E2D;&#x5927; hypergastrinaemic APC(Min) &#x5C0F;&#x9F20;&#x80A0;&#x9053;&#x764C;&#x524D;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;MVD &#x4E5F;&#x662F;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5927;&#x80A0;&#x764C;&#x80BF;&#x7624;&#x5207;&#x9664;&#x8FB9;&#x8DDD;&#x6CD5;&#x7EBF;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x9170;&#x80FA;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20; &#xFF08;&#x901A;&#x8FC7; RIA&#xFF09; &#x548C; &#xFF08;&#x901A;&#x8FC7;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;) HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x8110;&#x7EC6;&#x80DE; G17 &#x56DE;&#x5E94;&#x8868;&#x660E;&#x589E;&#x52A0;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x548C;&#x8282;&#x70B9;&#x5F62;&#x6210; (186%&#xFF0C;P &lt; 0.0005) &#x548C; GlyG17 (194%&#xFF0C;P &lt; 0.0005)&#x3002;&#x8FD9;&#x88AB;&#x5C01;&#x9501; (CCK-2R) &#x80C6;&#x56CA;&#x6536;&#x7F29;&#x7D20;-2 &#x53D7;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x7684; JB95008 &#x548C; JMV1155 &#x548C;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x3001; HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x80BD;&#x589E;&#x52A0; HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;/&#x8110;&#x548C;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2&#x3001; &#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;G17 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x5C3F;&#x56CA;&#x819C;&#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x53CA;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5728;&#x764C;&#x524D;&#x5927;&#x5C0F;&#x80A0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4ECE; hypergastrinaemic APC(Min) &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x4E34;&#x5E8A;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5E38;&#x9ECF;&#x819C;&#x5468;&#x56F4;&#x7ED3;&#x76F4;&#x80A0;&#x817A;&#x764C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C; HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x80BD;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x56FD;&#x5148;&#x751F;-2R&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A;&#x8868;&#x8FBE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x548C;&#x8131;&#x843D;&#x7684; HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x53EF;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6B64; proangiogenic &#x6548;&#x679C;&#x4F1A;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4EBA;&#x529B;&#x8D44;&#x6E90;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x5C06;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x80BD;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x81F4;&#x7624;&#x6027;&#x5C5E;&#x6027;&#x5728;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x4E2D;&#x3002;

&#x80C3;&#x6CCC;&#x7D20;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7;&#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x8868;&#x76AE;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8C03;&#x63A7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

This study examined whether gastrin modulates endothelial cell activity via heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor (HB-EGF) expression. Human umbilical vascular endothelial cells (HUVEC) were assessed for tubule formation in the presence of amidated gastrin-17 (G17) and glycine-extended gastrin-17 (GlyG17) peptides. HB-EGF gene and protein expressions were measured by quantitative reverse transcription-PCR, immunocytochemistry, and Western blotting, and HB-EGF shedding by ELISA. Matrix metalloproteinases MMP-2, MMP-3, and MMP-9 were assessed by Western blotting. Chick chorioallantoic membrane studies measured the in vivo angiogenic potential of gastrin and microvessel density (MVD) was assessed in large intestinal premalignant lesions of hypergastrinaemic APC(Min) mice. MVD was also examined in human colorectal tumor and resection margin normals and correlated with serum-amidated gastrin levels (via RIA) and HB-EGF protein expression (via immunohistochemistry). HUVEC cells showed increased tubule and node formation in response to G17 (186%, P < 0.0005) and GlyG17 (194%, P < 0.0005). This was blockaded by the cholecystokinin-2 receptor (CCK-2R) antagonists JB95008 and JMV1155 and by antiserum to gastrin and HB-EGF. Gastrin peptides increased HB-EGF gene expression/protein secretion in HUVEC and microvessel-derived endothelial cells and the levels of MMP-2, MMP-3, and MMP-9. G17 promoted angiogenesis in a chorioallantoic membrane assay, and MVD was significantly elevated in premalignant large intestinal tissue from hypergastrinaemic APC(Min) mice. In terms of the clinical situation, MVD in the normal mucosa surrounding colorectal adenocarcinomas correlated with patient serum gastrin levels and HB-EGF expression. Gastrin peptides, acting through the CCK-2R, enhance endothelial cell activity in models of angiogenesis. This may be mediated through enhanced expression and shedding of HB-EGF, possibly resulting from increased activity of matrix metalloproteinases. This proangiogenic effect translates to the in vivo and human situations and may add to the tumorigenic properties attributable to gastrin peptides in malignancy.

Gastrin enhances the angiogenic potential of endothelial cells via modulation of heparin-binding epidermal-like growth factor.

Cette &eacute;tude a examin&eacute; si la gastrine module l&#39;activit&eacute; des cellules endoth&eacute;liales par l&#39;expression du facteur de croissance &eacute;pidermique comme facteur de croissance &eacute;pidermique (HB-EGF) liant l&#39;h&eacute;parine. Des cellules endoth&eacute;liales vasculaires ombilicales (HUVEC) ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s pour la formation de tubules en pr&eacute;sence d&#39;amid&eacute; gastrine-17 (G17) et glycine-&eacute;tendue des peptides gastrine-17 (GlyG17). Les expressions de g&egrave;nes et des prot&eacute;ines HB-EGF ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;es par reverse transcription-PCR quantitative, immunocytochimie, Western Blot et HB-EGF excr&eacute;tion par ELISA. M&eacute;talloprot&eacute;inases matricielles MMP-2, MMP-3 et MMP-9 ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;es par Western blot. Poussin membrane Chorio-&eacute;tudes ont mesur&eacute; l&#39;in vivo potentiel angiog&eacute;nique de gastrine et microvaisseaux densit&eacute; (MVD) a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e en grandes l&eacute;sions pr&eacute;canc&eacute;reuses intestinales de souris APC(Min) hypergastrinaemic. MVD a &eacute;t&eacute; &eacute;galement examin&eacute;e dans humaines normales de marge tumeur et r&eacute;section colorectal et en corr&eacute;lation avec les taux de gastrine s&eacute;rique-amid&eacute;s (via RIA) et l&#39;expression de la prot&eacute;ine HB-EGF (par immunohistochimie). Cellules HUVEC ont montr&eacute; la formation accrue de tubule et n&oelig;ud en r&eacute;ponse &agrave; G17 (186 %, P &lt; 0,0005) et GlyG17 (194 %, P &lt; 0,0005). Il a &eacute;t&eacute; soumis &agrave; un blocus par les antagonistes des r&eacute;cepteurs de la chol&eacute;cystokinine-2 (CCK-2R) JB95008 et JMV1155 et par un antis&eacute;rum de gastrine et HB-EGF. Peptides de gastrine augmente HB-EGF gene expression/prot&eacute;ine s&eacute;cr&eacute;tion HUVEC et microvaisseaux d&eacute;riv&eacute;es des cellules endoth&eacute;liales et les concentrations de MMP-2, MMP-3 et MMP-9. G17 promu l&#39;angiogen&egrave;se dans un essai sur membrane Chorio- et MVD &eacute;tait significativement &eacute;lev&eacute; dans le tissu intestinal grand pr&eacute;canc&eacute;reuses chez des souris APC(Min) hypergastrinaemic. En ce qui concerne la situation clinique, MVD dans la muqueuse normale qui entourent les ad&eacute;nocarcinomes colorectaux en corr&eacute;lation avec les taux de gastrine s&eacute;rique patient et expression HB-EGF. Peptides de gastrine, agissant par l&#39;interm&eacute;diaire de la CCK-2R, am&eacute;liorent l&#39;activit&eacute; des cellules endoth&eacute;liales dans les mod&egrave;les de l&#39;angiogen&egrave;se. Cela pourrait &ecirc;tre m&eacute;di&eacute; par l&#39;augmentation de l&#39;expression et l&#39;effusion du HB-EGF, r&eacute;sultant &eacute;ventuellement augment&eacute; l&#39;activit&eacute; des m&eacute;talloprot&eacute;ases de la matrice. Cet effet on se traduit par des situations in vivo et humaines et peut ajouter aux propri&eacute;t&eacute;s tumorig&egrave;nes attribuables aux peptides de gastrine en tumeur maligne.

Gastrine augmente le potentiel angiog&eacute;nique des cellules endoth&eacute;liales par la modulation du facteur de croissance &eacute;pidermique comme liant l&#39;h&eacute;parine.

Diese Studie untersucht, ob Gastrin endothelial Zellen-Aktivit&auml;t durch den Heparin-Bindung epidermalen Wachstumsfaktor-Like Growth Factor (HB-EGF) Ausdruck moduliert. R&ouml;hrchens Bildung in Gegenwart von niedrigmethylierte Gastrin-17 (G17) und Glycin verschnittener Gastrin-17 (GlyG17) Peptide wurden menschliche Nabelschnur vaskul&auml;re Endothelzellen (HUVEC) beurteilt. HB-EGF-gen und Protein-Ausdr&uuml;cke wurden durch quantitative reverse Transkription-PCR, Immunzytochemie, Westliches Beflecken und HB-EGF vergie&szlig;en von ELISA gemessen. Matrix-Metalloproteinasen MMP-2 und MMP-3 MMP-9 wurden von westlichen Beflecken beurteilt. K&uuml;ken chorioallantoic Membrane Studien gemessen in-vivo angiogenen Potenzial von Gastrin und Microvessel Dichte (MVD) wurde im gro&szlig;en Darm pr&auml;maligne L&auml;sionen Hypergastrinaemic APC(Min) M&auml;use bewertet. MVD war auch in menschlichen Darm-Tumor und Resektion Marge-normalen untersucht und korreliert mit Serum-niedrigmethylierte Gastrin Niveaus (&uuml;ber RIA) und HB-EGF-Protein-Ausdruck (&uuml;ber Immunhistochemie). HUVEC Zellen zeigte erh&ouml;hte R&ouml;hrchens und Knoten Bildung als Antwort auf G17 (186 %, P &lt; 0.0005) und GlyG17 (194 %, P &lt; 0.0005). Dies wurde durch die Cholezystokinin-2-Rezeptor (CCK-2R)-Antagonisten, JB95008 und JMV1155 und Antiserum Gastrin und HB-EGF blockierten. Gastrin Peptide erh&ouml;ht, HB-EGF-Gen Ausdruck/Protein Absonderung in HUVEC und Microvessel gewonnenen endothelial Zellen und die Ebenen der MMP-2 und MMP-3 MMP-9. G17 f&ouml;rderte Angiogenesis in einem chorioallantoic Membrane Assay und MVD wurde erheblich in pr&auml;maligne gro&szlig;e Darm-Gewebe aus Hypergastrinaemic APC(Min) M&auml;use erhoben. Im Hinblick auf die klinische Situation korreliert MVD im Zusammenhang mit Dickdarmkrebs Adenokarzinome normale Mucosa mit Patienten-Serum-Gastrin-Ebenen und HB-EGF-Ausdruck. Gastrin Peptide, handelnd durch die CCK-2R, verbessert endothelial Zellen-Aktivit&auml;t in Modellen der Angiogenese. Dies kann durch verbesserte Ausdruck vermittelt werden und Vergie&szlig;en von HB-EGF, m&ouml;glicherweise infolge erh&ouml;hte Aktivit&auml;t von Matrix-Metalloproteinasen. Dieser Proangiogenic-Effekt auf die in-vivo und menschlichen Situationen &uuml;bersetzt und kann die tumorigenic Eigenschaften zuzuschreiben Gastrin Peptide in B&ouml;sartigkeit hinzuf&uuml;gen.

Gastrin steigert das Angiogenese-Potenzial der Endothelzellen &uuml;ber Modulation von Heparin-Binding epidermal-wie Wachstum Faktor.

Questo studio ha esaminato se la gastrina modula l&#39;attivit&agrave; delle cellule endoteliali via eparina-associazione epidermal growth factor-like growth factor (HB-EGF) espressione. Umane ombelicale cellule endoteliali vascolari (HUVEC) sono state valutate per la formazione del tubulo in presenza di amidati gastrina-17 (G17) e glicina-extended peptidi di gastrina-17 (GlyG17). Le espressioni di gene e proteina di HB-EGF sono state misurate da trascrizione inversa-PCR quantitativa, immunocitochimica, Western blotting e HB-EGF spargimento di ELISA. Matrice metalloproteinasi MMP-2, MMP-3 e MMP-9 sono stati valutati dal macchiarsi occidentale. Gli studi di membrana chorioallantoic pulcino misurata in vivo angiogenic potenziale di gastrina e microvessel densit&agrave; (MVD) &egrave; stata valutata in grandi lesioni precancerose intestinale dei topi APC(Min) hypergastrinaemic. MVD &egrave; stato anche esaminato in umani del colon-retto tumore e resezione normali margini e correlato con i livelli di gastrina siero-amidati (via RIA) ed espressione della proteina di HB-EGF (tramite immunoistochimica). Cellule HUVEC ha mostrato maggiore formazione tubulo e nodo in risposta a G17 (186%, P &lt; 0.0005) e GlyG17 (194%, P &lt; 0.0005). Questo fu bloccato dagli antagonisti del recettore 2 colecistochinina (CCK-2R) JB95008 e JMV1155 e da antisiero di gastrina e HB-EGF. Peptidi di gastrina aumentata secrezione di espressione/proteina gene HB-EGF in HUVEC e microvessel derivate le cellule endoteliali e i livelli di MMP-2, MMP-3 e MMP-9. G17 promosso l&#39;angiogenesi in un dosaggio di membrana chorioallantoic e MVD &egrave; stata significativamente elevata nel tessuto intestinale grande precancerose da topi APC(Min) hypergastrinaemic. In termini di situazione clinica, MVD nella mucosa normale circostante adenocarcinomi del colon-retto correlato con i livelli di gastrina siero del paziente e l&#39;espressione di HB-EGF. Peptidi di gastrina, che agisce attraverso il CCK-2R, migliorano l&#39;attivit&agrave; delle cellule endoteliali nei modelli dell&#39;angiogenesi. Questo pu&ograve; essere mediato attraverso una maggiore espressione e spargimento di HB-EGF, eventualmente derivanti dall&#39;aumento dell&#39;attivit&agrave; delle metalloproteinasi della matrice. Questo effetto di proangiogenic si traduce in situazioni umane e in vivo e pu&ograve; aggiungere le propriet&agrave; tumorigeno attribuibile ai peptidi di gastrina in tumore maligno.

Gastrina aumenta il potenziale di angiogenic delle cellule endoteliali via modulazione del fattore di crescita epidermico-come associazione di eparina.

&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D8;&#x30D1;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x8868;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (HB-EGF) &#x5F0F;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (&#x682A;) &#x306E;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x5316;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;-17 &#xFF08;G17 &#x306E;&#xFF09; &#x3068;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; 17 (GlyG17) &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x62E1;&#x5F35;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;HB-EGF &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x9006;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; PCR&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;, &#x30A6;&#x30A8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x6CD5;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; HB-EGF ELISA &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; MMP 2, MMP 3 &#x304A;&#x3088;&#x3073; mmp-9 &#x30A6;&#x30A7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x6F3F;&#x5C3F;&#x819C;&#x7814;&#x7A76;&#x6E2C;&#x5B9A; in vivo &#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30DD;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x5024;&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6; (MVD) &#x3067; hypergastrinaemic APC(Min) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5927;&#x578B;&#x306E;&#x8178;&#x7BA1;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MVD &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3082;&#x3067;&#x3072;&#x3068;&#x5927;&#x8178;&#x816B;&#x760D;&#x3068;&#x5207;&#x9664;&#x30DE;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x6CD5;&#x7DDA;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x5316;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#xFF08;RIA &#x306E;&#xFF09; &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3068; HB-EGF &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE; (&#x514D;&#x75AB;) &#x7D4C;&#x7531;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F; G17 &#x306B;&#x5FDC;&#x3048;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x3068;&#x30CE;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; (186 &#xFF05;&#x3001;P &lt; 0.0005&#xFF09; &#x3068; GlyG17 &#xFF08;194%&#x3001;P &lt; 0.0005&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3067;&#x306F;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073; HB-EGF &#x30B3;&#x30EC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3; 2 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (CCK-2R) &#x62EE;&#x6297;&#x85AC; JB95008 &#x3068; JMV1155 &#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5C01;&#x9396;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; HB-EGF &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5F0F;/&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068; MMP 2, MMP 3 &#x304A;&#x3088;&#x3073; mmp-9 &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;G17 &#x6F3F;&#x5C3F;&#x819C;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;MVD &#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x8178;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B; hypergastrinaemic APC(Min) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x72B6;&#x6CC1;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MVD &#x5927;&#x8178;&#x817A;&#x764C;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x7C98;&#x819C;&#x3067;&#x306F;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x5024;&#x3068; HB-EGF &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3002;CCK-2R &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x6F14;&#x6280;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;HB-EGF &#x306E;&#x8131;&#x843D;&#x3001;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; proangiogenic &#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092; in vivo &#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3057;&#x3001;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x306E;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;

&#x30AC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D8;&#x30D1;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x8868;&#x76AE;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; gastrin &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD5E4; &#xD30C; &#xB9B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (EGF HB) &#xC2DD; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HUVEC) amidated gastrin-17 (G17)&#xACFC; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xD655;&#xC7A5; gastrin 17 (GlyG17) &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. HB EGF &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xC591;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC18;&#xC804; &#xB179;&#xC74C; PCR, immunocytochemistry, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC11C;&#xC591; blotting &#xBC0F; HB EGF ELISA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD53C; &#xB208;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. MMP-2, MMP 3 &#xBC0F; MMP 9 &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases &#xC11C;&#xC591; blotting&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBCD1;&#xC544;&#xB9AC; chorioallantoic &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC5F0;&#xAD6C; in vivo &#xCE21;&#xC815; hypergastrinaemic APC(Min) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xD070; &#xCC3D; &#xC790; premalignant &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; gastrin&#xACFC; microvessel &#xBC00;&#xB3C4; (MVD)&#xC758; angiogenic &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. MVD&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB300; &#xC7A5; &#xC885;&#xC591;&#xACFC; &#xC808;&#xC81C; &#xC5EC;&#xBC31; &#xBC95;&#xC120; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD; amidated gastrin &#xC218;&#xC900; (RIA)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC0F; HB EGF &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; (&#xAE30;&#xC220;)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xAD00;. HUVEC &#xC140; g17&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xAD00; &#xBC0F; &#xB178;&#xB4DC; &#xD615;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4; (186%, P &lt; 0.0005) &#xBC0F; GlyG17 (194%, P &lt; 0.0005). &#xC774; cholecystokinin-2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (CCK-2R) &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; jb95008&#xC640; jmv1155&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; gastrin&#xACFC; HB EGF&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD09;&#xC1C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Gastrin &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; HB EGF &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD;/&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; HUVEC &#xBC0F; microvessel &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; &#xBC0F; MMP 2, MMP 3 MMP 9&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. G17 &#xC2B9;&#xC9C4; chorioallantoic &#xB9C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xBC0F; MVD&#xB294; hypergastrinaemic APC(Min) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; premalignant &#xD070; &#xCC3D; &#xC790; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C;. &#xC784;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD669;&#xC758; &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC7A5; adenocarcinomas &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC815;&#xC0C1; &#xC810; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; MVD &#xD658;&#xC790; &#xD608; &#xCCAD; gastrin &#xB808;&#xBCA8;&#xACFC; HB EGF &#xC2DD; &#xC0C1;&#xAD00;. Gastrin &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;, CCK-2R&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xAE30; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xD608;&#xAD00; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654;. &#xC774; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC2DD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; HB EGF&#xC758; &#xD758;&#xB9AC;&#xAE30;. &#xC774; proangiogenic &#xD6A8;&#xACFC; in vivo&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD669;&#xC744; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558; &#xACE0; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; gastrin &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294; tumorigenic &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Gastrin &#xD5E4; &#xD30C; &#xB9B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC19;&#xC740; &#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; angiogenic &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Este estudio examinada si la gastrina modula la actividad de las c&eacute;lulas endoteliales mediante la expresi&oacute;n del factor de crecimiento epid&eacute;rmico de factor de crecimiento similar en heparina (HB-EGF). C&eacute;lulas endoteliales vasculares umbilicales humanas (HUVEC) evaluaron la formaci&oacute;n del t&uacute;bulo en presencia de amidated gastrina-17 (G17) y extendido de glicina gastrina-17 (GlyG17) p&eacute;ptidos. Expresiones de genes y prote&iacute;nas de HB-EGF se midieron por transcripci&oacute;n reversa-PCR cuantitativa, inmunocitoqu&iacute;mica, Western Blot y HB-EGF vertimiento por ELISA. Metaloproteinasas MMP-9, MMP-2 y MMP-3 fueron evaluadas por Western Blot. Polluelo membranas corioalantoideas estudios midieron la in vivo potencial angiog&eacute;nico de gastrina y microvasos densidad (MVD) se evalu&oacute; en grandes lesiones premalignas intestinales de ratones de APC(Min) de hypergastrinaemic. MVD tambi&eacute;n fue examinado en normals margen colorrectales humanos del tumor y la resecci&oacute;n y correlacionado con los niveles de gastrina de suero-amidated (mediante RIA) y expresi&oacute;n de la prote&iacute;na de HB-EGF (mediante inmunohistoqu&iacute;mica). C&eacute;lulas HUVEC demostraron la formaci&oacute;n creciente del t&uacute;bulo y nodo ante G17 (186%, P &lt; 0.0005) y GlyG17 (194%, P &lt; 0.0005). Esto fue bloqueada por los antagonistas del receptor de colecistoquinina-2 (CCK-2R) JB95008 y JMV1155 y por el antisuero gastrina y HB-EGF. P&eacute;ptidos gastrina aumentaron la secreci&oacute;n de expresi&oacute;n/prote&iacute;na de gene HB-EGF en HUVEC y microvasos-producidas por c&eacute;lulas endoteliales y los niveles de MMP-9, MMP-2 y MMP-3. G17 foment&oacute; la angiog&eacute;nesis en un ensayo de membranas corioalantoideas y MVD fue significativamente elevado en premaligna grande del tejido intestinal de ratones de APC(Min) de hypergastrinaemic. En cuanto a la situaci&oacute;n cl&iacute;nica, MVD en la mucosa normal que rodea los adenocarcinomas colorrectales correlacionada con los niveles del suero del paciente gastrin y expresi&oacute;n de HB-EGF. P&eacute;ptidos gastrina, actuando a trav&eacute;s de la CCK-2R, mejoran la actividad de las c&eacute;lulas endoteliales en los modelos de la angiog&eacute;nesis. Esto puede ser mediado a trav&eacute;s de la expresi&oacute;n realzada y derramamiento de HB-EGF, posiblemente como resultado de mayor actividad de las metaloproteinasas de la matriz. Este efecto proangiog&eacute;nico se traduce en la situaci&oacute;n in vivo y humana y puede aumentar las propiedades tumor&iacute;gena atribuibles a p&eacute;ptidos gastrina en malignidad.

Gastrina aumenta el potencial angiog&eacute;nico de c&eacute;lulas endoteliales mediante la modulaci&oacute;n del factor de crecimiento epid&eacute;rmico tipo de heparina.

&#x54EA;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8C03;&#x8282;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x4E00;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x5C42;&#x9540;&#x827E;&#x7279;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x51DD;&#x80F6;&#x4ECE;&#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D82;&#x73E0;&#x7EA6; 2.5 m m&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x53EF;&#x4ECE; 2.5 &#x5230; 10 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x4E09;&#x500D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x77E9;&#x9635;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x6D88;&#x9664;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F3A;&#x52B2;&#x5E26;&#x8840;&#x7BA1;&#x8482;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x529F;&#x80FD;&#x543B;&#x5408;&#x7684;&#x690D;&#x5165;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x690D;&#x5165;&#x5C0F;&#x9F20;&#x514D;&#x75AB;&#x53D7;&#x635F;&#x65F6;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x3002;&#x5BC6;&#x77E9;&#x9635;&#x786E;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x523A;&#x6FC0;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#xFF1A; &#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x808C;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x57FA;&#x8D28;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E0D;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86;&#x5BC6;&#x96C6;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x91CF;&#x5316;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x7684;&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178;-&#x8461;&#x805A;&#x7CD6; (&#x5206;&#x5B50;&#x8D28;&#x91CF; 10&#x3001; 40&#x3001; 70 &#x548C; 150 kDa) &#x900F;&#x9732;&#x4E24;-&#x4E09;&#x500D;&#x51CF;&#x5C11; 10 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x77E9;&#x9635;&#x5185;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x77E9;&#x9635;&#x7684; proangiogenic &#x6E90; (&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x901A;&#x8FC7;&#x514B;&#x670D;&#x7531;&#x4E8E;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x8DDD;&#x79BB;&#x6B64;&#x6269;&#x6563;&#x9650;&#x5236;&#x523A;&#x6FC0;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4EE5;&#x524D;&#x66FE;&#x67E5;&#x51FA;&#x77E9;&#x9635;&#x521A;&#x5EA6;&#x548C;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x6269;&#x6563;&#x9650;&#x5236;&#x9650;&#x5236;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x77E9;&#x9635;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7BA1;&#x5236;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

The means by which extracellular matrix density regulates three-dimensional capillary morphogenesis is unclear. To study this phenomenon, we utilized a fibrin-based in vitro assay in which a fibroblast monolayer is plated atop a fibrin gel approximately 2.5 mm away from endothelial cell-coated beads within the matrix. Increasing fibrin density from 2.5 to 10 mg/ml resulted in a threefold reduction in capillary network formation. However, distributing fibroblasts throughout the matrix completely eliminated this inhibitory effect, resulting in robustly vascularized matrices suitable for in vivo applications, as functional anastomoses formed between the implanted tissues and host vasculature when implanted into immune-compromised mice. Dense matrices did not stimulate fibroblast-mediated matrix remodeling: differentiation into myofibroblasts, matrix production, and protease secretion were not enhanced by the dense condition. Instead, quantifying diffusivity of FITC-dextran (molecular mass 10, 40, 70, and 150 kDa) through fibrin revealed a two- to threefold decrease within the 10 mg/ml matrices. Thus, distributing a proangiogenic source (fibroblasts) throughout the matrix stimulates capillary network formation by overcoming this diffusion restriction due to significantly reduced diffusion distances. Although roles for matrix stiffness and ligand binding density have previously been identified, our results emphasize the importance of diffusion restrictions in limiting capillary morphogenesis.

The effect of matrix density on the regulation of 3-D capillary morphogenesis.

Les moyens par lesquels la densit&#xE9; de la matrice extracellulaire r&#xE9;gule en trois dimensions la morphogen&#xE8;se capillaire n&#x26;#39;est pas claire. Pour &#xE9;tudier ce ph&#xE9;nom&#xE8;ne, nous avons utilis&#xE9; une base de fibrine test in vitro dans lequel une monocouche de fibroblastes est plaqu&#xE9; au sommet d&#x26;#39;un gel de fibrine d&#x26;#39;environ 2,5 mm de cellules endoth&#xE9;liales des billes rev&#xEA;tues dans la matrice. Augmentation de la densit&#xE9; de fibrine &#xE0; partir 2,5 &#xE0; 10 mg / ml entra&#xEE;n&#xE9; dans une triple r&#xE9;duction de la formation du r&#xE9;seau capillaire. Toutefois, les fibroblastes de distribution &#xE0; travers la matrice compl&#xE8;tement &#xE9;limin&#xE9; cet effet inhibiteur, r&#xE9;sultant dans des matrices vascularis&#xE9;es avec vigueur appropri&#xE9;s pour des applications in vivo, comme anastomoses fonctionnelles form&#xE9; entre les tissus implant&#xE9;s et le syst&#xE8;me vasculaire d&#x26;#39;accueil lors de leur implantation dans des souris immunod&#xE9;prim&#xE9;es. Matrices denses n&#x26;#39;a pas stimul&#xE9; fibroblastes m&#xE9;di&#xE9;e par remodelage de la matrice: la diff&#xE9;renciation en myofibroblastes, la production de matrice, et la s&#xE9;cr&#xE9;tion de prot&#xE9;ase n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; renforc&#xE9;e par la condition dense. Au lieu de cela, la quantification de la diffusivit&#xE9; de FITC-dextran (masse mol&#xE9;culaire 10, 40, 70 et 150 kDa) par le biais de fibrine a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; un deux &#xE0; trois fois de diminuer au cours des 10 mg / ml matrices. Ainsi, la distribution d&#x26;#39;une source pro-angiog&#xE9;nique (fibroblastes) dans la matrice stimule la formation du r&#xE9;seau capillaire en surmontant cette restriction de diffusion en raison des distances de diffusion r&#xE9;duit de fa&#xE7;on significative. Bien que les r&#xF4;les pour matrice de rigidit&#xE9; et de la densit&#xE9; de liaison de ligand ont d&#xE9;j&#xE0; &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s, nos r&#xE9;sultats soulignent l&#x26;#39;importance des restrictions de diffusion dans la limitation de la morphogen&#xE8;se capillaire.

L&#x26;#39;effet de la densit&#xE9; de la matrice sur le r&#xE8;glement de la 3-D morphogen&#xE8;se capillaire

Die Mittel, durch welche extrazellul&auml;re, die Matrix Dichte dreidimensionale Kapillar Morphogenese regelt, ist unklar. Um dieses Ph&auml;nomen zu erforschen, genutzt wir ein Fibrin-basierte in vitro Tests, in denen eine Fibroblasten Monolage auf einem Fibrin-Gel ca. 2,5 mm entfernt von endothelial Zelle-beschichtete Perlen innerhalb der Matrix plattiert ist. Erh&ouml;hung Fibrin Dichte von 2,5 bis 10 mg/ml ergab eine dreifache Reduzierung Kapillar Netzwerkbildung. Allerdings Verteilen von Fibroblasten in der gesamten Matrix vollst&auml;ndig beseitigt dieser hemmende Effekt, wodurch robust gef&auml;&szlig;reichen Matrizen f&uuml;r in-vivo Anwendungen geeignet, als funktionale anastomosiert gebildeten zwischen der implantierten Gewebe und Host Gef&auml;&szlig;system wenn in immun-gef&auml;hrdet M&auml;use implantiert. Nicht zu Dichte Matrizen Matrix Fibroblast-vermittelte Umbau: Differenzierung in Myofibroblasts, Matrix-Produktion und Protease-Sekretion nicht durch den dichten Zustand erh&ouml;ht. Stattdessen offenbart Quantifizierung Diffusionsverm&ouml;gen des FITC-Dextran (molare Masse 10, 40, 70 und 150 kDa) durch Fibrin eine zwei-bis dreifache Abnahme innerhalb der 10 mg/ml-Matrizen. Somit stimuliert die Verteilung einer Proangiogenic Quelle (Fibroblasten) in der gesamten Matrix Kapillar Netzwerkbildung durch diese Einschr&auml;nkung der Verbreitung durch deutlich reduzierten Verbreitung Distanzen &uuml;berwinden. Obwohl Rollen f&uuml;r Matrix Steifigkeit und Ligand-Bindung Dichte zuvor identifiziert wurden, betonen unsere Ergebnisse Verbreitung Einschr&auml;nkungen bei der Begrenzung der Kapillare Morphogenese.

Die Wirkung der Matrix-Dichte &uuml;ber die Regulierung der 3-d Kapillar Morphogenese.

I mezzi di cui matrice extracellulare densit&agrave; regola la morfogenesi capillare tridimensionale non sono chiaro. Per studiare questo fenomeno, abbiamo utilizzato un&#39;analisi in vitro basati su fibrina in cui un monostrato di fibroblasti &egrave; placcato in cima a un gel di fibrina circa 2,5 mm dalla perline rivestite di cellule endoteliali all&#39;interno della matrice. Aumentando la densit&agrave; di fibrina da 2,5 a 10 mg/ml ha provocato una riduzione triplice formazione rete capillare. Tuttavia, distribuzione di fibroblasti in tutta la matrice completamente eliminato questo effetto inibitorio, con conseguente robustamente vascolarizzati matrici adatto per applicazioni in vivo, come funzionale anastomizza formato tra i tessuti impiantati e vascolarizzazione host quando impiantati in topi immunitario compromesso. Matrici dense ha fatto non stimolare il fibroblasto-mediata matrice rimodellamento: differenziazione in miofibroblasti, matrice produzione e secrezione di proteasi non sono stati rafforzati dalla condizione densa. Invece, quantificando la diffusivit&agrave; di FITC-Destrano (massa molecolare 10, 40, 70 e 150 kDa) attraverso la fibrina rivelato un due-a triplice diminuzione entro le matrici di 10 mg/ml. Cos&igrave;, distribuendo una fonte proangiogenic (fibroblasti) in tutta la matrice stimola la formazione di rete capillare di superare questa limitazione di diffusione a causa di distanze di diffusione significativamente ridotta. Anche se in precedenza sono stati identificati ruoli per matrice rigidezza e densit&agrave; di legame del ligando, i nostri risultati enfatizzano l&#39;importanza delle limitazioni di diffusione nel limitare la morfogenesi capillare.

L&#39;effetto della densit&agrave; della matrice sulla regolamentazione della morfogenesi capillare 3D.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x304C;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x6BDB;&#x7D30;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6BB5;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5185;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x88AB;&#x8986;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x304B;&#x3089;&#x7D04;2.5&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x5C64;&#x304C;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x4E0A;&#x306B;&#x64AD;&#x7A2E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;in vitro&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2.5&#x304B;&#x3089;10 mg / ml&#x306E;&#x304B;&#x3089;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x6BDB;&#x7D30;&#x8840;&#x7BA1;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x500D;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x884C;&#x5217;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x914D;&#x5E03;&#x3059;&#x308B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x884C;&#x5217;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x529B;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x543B;&#x5408;&#x304C;&#x79FB;&#x690D;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x8840;&#x7BA1;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;&#x5BC6;&#x884C;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#xFF1A;&#x7B4B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x7523;&#x751F;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7DFB;&#x5BC6;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;FITC-&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#xFF08;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;10&#x3001;40&#x3001;70&#x3001;150 kDa&#xFF09;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;2&#x301C;&#x4E09;&#x91CD;&#x306E;10 mg / ml&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5185;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#xFF08;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3092;&#x914D;&#x5E03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;&#x8DDD;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x3066;&#x6BDB;&#x7D30;&#x8840;&#x7BA1;&#x7DB2;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x525B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6BDB;&#x7D30;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x62E1;&#x6563;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

3-D&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; morphogenesis &#xC758;&#xBBF8; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD604;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xCE35; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC12C;&#xC720; &#xC18C; &#xC824; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF54;&#xD305; &#xAD6C;&#xC2AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D; 2.5 m m &#xB3C4;&#xAE08;&#xC740; &#xC12C;&#xC720; &#xC18C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC12C;&#xC720; &#xC18C; &#xBC00;&#xB3C4; 2.5&#xC5D0;&#xC11C; 10mg/ml &#xC99D;&#xAC00; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC0BC; &#xBC30; &#xAC10;&#xC18C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xBC30;&#xD3EC; &#xC81C;&#xAC70;&#xC774; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;, &#xD2BC;&#xD2BC;&#xD558;&#xAC8C; vascularized &#xD589;&#xB82C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; anastomoses &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC950;&#xC5D0; &#xC774;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD608;&#xAD00; &#xC0AC;&#xC774;. &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; fibroblast &#xC911;&#xC7AC; &#xAC1C;&#xC7A5;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;: myofibroblasts, &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84; &#xBE44;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC15;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;&#xC5D0;, &#xC12C;&#xC720; &#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; FITC-dextran (&#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9; 10, 40, 70, &#xBC0F; 150 kDa)&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; 2-10 mg/ml &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0BC; &#xBC30; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;,&#xC774; &#xBCF4;&#xAE09; &#xC81C;&#xD55C; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xD655;&#xC0B0; &#xAC70;&#xB9AC;&#xB97C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; proangiogenic &#xC18C;&#xC2A4; (&#xAC8C;&#xC7AC;) &#xBC30;&#xD3EC;. &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xAC15;&#xC131;&#xACFC; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC00;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; morphogenesis &#xC81C;&#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xC81C;&#xD55C;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; morphogenesis &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

El medio por el cual la densidad de la matriz extracelular regula tridimensional morfog&#xE9;nesis capilar no est&#xE1; claro. Para estudiar este fen&#xF3;meno, se utiliz&#xF3; un fibrina-basado en ensayo in vitro en el que una monocapa de fibroblastos se sembraron sobre un gel de fibrina aproximadamente 2,5 mm de distancia de endoteliales recubiertas por c&#xE9;lulas perlas dentro de la matriz. El aumento de la densidad de fibrina a partir de 2,5 a 10 mg / ml result&#xF3; en una reducci&#xF3;n de tres veces en la formaci&#xF3;n de la red capilar. Sin embargo, los fibroblastos que distribuyen en toda la matriz completamente eliminado este efecto inhibitorio, resultando en s&#xF3;lida entre las matrices vascularizados adecuados para aplicaciones in vivo, como anastomosis funcionales formado entre los tejidos implantados y la vasculatura hu&#xE9;sped cuando se implanta en ratones inmunodeprimidos. Matrices densas no estimula los fibroblastos mediada remodelaci&#xF3;n de la matriz: la diferenciaci&#xF3;n en miofibroblastos, la producci&#xF3;n de la matriz, y la secreci&#xF3;n de la proteasa, no se vieron realzados por la condici&#xF3;n densa. En su lugar, la cuantificaci&#xF3;n de la difusividad de FITC-dextrano (peso molecular 10, 40, 70 y 150 kDa) a trav&#xE9;s de fibrina revel&#xF3; una de dos a tres veces disminuir dentro de los 10 mg / ml de las matrices. As&#xED;, la difusi&#xF3;n de una fuente proangiog&#xE9;nico (fibroblastos) por toda la matriz estimula la formaci&#xF3;n de la red capilar por superar esta restricci&#xF3;n difusi&#xF3;n debido a las distancias de difusi&#xF3;n significativamente reducidos. Aunque los roles de matriz de rigidez y la densidad de la uni&#xF3;n del ligando han sido previamente identificados, los resultados enfatizan la importancia de las restricciones de difusi&#xF3;n en la limitaci&#xF3;n de la morfog&#xE9;nesis capilar.

El efecto de la densidad de la matriz sobre la regulaci&#xF3;n de 3-D de la morfog&#xE9;nesis capilar

&#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x6B32;&#x671B;&#xFF1A; &#x5973;&#x540C;&#x6027;&#x604B;&#x8005;&#x6027;&#x884C;&#x4E3A;&#x4EE5;&#x6492; de Benserade &#x8C46;&#x7C7B;&#x4E2D;&#x7684; et Iante (1634)&#x3002;

Disruptive desires: lesbian sexuality in Isaac de Benserade's Iphis et Iante (1634).

D&eacute;sirs perturbateurs : la sexualit&eacute; lesbienne Iphis de Isaac de Benserade et Iante (1634).

St&ouml;rende W&uuml;nsche: lesbische Sexualit&auml;t in Isaac de Benserade Iphis et Iante (1634).

Desideri dirompente: sessualit&agrave; lesbica in IFI di Isaac de Benserade et Iante (1634).

&#x7834;&#x58CA;&#x7684;&#x306A;&#x6B32;&#x671B;&#xFF1A; &#x30EC;&#x30BA;&#x30D3;&#x30A2;&#x30F3;&#x306E;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3; &#x30A2;&#x30A4;&#x30B6;&#x30C3;&#x30AF; &#x30C7; &#x30D0;&#x30F3;&#x30B9;&#x30E9;&#x30FC;&#x30C9; Iphis et Iante (1634)&#x3002;

&#xD30C;&#xAD34;&#xC801;&#xC778; &#xC695;&#xB9DD;:&#xC774; &#xC0AD; &#xB4DC; Benserade Iphis&#xC5D0;&#xC11C; &#xB808;&#xC988;&#xBE44;&#xC5B8; &#xC131;&#xC695; &#xC678; Iante (1634).

Deseos perturbadores: sexualidad l&eacute;sbica en Iphis de Isaac de Benserade et Iante (1634).

&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6587;&#x5B66;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x54EA;&#x4E9B;&#x5316;&#x9A8C;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#x7684; ED &#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E09;&#x5341;&#x516D;&#x4E2A;&#x76F8;&#x5173;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x662F;&#x6210;&#x4EBA;&#x53CA;&#x513F;&#x79D1;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#xFF0C;&#x5E74;&#x9F84;&#x8C03;&#x6574;&#x6B63;&#x5E38;&#x8840;&#x6C89; &#xFF08;ESR&#xFF09; &#x548C; C-&#x53CD;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D; (CRP) &#x6000;&#x7591;&#x60A3;&#x8005; &lt; &#x5411; 5 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5347;&#x5E94;&#x4FDD;&#x8BC1;&#x4E34;&#x5E8A;&#x533B;&#x5E08;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7D27;&#x6025;&#x8C03;&#x67E5;&#x6240;&#x9700;&#x3002;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#x6216;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6000;&#x7591;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x7535;&#x6E23;&#x91CD;&#x7194;&#x6216; CRP &#x7684;&#x5371;&#x9669;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x60A3;&#x8005; &lt; 5 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5347;&#x4E0D;&#x5E94;&#x6392;&#x9664;&#x8BCA;&#x65AD;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x5728;&#x60A3;&#x8005;&#x7A7F;&#x523A;&#x4F24;&#x53E3;&#x6216;&#x8DB3;&#x90E8;&#x6E83;&#x75A1; / &#x611F;&#x67D3;.&#x4EFB;&#x4F55;&#x6000;&#x7591;&#x7684;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x5426;&#x5219;&#x65E0;&#x6CD5;&#x89E3;&#x91CA;&#x7535;&#x6E23;&#x91CD;&#x7194; &gt; 30 mm/h &#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; CRP &gt; &#x5219;&#x9700;&#x8981; 10-30 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5347;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x660E;&#x786E;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x767D;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x4E0D;&#x662F;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x5F88;&#x6709;&#x5E2E;&#x52A9;&#x7684;&#x3002;

&#x5728;&#x6025;&#x8BCA;&#x79D1;&#x53EF;&#x80FD;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x708E;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x8C03;&#x67E5;&#x6709;&#x591A;&#x4E48;&#x6709;&#x7528;&#xFF1F;

We conducted a literature review to determine which laboratory investigations are useful for the ED evaluation of osteomyelitis. Thirty-six relevant papers were identified. We concluded that in adult and paediatric patients with a clinically low level of suspicion of osteomyelitis, an age-adjusted normal erythrocyte sedimentation rate (ESR) and C-reactive protein (CRP) <5 mg/L should reassure the clinician that no further urgent investigation is required. For patients with risk factors for osteomyelitis or a clinically high level of suspicion, a normal ESR or CRP <5 mg/L should not rule out the diagnosis of osteomyelitis, especially in patients with puncture wounds or foot ulcers/infections. In patients with any suspicion of osteomyelitis and otherwise unexplained ESR >30 mm/h and/or CRP >10-30 mg/L further definitive investigation is required. The white blood count is not helpful in the evaluation of osteomyelitis.

How useful are laboratory investigations in the emergency department evaluation of possible osteomyelitis?

Nous avons effectu&eacute; une revue de la litt&eacute;rature afin de d&eacute;terminer quels examens de laboratoire sont utiles pour l&#39;&eacute;valuation de l&#39;ED de l&#39;ost&eacute;omy&eacute;lite. Trente-six documents pertinents ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s. Nous avons conclu que chez les patients adultes et p&eacute;diatriques, avec un niveau faible sur le plan clinique de suspicion de l&#39;ost&eacute;omy&eacute;lite, une ajust&eacute; selon l&#39;&acirc;ge normal vitesse de s&eacute;dimentation (ESR) et la prot&eacute;ine C - r&eacute;active (CRP) &lt; 5 mg/L doit rassurer le clinicien qu&#39;aucune autre enqu&ecirc;te urgente est requise. Pour les patients ayant des facteurs de risque pour ost&eacute;omy&eacute;lite ou d&#39;un niveau &eacute;lev&eacute; sur le plan clinique de suspicion, un ESR ou une CRP normale &lt; 5 mg/L ne devrait pas exclure le diagnostic d&#39;ost&eacute;omy&eacute;lite, particuli&egrave;rement dans les patients avec perforation des plaies ou ulc&egrave;res du pied / infections. Chez les patients atteints de toute suspicion d&#39;ost&eacute;omy&eacute;lite et inexpliqu&eacute;e autrement ESR &gt; 30 mm/h et/ou CRP &gt; enqu&ecirc;te d&eacute;finitive 10 &agrave; 30 mg/L est n&eacute;cessaire. La num&eacute;ration formule sanguine blanche n&#39;est pas utile dans l&#39;&eacute;valuation de l&#39;ost&eacute;omy&eacute;lite.

Comment utiles sont les examens de laboratoire dans l&#39;&eacute;valuation du service des urgences d&#39;ost&eacute;omy&eacute;lite possible ?

Wir f&uuml;hrten eine Literaturrecherche, um festzustellen, welche Laboruntersuchungen n&uuml;tzlich ist f&uuml;r die ED-Auswertung der Osteomyelitis sind. Sechsunddrei&szlig;ig relevanten Papiere wurden identifiziert. Wir abgeschlossen, die bei Erwachsenen und p&auml;diatrischen Patienten mit klinisch niedrigem Verdacht auf Osteomyelitis, eine altersbereinigte normale Blutsenkungsgeschwindigkeit (ESR) und C - reaktives Protein (CRP) &lt; 5 mg/L sollte dem Kliniker beruhigen, dass keine weiteren dringenden Untersuchung erforderlich ist. F&uuml;r Patienten mit Risikofaktoren f&uuml;r Osteomyelitis oder ein klinisch hohes Ma&szlig; an Misstrauen, eine normale ESR oder CRP &lt; 5 mg/L sollte nicht ausschlie&szlig;en, die diagnose einer Osteomyelitis, vor allem in patienten mit punktion wunden oder geschw&uuml;re fu&szlig; / infektionen. Bei patienten mit jeder verdacht einer Osteomyelitis und sonst unerkl&auml;rliche ESR &gt; 30 mm/h und/oder CRP &gt; 10-30 mg/L weitere definitive Untersuchung ist erforderlich. Das wei&szlig;e Blutbild ist nicht hilfreich bei der Beurteilung von Osteomyelitis.

Wie n&uuml;tzlich sind Laboruntersuchungen in der Notaufnahme-Bewertung der m&ouml;glichen Osteomyelitis?

Abbiamo condotto una revisione della letteratura per determinare quali indagini di laboratorio sono utili per la valutazione ED di osteomielite. Trentasei documenti pertinenti sono stati identificati. Abbiamo concluso che in pazienti adulti e pediatrici con un livello di sospetto di osteomielite, un&#39;et&agrave;-regolato normale velocit&agrave; di eritrosedimentazione (VES) e proteina C - reattiva (CRP) clinicamente basso &lt; 5 mg/L dovrebbe rassicurare il clinico che nessuna ulteriore indagine urgente &egrave; necessaria. Per i pazienti con fattori di rischio per osteomielite o un livello di sospetto, una normale ESR o CRP clinicamente elevato &lt; 5 mg/L non dovrebbe escludere la diagnosi di osteomielite, specialmente in pazienti con ferite di puntura o ulcere del piede / infezioni. In pazienti con sospetto di osteomielite e altrimenti inspiegabile ESR &amp;gt; 30 mm/h e/o CRP &amp;gt; ulteriori indagini definitivo 10-30 mg/L sono necessaria. Il conteggio di anima bianco non &egrave; utile nella valutazione di osteomielite.

ArticleTotal : 5	Year
Publication title Cited by 14	2007
Publication title Cited by 25	2007
Publication title Cited by 19	2007
Publication title Cited by 16	2018
Publication title Cited by 16	2019

Article	Year
Identification and confirmation of a module of coexpressed genes. Genome research\| PubMed ID: 12368243	2002
Construction of a Tc1-like transposon Sleeping Beauty-based gene transfer plasmid vector for generation of stable transgenic mammalian cell clones. Analytical biochemistry\| PubMed ID: 12413468	2002
p62 overexpression in breast tumors and regulation by prostate-derived Ets factor in breast cancer cells. Oncogene\| PubMed ID: 12700667	2003
Altered Sonic hedgehog signaling is associated with morphological abnormalities in the penis of the BB/WOR diabetic rat. Biology of reproduction\| PubMed ID: 12748119	2003
An antiapoptotic role for gastrin and the gastrin/CCK-2 receptor in Barrett's esophagus. Cancer research\| PubMed ID: 15026323	2004
Identification of the protein Zibra, its genomic organization, regulation, and expression in breast cancer cells. Experimental cell research\| PubMed ID: 15093743	2004
Post-translationally modified S12, absent in transformed breast epithelial cells, is not associated with the 26S proteasome and is induced by proteasome inhibitor. International journal of cancer. Journal international du cancer\| PubMed ID: 15221960	2004
The biological and therapeutic importance of gastrin gene expression in pancreatic adenocarcinomas. Cancer research\| PubMed ID: 15313900	2004
Surface plasmon resonance-based sensors to identify cis-regulatory elements. Analytical chemistry\| PubMed ID: 15538776	2004
Gastrin enhances the angiogenic potential of endothelial cells via modulation of heparin-binding epidermal-like growth factor. Cancer research\| PubMed ID: 16585174	2006
The effect of matrix density on the regulation of 3-D capillary morphogenesis. Biophysical journal\| PubMed ID: 17993494	2008
Disruptive desires: lesbian sexuality in Isaac de Benserade's Iphis et Iante (1634). Seventeenth-century French studies\| PubMed ID: 19489181	2002
How useful are laboratory investigations in the emergency department evaluation of possible osteomyelitis? Emergency medicine Australasia : EMA\| PubMed ID: 21668719	2011
Sandwich masking eliminates both visual awareness of faces and face-specific brain activity through a feedforward mechanism. Journal of vision\| PubMed ID: 21669859	2011

Joseph Harris

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