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Visualizing Cell-to-cell Transfer of HIV using Fluorescent Clones of HIV and Live Confocal Microscopy

By fusing the green fluorescent protein to their favorite proteins, biologists now have the ability to study living complex cellular processes using ...

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A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion

This assay is designed to specifically report on HIV-1 fusion via the expression of green fluorescent protein (GFP) detectable by flow cytometry or ...

Mount Sinai School of Medicine 

Icahn School of Medicine at Mount Sinai, Immunology Institute

&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; T1 &#x8868;&#x793A;&#x5141;&#x8BB8;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x6761;&#x76EE;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x652F;&#x6301;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x9A6C;&#x4EE3;&#x66FF;&#x975E;&#x540C;&#x6E90;&#x77E9;&#x9635; (MA) &#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x88C5;&#x914D;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5D4C;&#x5408;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x643A;&#x5E26;&#x5C1A;&#x672A;&#x6709;&#x7A77;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8865;&#x5145;&#x5927;&#x4F1A;&#x548C;&#x5728;&#x6307;&#x5B9A; SHIV(MA) &#x7684;&#x5D4C;&#x5408;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3; SIV MAC239 &#x4ECE;&#x540C;&#x6E90;&#x9A6C;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; SHIV(MA) &#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x4EA7;&#x751F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x672C;&#x673A;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x65F6;&#x5165;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x67D3;&#x3002;SHIV(MA) &#x5C55;&#x54C1;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x884C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x590D;&#x5236;&#x5728; MT4 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5DEE; Jurkat &#x7EC6;&#x80DE;&#x7531;&#x4E8E;&#x4E0E; Hiv-1 &#x4E0D;&#x517C;&#x5BB9;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x590D;&#x5236;&#x3002;SHIV(MA) &#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x7F3A;&#x9677;&#x4E0E;&#x65E0;&#x58F0; G pseudotyping &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x622A;&#x65AD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684; Env &#x5C3E;&#x90E8;&#x89E3;&#x6551;&#x51FA;&#x6765;&#x3002;SHIV(MA) Jurkat &#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EA7;&#x751F;&#x53D8;&#x79CD;&#x4E0E;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684; Env &#x7EB3;&#x5165;&#x548C;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684; Jurkat &#x4E2D;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x7B97;&#x6CD5;&#x7684; TXC 3T3 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x6216;&#x7269;&#x79CD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#xFF0C;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E0E;&#x9A6C;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x5176;&#x517C;&#x5BB9; Env &#x6548;&#x7387;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#xFF0C;SIV/&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5F00;&#x53D1;&#x3002;

&#x5D4C;&#x5408;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x5305;&#x542B; SIV &#x77E9;&#x9635;&#x5C55;&#x793A;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x5927;&#x4F1A;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x76F8;&#x5173;&#x65B9;&#x5F0F;&#x590D;&#x5236;&#x3002;

Murine fibroblasts expressing viral receptors and human cyclin T1 allow HIV-1 entry and viral gene expression but do not support efficient assembly. A chimeric HIV-1 carrying a non-homologous matrix (MA) from murine leukemia virus in place of HIV-1 MA can assemble efficiently in murine cells, yet has poor infectivity. Here, we assess the ability of a homologous MA from SIV MAC239 to complement assembly and infection in chimeric viruses designated SHIV(MA). The resulting SHIV(MA) chimeras produce more virus than native HIV-1 when transfected into murine cells. SHIV(MA) exhibits cell-type-specific replication in human T cell lines, replicating well in MT4 cells and poorly in Jurkat cells due to an incompatibility with the HIV-1 Env. The infectivity defects of SHIV(MA) are rescued by pseudotyping with VSV-G but not by truncation of the cytoplasmic tail of Env. Passage of SHIV(MA) in Jurkat cells produces variants with improved Env incorporation and improved replication in Jurkat but not in 3T3 TXC cells. The results indicate that cell-type-specific, or species-specific, host factors interact with MA to modulate the efficiency of assembly and its compatibility with Env. With additional selection, SIV/HIV-1 chimeras may be useful for the development of murine models of lentiviral infection.

Chimeric HIV-1 containing SIV matrix exhibit enhanced assembly in murine cells and replicate in a cell-type-dependent manner in human T cells.

Fibroblastes murins exprimant des r&#xE9;cepteurs viraux et T1 cycline de l&#x26;#39;homme permettent l&#x26;#39;entr&#xE9;e du VIH-1 et d&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes viraux, mais ne prend pas en charge assemblage efficace. Un chim&#xE8;re VIH-1 portant une matrice non homologue (MA) du virus de la leuc&#xE9;mie murine &#xE0; la place de VIH-1 MA peut assembler efficacement dans les cellules murines, encore pr&#xE9;sente infectivit&#xE9; pauvre. Ici, nous &#xE9;valuons la capacit&#xE9; d&#x26;#39;un homologue ma&#xEE;trise de MAC239 SIV pour compl&#xE9;ter l&#x26;#39;assemblage et l&#x26;#39;infection au virus chim&#xE9;riques d&#xE9;sign&#xE9;s SHIV (MA). Les r&#xE9;sultant Shiv (MA) de produire des chim&#xE8;res plus de virus que natif du VIH-1 quand elles sont transfect&#xE9;es dans les cellules murines. SHIV (MA) pr&#xE9;sente un type de cellule sp&#xE9;cifique de r&#xE9;plication dans des lign&#xE9;es de cellules T, reproduisant ainsi dans les cellules MT4 et mal dans les cellules Jurkat en raison d&#x26;#39;une incompatibilit&#xE9; avec le VIH-1 Env. Les d&#xE9;fauts d&#x26;#39;infectiosit&#xE9; de SHIV (MA) sont sauv&#xE9;s par pseudotypage avec VSV-G, mais pas par troncature de la queue cytoplasmique de Env. Passage de SHIV (MA) dans les cellules Jurkat produit des variantes avec l&#x26;#39;incorporation Env am&#xE9;lioration et la r&#xE9;plication am&#xE9;lior&#xE9;e dans Jurkat, mais pas dans les cellules 3T3 TXC. Les r&#xE9;sultats indiquent que la cellule-type sp&#xE9;cifique, ou sp&#xE9;cifique &#xE0; l&#x26;#39;esp&#xE8;ce, facteurs de l&#x26;#39;h&#xF4;te d&#x26;#39;interagir avec MA pour moduler l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de l&#x26;#39;assemblage et sa compatibilit&#xE9; avec Env. Avec une s&#xE9;lection suppl&#xE9;mentaire, chim&#xE8;res SIV/HIV-1 peut &#xEA;tre utile pour le d&#xE9;veloppement de mod&#xE8;les murins d&#x26;#39;infection lentiviral.

Chim&#xE9;rique VIH-1 contenant de l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e SIV pi&#xE8;ce matrice renforc&#xE9;e dans les cellules murines et se r&#xE9;pliquer dans une cellule de type Mode-d&#xE9;pendante dans les cellules T humaines

Murine Fibroblasten virale Rezeptoren und menschlichen cyclin T1 Ausdr&uuml;cken k&ouml;nnen HIV-1 Eintrag und virale Genexpression aber unterst&uuml;tzen keine effiziente Montage. Ein Chim&auml;rer HIV-1 ausf&uuml;hren, die eine nicht-homologe murine Leuk&auml;mievirus anstelle von HIV-1 MA-Matrix (MA) in murinen Zellen effizient zusammenstellen kann noch hat schlechte Infektiosit&auml;t. Hier bewerten wir die F&auml;higkeit eine homologe MA von SIV MAC239, Montage- und Infektion in Chim&auml;ren Viren benannten SHIV(MA) zu erg&auml;nzen. Die resultierenden SHIV(MA)-Chim&auml;ren produzieren mehr Virus als native HIV-1, wenn die in murinen Zellen transfected. Shiv(MA) Exponate zellspezifische-Typ-Replikation in menschlichen T-Zell-Linien, in MT4-Zellen gut und schlecht in Jurkat Zellen aufgrund einer Inkompatibilit&auml;t mit der HIV-1-Env zu replizieren. Infektiosit&auml;t M&auml;ngel der SHIV(MA) werden durch Pseudotypisierung mit VSV-G, aber nicht durch Abschneiden der zytoplasmatischen Schwanz der Env gerettet. Durchgang von SHIV(MA) in Jurkat-Zellen produziert Varianten mit verbesserten Env-Gr&uuml;ndung und verbesserte Replikation in Jurkat aber nicht in TXC-3T3-Zellen. Die Ergebnisse zeigen, dass zellspezifische-Typ, oder artspezifische, Host Faktoren einwirken, MA, die Effizienz der Versammlung und die Kompatibilit&auml;t mit Env modulieren. Mit zus&auml;tzlichen Auswahl n&uuml;tzlich SIV/HIV-1-Chim&auml;ren f&uuml;r die Entwicklung des murinen Modelle von Lentiviralen Infektion.

Chim&auml;ren HIV-1 enthaltenden SIV Matrix leichtere Montage in murinen Zellen aufweisen und in einer Zelle-Typ-abh&auml;ngigen Weise in den menschlichen T-Zellen zu replizieren.

Fibroblasti murini che esprimono i recettori virali e umano T1 cyclin permettono entrata HIV-1 e l&#39;espressione del gene virale ma non supportano l&#39;Assemblea efficiente. Un chimerico di HIV-1 portando una matrice non-omologa (MA) da virus della leucemia murina al posto di HIV-1 MA si pu&ograve; montare in modo efficiente nelle cellule murine, ha ancora scarsa infettivit&agrave;. Qui, noi di valutare la capacit&agrave; di un&#39;omologa MA da SIV MAC239 per completare il montaggio e infezione virus chimerico designato SHIV(MA). Le chimere risultanti SHIV(MA) producono pi&ugrave; virus di HIV-1 nativo quando transfected in cellule murine. Shiv(ma) esibisce specifici del tipo di cellula replica in human T cell lines, replica bene nelle cellule MT4 e scarsamente nelle cellule Jurkat a causa di un&#39;incompatibilit&agrave; con la Env di HIV-1. I difetti di infettivit&agrave; di SHIV(MA) sono salvati da pseudotyping con VSV-G ma non dal troncamento della coda citoplasmatica di Env. Passaggio di SHIV(MA) nelle cellule Jurkat produce varianti con replica migliorata in Jurkat ma non in cellule 3T3 TXC e migliorata Env incorporazione. I risultati indicano che specifici del tipo di cellula, o specie-specifici, host fattori interagiscono con MA a modulare l&#39;efficienza dell&#39;Assemblea e la sua compatibilit&agrave; con Env. Con ulteriore selezione, chimere SIV/HIV-1 possono essere utili per lo sviluppo di modelli murini di infezioni lentivirali.

Chimerico HIV-1 contenente SIV matrix presentano maggiore Assemblea in cellule murine e replicare in modo cellula-tipo-dipendente nelle cellule T umane.

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;T1&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;HIV-1&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3068;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; MA&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;HIV-1&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x975E;&#x76F8;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;MA&#xFF09;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;HIV-1&#x306F;&#x3001;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SHIV&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;SIV&#x306E;MAC239&#x304B;&#x3089;&#x76F8;&#x540C;MA&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#xFF08;MA&#xFF09;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;SHIV&#xFF08;MA&#xFF09;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306F;HIV-1&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SHIV&#xFF08;MA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;HIV-1 Env&#x306E;&#x975E;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;Jurkat&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;MT4&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x3067;&#x3046;&#x307E;&#x304F;&#x8907;&#x88FD;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;T&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SHIV&#xFF08;MA&#xFF09;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;VSV-G&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;Env&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5C3E;&#x90E8;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6551;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Jurkat&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;SHIV&#xFF08;MA&#xFF09;&#x306E;&#x901A;&#x8DEF;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;3T3 TXC&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306E;&#x6539;&#x5584;env&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7A2E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;ENV&#x3068;&#x306E;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;MA&#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30AA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;SIV/HIV-1&#x306E;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;HIV-1&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;SIV&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5C55;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x5F62;&#x3067;&#x8907;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; cyclin T1 murine &#xAC8C;&#xC7AC; HIV-1 &#xD56D;&#xBAA9; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; infectivity&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; murine &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; HIV 1 MA&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44; &#xB3D9;&#xC885; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; (MA) murine &#xC140;&#xC744; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xD569;&#xD560; &#xC218; chimeric HIV-1 &#xB4E4;&#xACE0;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; SIV mac239&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC5C4;&#xB9C8;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC644; &#xD558;&#xB294; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC0F; SHIV(MA)&#xC744; &#xC9C0;&#xC815; &#xD55C; chimeric &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00;. &#xACB0;&#xACFC; SHIV(MA) &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; HIV 1 murine &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398; &#xB54C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;. SHIV(MA) &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xBCF5;&#xC81C; MT4 &#xC140;&#xC5D0; &#xC798;&#xC640; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; Jurkat &#xC138;&#xD3EC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xD638;&#xD658; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC778;&#xAC04; T &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xC804;&#xC2DC;. SHIV(MA)&#xC758; infectivity &#xACB0;&#xD568; &#xD658;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC790;&#xB974;&#xAE30; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; VSV G&#xC640; pseudotyping&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Jurkat &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; SHIV(MA)&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD658;&#xACBD; &#xD1B5;&#xD569; &#xBC0F; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; Jurkat 3T3 TXC &#xC140;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xBCC0;&#xC885; &#xC0DD;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xB610;&#xB294; &#xC0AC;&#xB77C;, &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC694;&#xC18C; &#xBC0F; &#xD658;&#xACBD;&#xC640;&#xC758; &#xD638;&#xD658;&#xC131;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xC120;&#xD0DD;&#xC73C;&#xB85C;, SIV/&#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C; murine &#xBAA8;&#xB378; lentiviral &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC720;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Chimeric HIV-1 &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; SIV &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; murine &#xC140; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC804;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC778;&#xAC04; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD0C0;&#xC785; &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;.

Fibroblastos de rat&#xF3;n que expresan los receptores virales y humanos ciclina T1 permitir que el VIH-1 y la entrada de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica viral, pero no son compatibles con un montaje eficaz. Un quim&#xE9;rico VIH-1 que lleva una matriz no hom&#xF3;loga (MA) de virus de la leucemia murina en lugar del VIH-1 MA puede montar de manera eficiente en las c&#xE9;lulas murinas, sin embargo, tiene infectividad pobres. En este sentido, evaluar la capacidad de una hom&#xF3;loga MA de MAC239 SIV para complementar el montaje y la infecci&#xF3;n por los virus quim&#xE9;ricos designados SHIV (MA). Los resultantes SHIV (MA) quimeras producir m&#xE1;s virus de VIH-1 nativo cuando se transfecta en c&#xE9;lulas murinas. SHIV (MA) exhibe c&#xE9;lulas de tipo espec&#xED;fico de replicaci&#xF3;n en humanos l&#xED;neas de c&#xE9;lulas T, as&#xED; replicar en c&#xE9;lulas MT4 y mal en c&#xE9;lulas Jurkat debido a una incompatibilidad con el VIH-1 Env. Los defectos de infectividad de Shiv (MA) son rescatados por pseudotyping con VSV-G, pero no por el truncamiento de la cola citopl&#xE1;smica de Env. La aprobaci&#xF3;n de Shiv (MA) en las c&#xE9;lulas Jurkat produce variantes con mejor incorporaci&#xF3;n de sobres y la reproducci&#xF3;n mejorada en Jurkat pero no en c&#xE9;lulas 3T3 TXC. Los resultados indican que las c&#xE9;lulas de tipo espec&#xED;fico, o especies espec&#xED;ficas, los factores del hu&#xE9;sped interactuar con MA para modular la eficiencia de montaje y su compatibilidad con Env. Con una selecci&#xF3;n adicional, quimeras SIV/HIV-1 puede ser &#xFA;til para el desarrollo de modelos murinos de infecci&#xF3;n lentiviral.

Quim&#xE9;rico del VIH-1 que contiene la matriz SIV Asamblea Prueba mejorada en c&#xE9;lulas murinas y replicarse en una celda de manera dependiente del tipo de c&#xE9;lulas T humanas

&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x77E9;&#x9635; (MA) &#x57DF;&#x952E;&#x5165;&#x7279;&#x5B9A;&#x819C;&#x8F66;&#x53A2; 1 &#xFF08;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1) Gag &#x76EE;&#x6807;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x4F4E;&#x6548;&#x819C;&#x9488;&#x5BF9; Gag &#x548C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F3A;&#x9677;&#x662F;&#x7531;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x9A6C;&#x4E0E;&#x9F20;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2; (MLV) &#x9A6C;&#x4E2D;&#x5D4C;&#x5408; proviruses &#x66FF;&#x6362;&#x89E3;&#x9664;&#x4E86;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5D4C;&#x5408;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x643A;&#x5E26;&#x4E32;&#x8054; MLV &#x548C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x9A6C;&#x57DF;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x538B;&#x5236; N &#x603B;&#x7AD9; MLV &#x9A6C;&#x52A0;&#x589E;&#x5F3A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x6D88;&#x9664;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9A6C;&#x662F;&#x5FC5;&#x987B;&#x9075;&#x5B88; Gag &#x5904;&#x7406;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x548C;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x7403;&#x72B6;&#x56E2;&#x957F;&#x9A6C;&#x7684;&#x5220;&#x9664;&#x4E5F;&#x51CF;&#x8F7B;&#x819C;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x548C; Gag &#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A0;&#x5DE5;&#x5757;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9A6C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x56E0;&#x7D20;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7403;&#x72B6;&#x56E2;&#x957F;&#x9A6C;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x819C;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;

&#x7531;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x77E9;&#x9635;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x88C5;&#x914D;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

In human cells, the N-terminal matrix (MA) domain of the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) Gag targets assembly to specific membrane compartments. In murine fibroblasts, membrane targeting of Gag and assembly of HIV-1 are inefficient. These deficiencies are relieved by replacement of HIV-1 MA with murine leukemia virus (MLV) MA in chimeric proviruses. In this study, we examined chimeric HIV-1 carrying tandem MLV and HIV-1 MA domains and found that the addition of MLV MA to the N-terminus of HIV-1 Gag enhanced membrane binding in murine cells, but was not sufficient to stimulate virus production. Removal of HIV MA was required to observe more efficient Gag processing and increased virus production in murine cells. Deletion of the globular head of MA also alleviated the blocks to membrane binding and Gag processing in murine cells, yet did not lead to increased virus production. These MA-dependent, cell-type-specific phenotypes suggest that host factors interact with the globular head of MA to regulate membrane binding and additional membrane-independent step(s) required for assembly.

Inhibition of viral assembly in murine cells by HIV-1 matrix.

Dans les cellules humaines, la N-terminale de matrice (MA) de domaine du type virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine 1 (VIH-1) Gag cible assemblage &#xE0; compartiments membranaires sp&#xE9;cifiques. Dans les fibroblastes murins, la membrane des Gag et l&#x26;#39;assemblage du VIH-1 sont inefficaces. Ces lacunes sont soulag&#xE9;s par le remplacement du VIH-1 MA par le virus de la leuc&#xE9;mie murine (MLV) MA en provirus chim&#xE9;riques. Dans cette &#xE9;tude, nous avons examin&#xE9; chim&#xE9;rique VIH-1 portant tandem MLV et le VIH-1 domaines MA et a constat&#xE9; que l&#x26;#39;ajout de MLV MA &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; N-terminale de la membrane du VIH-1 Gag renforc&#xE9;e obligatoire dans les cellules murines, mais n&#x26;#39;&#xE9;tait pas suffisante pour stimuler la la production de virus. Retrait du VIH a &#xE9;t&#xE9; MA tenus d&#x26;#39;observer le traitement Gag plus efficace et la production accrue du virus dans les cellules murines. Suppression de la t&#xEA;te globulaire de la MA a &#xE9;galement att&#xE9;nu&#xE9; les blocs &#xE0; la liaison membrane et le traitement Gag dans les cellules murines, mais n&#x26;#39;a pas conduit &#xE0; la production de virus a augment&#xE9;. Ces MA-d&#xE9;pendant, de type cellulaire sp&#xE9;cifiques ph&#xE9;notypes sugg&#xE8;rent que des facteurs d&#x26;#39;accueil d&#x26;#39;interagir avec la t&#xEA;te globulaire de la MA de r&#xE9;glementer liaison &#xE0; la membrane et la membrane suppl&#xE9;mentaire ind&#xE9;pendante &#xE9;tape (s) n&#xE9;cessaire pour le montage.

L&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;assemblage viral dans les cellules murines par le VIH-1 Matrice

Geben Sie in menschlicher Zellen die N-Terminal-Matrix (MA)-Domains von der Human-Immunodeficiency-Virus 1 (HIV-1) Gag Ziele Versammlung bestimmten Membran F&auml;cher. In murine Fibroblasten Membran Ausrichtung der Gag und Montage von HIV-1 sind ineffizient. Diese M&auml;ngel werden durch den Ersatz von HIV-1 MA mit murine Leuk&auml;mievirus (MLV) MA in Chim&auml;ren Proviren entlastet. In dieser Studie untersuchten wir Chim&auml;ren HIV-1 mit Tandem-MLV und HIV-1 MA-Domains und festgestellt, dass die Zugabe von MLV MA zu der N-Terminus von HIV-1 Gag Membran Bindung in murinen Zellen verbessert, aber war nicht ausreichend, um Virus-Produktion zu stimulieren. Entfernung von HIV MA war erforderlich, um eine effizientere Verarbeitung von Gag und vermehrt nach Viren-Produktion im murinen Zellen zu beobachten. L&ouml;schung der kugelige Kopf MA auch Bl&ouml;cke, um die Membran binden und Gag Verarbeitung in murinen Zellen gelindert, doch f&uuml;hrten nicht zu erh&ouml;hten Virus-Produktion. Diese MA-abh&auml;ngige, Zelle-typspezifische Ph&auml;notypen schlagen vor, da&szlig; Host Faktoren mit der kugelige Kopf MA Membran binden und zus&auml;tzliche Membran-unabh&auml;ngige-Auftragsschritte f&uuml;r die Montage erforderlichen Regeln interagieren.

Hemmung der viralen Assembly im murinen Zellen durch HIV-1-Matrix.

Nelle cellule umane, il dominio N-terminale matrix (MA) del virus dell&#39;immunodeficienza umana tipo 1 montaggio di obiettivi Gag (HIV-1) a compartimenti di membrana specifici. In fibroblasti murini, membrana di targeting di Gag e assemblaggio di HIV-1 sono inefficienti. Queste carenze sono alleviate da sostituzione di HIV-1 MA con il virus della leucemia murina (MLV) MA nel provirus chimerico. In questo studio, abbiamo esaminato chimerico HIV-1 che trasportano tandem MLV e HIV-1 MA domini e scoperto che l&#39;aggiunta di MLV MA per il N-terminus di HIV-1 Gag enhanced associazione di membrana in cellule murine, ma non era sufficiente per stimolare la produzione di virus. Rimozione dell&#39;HIV MA &egrave; stato richiesto di osservare un&#39;elaborazione pi&ugrave; efficiente Gag e produzione aumentata del virus nelle cellule murine. Eliminazione della testa globulare MA anche alleviato i blocchi a membrana associazione e Gag trasformazione in cellule murine, eppure non ha condotto alla produzione aumentata di virus. Questi fenotipi specifici del tipo di cella, MA dipendente suggeriscono che host fattori interagiscono con la testa globulare di MA di regolamentare vincolante di membrana e ulteriore passo s indipendente dalla membrana necessaria per l&#39;assemblaggio.

Inibizione dell&#39;Assemblea virale in cellule murine dalla matrice di HIV-1.

&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1&#x578B;&#xFF08;HIV-1&#xFF09;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;MA&#xFF09;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x819C;&#x533A;&#x753B;&#x306B;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HIV-1&#x306E;Gag&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x819C;&#x304C;&#x975E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;MLV&#xFF09;MA&#x3092;&#x6301;&#x3064;HIV-1 MA&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3067;&#x89E3;&#x653E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;MLV&#x3068;HIV-1 MA&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;HIV-1&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HIV-1&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;MLV&#x306E;MA&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7523;&#x751F;&#x3002; HIV MA&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; MA&#x306E;&#x7403;&#x72B6;&#x982D;&#x90E8;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x7DE9;&#x548C;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x306F;&#x81F3;&#x3089;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;MA-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x819C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#xFF08;s&#xFF09;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;MA&#x306E;&#x7403;&#x72B6;&#x982D;&#x90E8;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

HIV-1&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; (MA) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD2B9;&#xC815; &#xB9C9; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; 1 (hiv-1) &#xAC1C; &#xADF8; &#xB300;&#xC0C1; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Murine &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB9C9; &#xAC1C; &#xADF8;&#xC640; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568; murine &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (MLV) MA chimeric proviruses&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 MA&#xC758; &#xAD50;&#xCCB4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC548;&#xC2EC;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC;&#xD55C; chimeric HIV-1 &#xD611;&#xB3D9; MLV&#xC640; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 MA &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC6B4;&#xBC18; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xACAC; MLV MA HIV 1 &#xAC1C; &#xADF8;&#xC758; N &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; murine &#xC140;&#xC5D0; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xC5C4;&#xB9C8;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xB294; &#xAC1C; &#xADF8;&#xB97C; &#xB354; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0; murine &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. &#xC5C4;&#xB9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xD615; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB3C4; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; murine &#xC140;&#xC5D0; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C; &#xADF8;&#xB97C; &#xBE14;&#xB85D; &#xC644;&#xD654; &#xC544;&#xC9C1; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; MA &#xC885;&#xC18D;, &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xACE0;&#xAE30; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC694;&#xC18C; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xB9C9; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xB2E8;&#xACC4; &#xADDC;&#xC81C; &#xAD6C;&#xD615; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC791;&#xC6A9;&#xD560; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

HIV 1 &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; murine &#xC138;&#xD3EC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC758; &#xC800;&#xD574;.

En c&#xE9;lulas humanas, la N-terminal de la matriz (MA) dominio del virus de inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) mordaza se dirige a los compartimentos de montaje espec&#xED;ficos de membrana. En fibroblastos murinos, la membrana orientaci&#xF3;n de la mordaza y el montaje de VIH-1 son ineficientes. Estas deficiencias se mejoran por la sustituci&#xF3;n de VIH-1 MA con virus de la leucemia murina (MLV) MA en provirus quim&#xE9;ricos. En este estudio, hemos examinado quim&#xE9;rico VIH-1 llevar t&#xE1;ndem MLV y VIH-1 dominios MA y encontraron que la adici&#xF3;n de MLV MA a la N-terminal de la membrana del VIH-1 gag mejorada de uni&#xF3;n en las c&#xE9;lulas murinas, pero no fue suficiente para estimular virus de la producci&#xF3;n. La eliminaci&#xF3;n del VIH MA se requiere para observar el procesamiento mordaza m&#xE1;s eficiente y la producci&#xF3;n de virus aumento en las c&#xE9;lulas murinas. La eliminaci&#xF3;n de la cabeza globular de MA tambi&#xE9;n alivia los bloques a la uni&#xF3;n de la membrana y procesamiento de Gag en c&#xE9;lulas murinas, sin embargo, no dio lugar a la producci&#xF3;n de virus aument&#xF3;. Estos MA-dependientes, de c&#xE9;lulas espec&#xED;ficas del tipo fenotipos sugieren que los factores del hu&#xE9;sped interactuar con la cabeza globular de MA para regular uni&#xF3;n a la membrana y la membrana adicional independiente de la etapa (s) requerido para el montaje.

La inhibici&#xF3;n de la Asamblea viral en las c&#xE9;lulas murinas por el VIH-1 Matriz

&#x5230;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6;&#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x6837;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x662F;&#x6865;&#x672C;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x708E;&#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x5B58;&#x5728;&#x5185;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6D78;&#x6DA6;&#x7684;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x3002;&#x5C0F;&#x9F20; CCL21 &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x7532;&#x72B6;&#x817A; (TGCCL21 &#x5C0F;&#x9F20;) &#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x6D78;&#x6DA6;&#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x3002;TGCCL21 &#x5C0F;&#x9F20;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6210;&#x719F;&#x7684; T &#x548C; B &#x7EC6;&#x80DE; (RAGTGCCL21 &#x5C0F;&#x9F20;) &#x6CA1;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6;&#x6216;&#x7684;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x4E0E;&#x63A7;&#x4EF6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6709;&#x6240;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;RAGTGCCL21 &#x5C0F;&#x9F20; CD3(+)CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5165;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x4E2D; LYVE-1(+)podoplanin(+)Prox-1(+) &#x8239;&#x53EA;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6DCB;&#x5DF4; &beta; &#x53D7;&#x4F53;&#x6216;&#x6DCB;&#x5DF4; alpha &#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5220;&#x9664;&#x5E9F;&#x6B62;&#x7684;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x53D1;&#x708E;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x672A;&#x5F71;&#x54CD;&#x90BB;&#x8FD1;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x4E2D;&#x5B9A;&#x4E49;&#x708E;&#x75C7;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6A21;&#x578B;&#x548C;&#x6307;&#x8BC1;&#x6DCB;&#x5DF4; &beta; &#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x708E;&#x75C7;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6DCB;&#x5DF4; &beta; &#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

Infiltration of lymphocytes into the thyroid gland and formation of lymph node-like structures is a hallmark of Hashimoto's thyroiditis. Here we demonstrate that lymphatic vessels are present within these infiltrates. Mice overexpressing the chemokine CCL21 in the thyroid (TGCCL21 mice) developed similar lymphoid infiltrates and lymphatic vessels. TGCCL21 mice lacking mature T and B cells (RAGTGCCL21 mice) did not have cellular infiltrates or increased number of lymphatic vessels compared with controls. Transfer of CD3(+)CD4(+) T cells into RAGTGCCL21 mice promoted the development of LYVE-1(+)podoplanin(+)Prox-1(+) vessels in the thyroid. Genetic deletion of lymphotoxin beta receptor or lymphotoxin alpha abrogated development of lymphatic vessels in the inflamed areas in the thyroid but did not affect development of neighboring lymphatics. These results define a model for the study of inflammatory lymphangiogenesis in the thyroid and implicate lymphotoxin beta receptor signaling in this process.

Lymphotoxin beta receptor signaling is required for inflammatory lymphangiogenesis in the thyroid.

L&#x26;#39;infiltration de lymphocytes dans la glande thyro&#xEF;de et la formation de ganglions lymphatiques des structures de type est une caract&#xE9;ristique de la thyro&#xEF;dite de Hashimoto. Ici, nous d&#xE9;montrons que les vaisseaux lymphatiques sont pr&#xE9;sents au sein de ces infiltrats. Souris surexprimant la chimiokine CCL21 dans la thyro&#xEF;de (TGCCL21 souris) d&#xE9;velopp&#xE9; similaires infiltrats lympho&#xEF;des et des vaisseaux lymphatiques. TGCCL21 les souris d&#xE9;pourvues de T matures et les cellules B (RAGTGCCL21 la souris) n&#x26;#39;ont pas infiltrats cellulaires ou augmentation du nombre de vaisseaux lymphatiques par rapport aux t&#xE9;moins. Transfert de CD3 (+) CD4 (+) des cellules T dans RAGTGCCL21 souris favoris&#xE9; le d&#xE9;veloppement de LYVE-1 (+) podoplanin (+) Prox-1 (+) les navires de la thyro&#xEF;de. Suppression g&#xE9;n&#xE9;tique des r&#xE9;cepteurs b&#xEA;ta lymphotoxine alpha ou le d&#xE9;veloppement lymphotoxine abrog&#xE9; des vaisseaux lymphatiques dans les zones enflamm&#xE9;es de la thyro&#xEF;de, mais n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur le d&#xE9;veloppement des vaisseaux lymphatiques voisins. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;finissent un mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de la lymphangiogen&#xE8;se inflammatoire dans la thyro&#xEF;de et d&#x26;#39;impliquer des r&#xE9;cepteurs b&#xEA;ta lymphotoxine de signalisation dans ce processus.

Signalisation du r&#xE9;cepteur b&#xEA;ta de lymphotoxine est requis pour lymphangiog&#xE9;n&#xE8;se inflammatoire dans la thyro&#xEF;de

Infiltration von Lymphozyten in der Schilddr&uuml;se und Bildung von Lymphknoten-Strukturen ist ein Markenzeichen der Hashimoto Thyreoiditis. Hier zeigen wir, dass Lymphgef&auml;&szlig;e innerhalb dieser Infiltrate vorhanden sind. Der Chemokine CCL21 in der Schilddr&uuml;se (TGCCL21 M&auml;use) &uuml;berexprimierenden M&auml;usen entwickelt &auml;hnliche lymphoiden Infiltraten und Lymphgef&auml;&szlig;en. TGCCL21 mit M&auml;usen fehlt Reife T und B-Zellen (RAGTGCCL21 M&auml;use) haben keine zellul&auml;re Infiltrate oder erh&ouml;hte Anzahl von Lymphgef&auml;&szlig;en im Vergleich zu Kontrollen. CD3(+)CD4(+) T-Zellen in RAGTGCCL21 M&auml;use &uuml;bertragen f&ouml;rderte die Entwicklung der LYVE-1(+)podoplanin(+)Prox-1(+) Schiffe in der Schilddr&uuml;se. Genetische Auslassung der Lymphotoxin Beta-Rezeptor oder Lymphotoxin-Alpha geabschafft Entwicklung der Lymphgef&auml;&szlig;e in den entz&uuml;ndeten Bereichen in der Schilddr&uuml;se, aber hatte keine Auswirkungen auf die Entwicklung der benachbarten Lymphsystem. Diese Ergebnisse definieren Sie ein Modell f&uuml;r die Erforschung der entz&uuml;ndlichen Lymphangiogenesis in der Schilddr&uuml;se und implizieren Lymphotoxin Beta-Rezeptor Signalgebung in diesem Prozess.

Lymphotoxin Beta-Rezeptor-Signalisierung ist f&uuml;r entz&uuml;ndliche Lymphangiogenesis in der Schilddr&uuml;se erforderlich.

Infiltrazione di linfociti nella ghiandola tiroide e la formazione di strutture simili a linfonodo &egrave; un segno distintivo della tiroidite di Hashimoto. Qui dimostriamo che i vasi linfatici sono presenti all&#39;interno di questi infiltrati. Topi con sovraesprimono relativa la chemochina CCL21 nella tiroide (TGCCL21 topi) sviluppata simile infiltrati linfoidi e vasi linfatici. TGCCL21 topi privi di cellule T e B mature (RAGTGCCL21 topi) non hanno infiltrati cellulari o aumento del numero di vasi linfatici rispetto ai controlli. Trasferimento di cellule T CD3(+)CD4(+) in RAGTGCCL21 topi ha promosso lo sviluppo dei vasi LYVE-1(+)podoplanin(+)Prox-1(+) nella tiroide. Eliminazione genetica del recettore beta lymphotoxin o lymphotoxin alfa abrogata lo sviluppo dei vasi linfatici nelle zone infiammate nella tiroide, ma non ha interessato lo sviluppo dei vasi linfatici adiacenti. Questi risultati definiscono un modello per lo studio di linfangiogenesi infiammatorie nella tiroide e coinvolgono recettore beta lymphotoxin segnalazione in questo processo.

Lymphotoxin beta receptor signaling &egrave; richiesto per linfangiogenesi infiammatorie nella tiroide.

&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x69D8;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6D78;&#x6F64;&#x306F;&#x6A4B;&#x672C;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x708E;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x6D78;&#x6F64;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3092;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;CCL21&#xFF08;TGCCL21&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6210;&#x719F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6B20;&#x304F;TGCCL21&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF08;RAGTGCCL21&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x3084;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; RAGTGCCL21&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;CD3&#xFF08;+&#xFF09;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306F;LYVE-1&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x63A8;&#x9032;&#xFF08;+&#xFF09;&#x30DD;&#x30C9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;+&#xFF09;PROX-1&#xFF08;+&#xFF09;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30DB;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3B2;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3B1;&#x5EC3;&#x6B62;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x304C;&#x3001;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30DB;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3B2;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x3080;&#x3002;

&#x30EA;&#x30F3;&#x30DB;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3B2;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BA1;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xAC11; &#xC0C1;&#xC120;&#xC5D0; &#xB9BC;&#xD504; &#xD1A8;&#xC758; &#xCE68;&#xD22C; &#xBC0F; &#xB9BC;&#xD504; &#xB178;&#xB4DC; &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC2DC; &#xBAA8;&#xD1A0;&#xC758; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; &#xC5FC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9BC;&#xD504; &#xD608;&#xAD00;&#xC774;&#xC774; &#xCE68;&#xD22C; &#xB0B4;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; (TGCCL21 &#xC950;)&#xC5D0;&#xC11C; chemokine CCL21 overexpressing &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB9BC;&#xD504; &#xCE68;&#xD22C; &#xBC0F; &#xB9BC;&#xD504; &#xD608;&#xAD00;. &#xC131;&#xC219; T &#xBC0F; B &#xC138;&#xD3EC; (RAGTGCCL21 &#xC950;) &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; TGCCL21 &#xC950; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE68;&#xD22C; &#xB610;&#xB294; &#xB9BC;&#xD504; &#xD608;&#xAD00; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC218;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC5C8;&#xB2E4;. RAGTGCCL21 &#xC950;&#xB85C; CD3(+)CD4(+) T &#xC140;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; LYVE-1(+)podoplanin(+)Prox-1(+) &#xC120;&#xBC15;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCD94;&#xC9C4;. Lymphotoxin &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB610;&#xB294; lymphotoxin &#xC54C;&#xD30C;&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD30C;&#xAE30; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9BC;&#xD504; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xC6C3; lymphatics&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; lymphangiogenesis&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; lymphotoxin &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC62D; &#xC544; &#xB9E4;&#xAE30;.

Lymphotoxin &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; lymphangiogenesis &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La infiltraci&#xF3;n de linfocitos en la gl&#xE1;ndula tiroides y la formaci&#xF3;n de n&#xF3;dulos linf&#xE1;ticos, como las estructuras es un sello distintivo de la tiroiditis de Hashimoto. Aqu&#xED; demostramos que los vasos linf&#xE1;ticos est&#xE1;n presentes dentro de estos infiltrados. Los ratones que sobreexpresan la quimioquina CCL21 en la tiroides (TGCCL21 ratones) desarroll&#xF3; similares infiltrados linfoides y vasos linf&#xE1;ticos. TGCCL21 ratones que carecen de T maduras y c&#xE9;lulas B (RAGTGCCL21 ratones) no ten&#xED;a infiltrados celulares o aumento del n&#xFA;mero de vasos linf&#xE1;ticos en comparaci&#xF3;n con los controles. Transferencia de CD3 (+) CD4 (+) las c&#xE9;lulas T en ratones RAGTGCCL21 promovido el desarrollo de LYVE-1 (+) podoplanin (+) Prox-1 (+) los buques en la tiroides. La supresi&#xF3;n gen&#xE9;tica de los receptores de la linfotoxina beta o el desarrollo de la linfotoxina alfa abrogado de los vasos linf&#xE1;ticos en las zonas inflamadas en la tiroides, pero no afect&#xF3; el desarrollo de los vasos linf&#xE1;ticos vecinos. Estos resultados definen un modelo para el estudio de linfangiog&#xE9;nesis inflamatoria en la tiroides y del receptor de la linfotoxina beta de implicar a la se&#xF1;alizaci&#xF3;n en este proceso.

Beta linfotoxina la se&#xF1;alizaci&#xF3;n del receptor se requiere para Linfangiog&#xE9;nesis inflamatoria en la tiroides

&#x611F;&#x67D3;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2; (HIV) &#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5C06;&#x5176;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; &#x75C5;&#x6BD2; Rna &#x548C;&#x8702;&#x7A9D;&#x819C;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x534F;&#x8C03; Gag &#x8FD0;&#x8F93;&#x548C;&#x9F50;&#x805A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x578B;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#x643A;&#x5E26; Gag &#x5185;&#x90E8;&#x6216;&#x57DF;&#x95F4;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (iGFP) &#x878D;&#x5408;&#x6765;&#x63ED;&#x793A;&#x751F;&#x7406;&#x4E0A;&#x51C6;&#x786E;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;Gag &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x9F50;&#x805A;&#x4F20;&#x67D3;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x672C;&#x673A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x5355;&#x8F6E;&#x5316;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5176;&#x7528;&#x4E8E;&#x8D29;&#x5356;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5B83;&#x5F3A;&#x52B2;&#x7EB5;&#x5BB9; MT4 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4E2D;&#x5DEE;&#x5229;&#x5DEE;&#x3002;Gag iGFP &#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x793A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x975E;&#x5E38;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x672C;&#x673A; Gag&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x70C8;&#x7684;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C; Gag iGFP &#x8367;&#x5149;&#x660E;&#x663E;&#x9C9C;&#x660E;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5176;&#x5728;&#x672C;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3001; &#x6307;&#x793A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x9F50;&#x805A;&#x63A9;&#x76D6;&#x8BB8;&#x591A; Gag &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x8367;&#x5149;&#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7814;&#x7A76;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x6FC0;&#x70C8; Gag &#x9F50;&#x805A;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5730;&#x76D8;&#x8F83;&#x5F31;&#x9F50;&#x805A;&#x3002;&#x56DB;&#x7EF4;&#x3001; &#x5EF6;&#x65F6;&#x5171;&#x7126;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x5C0F;&#x65F6; Gag &#x6700;&#x521D;&#x6F2B;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5185; Gag &#x5206;&#x5E03;&#x65F6;&#x7A7A;&#x7EA7;&#x6570;&#x3002;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7136;&#x540E;&#x7D2F;&#x8BA1; Gag &#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x6C34;&#x75B1;&#x534F;&#x4F1A;&#x665A;&#x4E86;&#xFF0C;&#x53EA;&#x540E;&#xFF0C;&#x5C06;&#x51FA;&#x73B0;&#x8840;&#x6D46;&#x819C;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5DF2;&#x8FBE;&#x5230;&#x9AD8;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5411;&#x4E0A;&#x820D;&#x5165;&#x548C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8367;&#x5149;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x63ED;&#x793A; Gag &#x8D29;&#x8FD0;&#x671F;&#x95F4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x5EF6;&#x4F38;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP &#x662F;&#x5939;&#x5C42;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x88C5;&#x914D;&#x548C;&#x4F20;&#x8F93;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6709;&#x7528;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5E8F;&#x5217;&#x7C7B;&#x578B; 1 &#xFF08;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1) Gag &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x9F50;&#x805A;&#x590D;&#x5236;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x3001; &#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x6D3B;&#x5171;&#x7126;&#x6210;&#x50CF;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;

The assembly of infectious human immunodeficiency virus (HIV) requires that Gag transport and oligomerization be coordinated with its association with other viral proteins, viral RNAs, and cellular membranes. We have developed a replication-competent HIV type 1 molecular clone that carries a Gag-internal or interdomain green fluorescent protein (iGFP) fusion to reveal a physiologically accurate temporal sequence of Gag localization and oligomerization during the formation of infectious HIV. This recombinant HIV is as infectious as native HIV in single-round infectivity assays, validating its use for trafficking studies. It replicates robustly in permissive MT4 cells and is infectious, yet it spreads poorly in other T-cell lines. Immunofluorescence of Gag-iGFP showed a pattern very similar to that of native Gag. However, the intense plasma membrane Gag-iGFP fluorescence contrasts markedly with its immunofluorescence at this site, indicating that many Gag epitopes can be masked by oligomerization. Consistent with this, fluorescence resonance energy transfer studies visualized intense Gag oligomerization at the plasma membrane and weaker oligomerization at cytoplasmic sites. Four-dimensional, time-lapse confocal imaging reveals a temporal progression of Gag distribution over hours in which Gag is initially diffusely localized within the cytoplasm. Plasma membrane signals then accumulate as Gag levels increase and vesicular association appears late, only after plasma membrane site signals have reached high intensity. Lastly, the cell rounds up and HIV protease activation induces diffuse fluorescence throughout the cell. These distinct phases reveal a natural progression of Gag trafficking during the viral gene expression program. HIV Gag-iGFP is a useful tool for dissecting mechanisms of viral assembly and transmission.

Sequence of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) Gag localization and oligomerization monitored with live confocal imaging of a replication-competent, fluorescently tagged HIV-1.

Ensemble selon la infectieuse virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine (VIH) exige que le transport Gag et oligom&#xE9;risation &#xEA;tre coordonn&#xE9;s avec son association avec d&#x26;#39;autres prot&#xE9;ines virales, des ARN viral, et des membranes cellulaires. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une comp&#xE9;tent pour la r&#xE9;plication VIH de type 1 clone mol&#xE9;culaire qui porte un b&#xE2;illon-interne ou interdomaine la prot&#xE9;ine fluorescente verte (iGFP) la fusion de r&#xE9;v&#xE9;ler une s&#xE9;quence temporelle pr&#xE9;cise physiologiquement de la localisation Gag et oligom&#xE9;risation au cours de la formation de VIH infectieux. Ce recombinant VIH est aussi contagieuse que le VIH en natif les &#xE9;preuves d&#x26;#39;infectivit&#xE9; &#xE0; un tour, la validation de son utilisation pour les &#xE9;tudes de trafic. Il r&#xE9;plique avec vigueur dans les cellules MT4 permissives et est contagieuse, mais elle se propage mal dans d&#x26;#39;autres lign&#xE9;es de cellules T. Par immunofluorescence de Gag-iGFP a montr&#xE9; une tendance tr&#xE8;s semblable &#xE0; celle de Gag native. Cependant, l&#x26;#39;intense de la membrane plasmique Gag-iGFP fluorescence contraste nettement avec son immunofluorescence sur ce site, indiquant que les &#xE9;pitopes Gag nombreux peuvent &#xEA;tre masqu&#xE9;s par oligom&#xE9;risation. Conform&#xE9;ment &#xE0; cela, la fluorescence des &#xE9;tudes de r&#xE9;sonance de transfert d&#x26;#39;&#xE9;nergie visualis&#xE9; oligom&#xE9;risation Gag intense &#xE0; la membrane plasmique et les plus faibles sur les sites d&#x26;#39;oligom&#xE9;risation cytoplasmiques. Quatre dimensions, time-lapse d&#x26;#39;imagerie confocale r&#xE9;v&#xE8;le une progression temporelle de la distribution Gag pendant des heures dans lequel Gag est d&#x26;#39;abord diffuse localis&#xE9;es dans le cytoplasme. Signaux membrane plasmique s&#x26;#39;accumulent ensuite sous forme de b&#xE2;illon l&#x26;#39;augmentation des niveaux et v&#xE9;siculaires association appara&#xEE;t tardivement, seulement apr&#xE8;s que les signaux de plasma membrane du site ont atteint une intensit&#xE9; &#xE9;lev&#xE9;e. Enfin, les tours cellulaires et jusqu&#x26;#39;&#xE0; la prot&#xE9;ase du VIH d&#x26;#39;activation induit une fluorescence diffuse dans toute la cellule. Ces phases distinctes r&#xE9;v&#xE8;lent une progression naturelle de la traite Gag au cours du programme expression des g&#xE8;nes viraux. VIH Gag-iGFP est un outil utile pour diss&#xE9;quer les m&#xE9;canismes de l&#x26;#39;assemblage viral et la transmission.

S&#xE9;quence du type de virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine 1 (VIH-1) Localisation Gag et oligom&#xE9;risation contr&#xF4;l&#xE9; avec l&#x26;#39;imagerie confocale en direct d&#x26;#39;un comp&#xE9;tents pour la r&#xE9;plication, marqu&#xE9;es par fluorescence VIH-1

Die Assembly von infekti&ouml;sen Human Immunodeficiency Virus (HIV) erfordert, dass die Gag-Transport und Oligomerisierung mit seiner Assoziation mit anderen viralen Proteine, viralen RNAs und Zellmembranen abgestimmt werden. Wir haben einen Replikations-zust&auml;ndigen HIV Typ 1 molekularen Klon entwickelt, der tr&auml;gt ein Gag-interne oder dom&auml;nen&uuml;bergreifendes gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (iGFP) Fusion um eine physiologisch korrekte zeitliche Abfolge Gag Lokalisierungs-und Oligomerisierung bei der Bildung von infekti&ouml;sen HIV zu offenbaren. Dieses rekombinante HIV ist so ansteckend wie native HIV bei Einzel-Runde Infektiosit&auml;t-Assays, seine Verwendung f&uuml;r Menschenhandel Studien zu &uuml;berpr&uuml;fen. Es robust in freiz&uuml;gigen MT4-Zellen repliziert und ansteckend, aber es breitet sich schlecht in andere T-Zell-Linien. Immunofluoreszenz von Gag-iGFP zeigte eine Muster sehr &auml;hnlich der native Gag. Jedoch steht die intensive Plasmamembran Gag-iGFP Fluoreszenz deutlich seine Immunfluoreszenz an dieser Stelle, dass viele Gag Epitopes von Oligomerisierung maskiert werden kann. Folgerichtig visualisiert Fluoreszenz Resonanz Energie Transfer Studien intensive Gag Oligomerisierung an der Plasmamembran und schw&auml;cheren Oligomerisierung zytoplasmatischen Standorte. Vierdimensionale, Time-Lapse confocal Bildgebung zeigt einen zeitlichen Verlauf von Gag-Verteilung &uuml;ber Stunden in denen Gag zun&auml;chst diffus im Zytoplasma lokalisiert ist. Plasmamembran Signale sammeln Sie dann so Gag anzuheben und vesikul&auml;re Verband erscheint sp&auml;t, erst nach der Plasmamembran Website Signale hohen Intensit&auml;t erreicht haben. Schlie&szlig;lich die Zelle rundet und HIV-Protease-Aktivierung induziert diffuse Fluoreszenz in der Zelle. Diese Phasen zeigen eine nat&uuml;rliche Progression der Gag Handel w&auml;hrend des viralen Gen-Ausdruck-Programms. HIV Gag-iGFP ist ein n&uuml;tzliches Werkzeug f&uuml;r die Mechanismen der viralen Montage- und &Uuml;bertragung zu sezieren.

Sequenz von humanen Immundefizienz-Virus Typ 1 (HIV-1) Gag Lokalisierung und Oligomerisierung &uuml;berwacht mit live konfokale Bildgebung eine Replikation-kompetent, Leuchtstoff markierte HIV-1.

L&#39;Assemblea di infettive virus dell&#39;immunodeficienza umana (HIV) richiede che oligomerizzazione e Gag trasporto essere coordinati con la sua associazione con altre proteine virali, RNA virale e le membrane cellulari. Abbiamo sviluppato un replica-competente clone del molecolare di tipo 1 del HIV che trasporta un bavaglio-interni o fusione tra domini della proteina verde fluorescente (iGFP) per rivelare una sequenza temporale fisiologicamente accurata di oligomerizzazione durante la formazione del HIV infettivi e localizzazione di Gag. Questo ricombinante HIV &egrave; come infettive come HIV nativo in dosaggi con un unico arrotondamento infettivit&agrave;, convalidando l&#39;uso per gli studi di traffici. E replica con fermezza nelle cellule MT4 permissive ed &egrave; infettiva, ancora poco si diffonde in altre linee di cellule T. Immunofluorescenza di Gag-iGFP ha mostrato un modello molto simile a quella di Gag nativo. Tuttavia, membrana del plasma intensa fluorescenza Gag-iGFP contrasta nettamente con l&#39;immunofluorescenza su questo sito, che indica che molte Gag epitopi possono essere mascherati da oligomerizzazione. Coerentemente con questo, studi di fluorescenza resonance energy transfer visualizzati intenso oligomerizzazione di Gag alla membrana del plasma e pi&ugrave; debole oligomerizzazione presso siti citoplasmatiche. Imaging confocale quadridimensionale, time-lapse rivela una progressione temporale della distribuzione di Gag nelle ore in cui Gag &egrave; localizzato inizialmente diffusamente all&#39;interno del citoplasma. Segnali di membrana del plasma si accumulano quindi come aumentano i livelli di Gag e associazione vescicolare appare in ritardo, solo dopo che la membrana plasmatica sito segnali hanno raggiunto ad alta intensit&agrave;. Infine, nella cella il giro e attivazione di proteasi HIV induce fluorescenza diffusa in tutta la cella. Queste fasi distinte rivelano una progressione naturale di Gag traffico durante il programma di espressione del gene virale. HIV Gag-iGFP &egrave; un utile strumento per dissezione meccanismi di assemblaggio virale e trasmissione.

Sequenza del virus dell&#39;immunodeficienza umana di tipo 1 (HIV-1) Gag localizzazione e oligomerizzazione monitorati con live imaging confocal di una replica-competenti, fluorescente contrassegnati HIV-1.

&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#xFF08;HIV&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x8F38;&#x9001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RNA&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3068;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;HIV&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x306B;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x5C40;&#x5728;&#x3068;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x6642;&#x7CFB;&#x5217;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x5185;&#x90E8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;iGFP&#xFF09;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x8907;&#x88FD;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;HIV 1&#x578B;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;HIV&#x306F;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x611F;&#x67D3;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;HIV&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306A;MT4&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x78BA;&#x5B9F;&#x306B;&#x8907;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x60AA;&#x3044;&#x5E83;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; GAG-iGFP&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x3088;&#x304F;&#x4F3C;&#x305F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F37;&#x70C8;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;GAG-iGFP&#x86CD;&#x5149;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x306F;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x5F31;&#x3044;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3067;&#x5F37;&#x70C8;&#x306A;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x56DB;&#x6B21;&#x5143;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;Gag&#x304C;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x3073;&#x307E;&#x3093;&#x6027;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5185;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x308B;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x304C;&#x9045;&#x308C;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x3068;HIV&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x304C;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x4E2D;&#x306B;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HIV GAG-iGFP&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x900F;&#x904E;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x5256;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1&#x578B;&#xFF08;HIV-1&#xFF09;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x80FD;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;HIV-1&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x76E3;&#x8996;

&#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HIV)&#xC758; &#xC870;&#xB9BD; &#xAC1C; &#xADF8; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC0F; oligomerization&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNAs &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xD611;&#xD68C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC870;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC1C; &#xADF8; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB610;&#xB294; &#xC6B0;&#xC120; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (iGFP) &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xAC1C; &#xADF8; &#xD604;&#xC9C0;&#xD654; &#xBC0F; oligomerization &#xAC10;&#xC5FC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xC21C;&#xC218; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC720;&#xB2A5;&#xD55C; HIV &#xD0C0;&#xC785;-1 &#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB860;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; HIV &#xBC00;&#xB9E4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC;&#xD560; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC; infectivity &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; HIV&#xB85C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xAD00;&#xB300; &#xD55C; MT4 &#xC140;&#xC5D0; &#xACAC;&#xACE0; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131;, &#xC544;&#xC9C1; &#xB2E4;&#xB978; T-&#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xD3BC;&#xCCD0;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C; &#xADF8;-Igfp&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xAC1C; &#xADF8; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9; &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP &#xD615;&#xAD11; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xAC1C; &#xADF8; epitopes oligomerization&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xC870;. &#xC774; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131;, &#xD615;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC2DC;&#xAC01; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xAC1C; &#xADF8; oligomerization &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D;&#xD55C; oligomerization. 4 &#xCC28;&#xC6D0;, &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; confocal &#xC601;&#xC0C1; &#xAC1C; &#xADF8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBE0C;&#xB7EC;&#xC2DC;&#xAC00; &#xCC98;&#xC74C;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C; &#xAC1C; &#xADF8; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC758; &#xC784;&#xC2DC; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C; &#xAC1C; &#xADF8; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xD611;&#xD68C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2A6;&#xAC8C;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xD638; &#xB192;&#xC740; &#xAC15;&#xB3C4; &#xB3C4;&#xB2EC;&#xD55C; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xB204;&#xC801; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC140; &#xAC12;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC62C;&#xB9BC; &#xD558; &#xACE0; HIV &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xC140;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xD655;&#xC0B0; &#xD615;&#xAD11;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xAC1C; &#xADF8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC911; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xC9C4;&#xD589;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD574; &#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC77C;&#xB828;&#xC758; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 1 (hiv-1) &#xAC1C; &#xADF8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; oligomerization&#xC640; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB2A5;&#xB825;, &#xBD99;&#xC77C; &#xD0DC;&#xADF8;&#xAC00; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; confocal &#xC601;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xC785;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El conjunto de enfermedades infecciosas del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) requiere que el transporte Gag y oligomerizaci&#xF3;n ser coordinado con su asociaci&#xF3;n con otras prote&#xED;nas virales, RNAs virales, y las membranas celulares. Hemos desarrollado un competente para la replicaci&#xF3;n del VIH de tipo 1 clon molecular que lleva una mordaza-interna o entre dominios de prote&#xED;na verde fluorescente (iGFP) la fusi&#xF3;n de revelar una secuencia temporal fisiol&#xF3;gicamente precisa de la localizaci&#xF3;n de Gag y oligomerizaci&#xF3;n durante la formaci&#xF3;n de las enfermedades infecciosas del VIH. Este recombinante del VIH es tan infeccioso como nativa del VIH en los ensayos de infectividad de una sola ronda, validando su uso para los estudios de tr&#xE1;fico. Se replica robustamente en c&#xE9;lulas MT4 permisivas y es infeccioso, sin embargo, se extiende pobremente en otras l&#xED;neas de c&#xE9;lulas T. Inmunofluorescencia de Gag-iGFP mostr&#xF3; un patr&#xF3;n muy similar a la de la mordaza nativo. Sin embargo, la intensa membrana plasm&#xE1;tica Gag-iGFP fluorescencia contrasta marcadamente con la de inmunofluorescencia en este sitio, lo que indica que muchos ep&#xED;topos mordaza puede ser enmascarada por oligomerizaci&#xF3;n. Consistente con esto, los estudios de resonancia de fluorescencia de transferencia de energ&#xED;a visualiza oligomerizaci&#xF3;n intensa Gag en la membrana plasm&#xE1;tica y m&#xE1;s d&#xE9;biles en los sitios de oligomerizaci&#xF3;n citoplasm&#xE1;ticos. De cuatro dimensiones, el tiempo transcurrido imagen confocal revela una progresi&#xF3;n temporal de la distribuci&#xF3;n de la mordaza en horas en las que la mordaza es inicialmente de forma difusa localizada en el citoplasma. Las se&#xF1;ales de la membrana plasm&#xE1;tica se acumulan como Gag aumento de los niveles y vesicular asociaci&#xF3;n parece tarde, s&#xF3;lo despu&#xE9;s de plasma se&#xF1;ales de la membrana del sitio han llegado a la alta intensidad. Por &#xFA;ltimo, las rondas de c&#xE9;lulas y la activaci&#xF3;n hasta la proteasa del VIH induce la fluorescencia difusa en toda la c&#xE9;lula. Estas fases distintas revelan una progresi&#xF3;n natural de la trata de mordaza durante el programa de la expresi&#xF3;n de genes virales. VIH Gag-iGFP es una herramienta &#xFA;til para la disecci&#xF3;n de los mecanismos de ensamblaje viral y la transmisi&#xF3;n.

Secuencia de Virus de Inmunodeficiencia Humana Tipo 1 (VIH-1) Localizaci&#xF3;n de la mordaza y oligomerizaci&#xF3;n supervisado con im&#xE1;genes en vivo confocal de una replicaci&#xF3;n competente, marcado con fluorescencia del VIH-1

&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x635F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7C7B;&#x578B; 1 &#xFF08;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1) &#x53EF;&#x4EE5;&#x5F00;&#x59CB;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x975E;&#x611F;&#x67D3; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x53EF;&#x4EE5;&#x589E;&#x5F3A;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x79F0;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6; (VS) &#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x4ED4;&#x7EC6;&#x6D4B;&#x91CF; VS &#x5BF9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D85;&#x7075;&#x654F;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8BD5;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F30;&#x8BA1;&#x5F53;&#x6210;&#x7ACB; VS &#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x793A; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x4E3B; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x5438;&#x6536;&#x7684;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6BD4; 18,000-fold &#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5438;&#x6536; VS &#x5B58;&#x6B3E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FC5;&#x901F;&#x8FDB;&#x5165;&#x76EE;&#x6807; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x70B9;&#x3001; &#x6297;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x3002;&#x6B64;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5185;&#x5728;&#x9700;&#x8981; Env CD4 &#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8010;&#x5BF9;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x4E2D;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x6291;&#x5236;&#x5F02;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5220;&#x9664; Env &#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5C3E;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5E9F;&#x9664; VS &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8F6C;&#x79FB;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x5C06;&#x5448;&#x73B0; VS &#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x9650;&#x5236; VS &#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;VS &#x52A8;&#x6001;&#x5B9E;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x8FDB;&#x884C;&#x6301;&#x7EED;&#x3001; Env &#x4F9D;&#x8D56;&#x63A5;&#x89E6;&#x4E0E;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x7C7B;&#x4F3C; uropod &#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x3001; Env CD4 &#x534F;&#x8C03;&#x7C98;&#x9644;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5411;&#x672A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x53D7;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x5EFA;&#x8BAE; VS &#x5141;&#x8BB8;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x9003;&#x907F;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x5E76;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5C06;&#x5BDF;&#x89C9;&#x5230;&#x4F55;&#x79CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x751F;&#x4EA7;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x6216;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F20;&#x64AD;&#x901A;&#x8FC7;&#x643A;&#x5E26;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x79FB; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6A21;&#x5F0F;&#x88AB;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6301;&#x7EED; Env &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E2D;&#x548C;&#x8010;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;

Cell-free human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) can initiate infections, but contact between infected and uninfected T cells can enhance viral spread through intercellular structures called virological synapses (VS). The relative contribution of VS to cell-free viral transfer has not been carefully measured. Using an ultrasensitive, fluorescent virus transfer assay, we estimate that when VS between HIV-expressing Jurkat T cells and primary CD4(+) T cells are formed, cell-associated transfer of virus is 18,000-fold more efficient than uptake of cell-free virus. Furthermore, in contrast to cell-free virus uptake, the VS deposits virus rapidly into focal, trypsin-resistant compartments in target T cells. This massive virus internalization requires Env-CD4 receptor interactions but is resistant to inhibition by patient-derived neutralizing antisera that inhibit homologous cell-free virus. Deleting the Env cytoplasmic tail does not abrogate VS-mediated transfer, but it renders the VS sensitive to neutralizing antibodies, suggesting that the tail limits exposure of VS-neutralizing epitopes on the surface of infected cells. Dynamic live imaging of the VS reveals that HIV-expressing cells are polarized and make sustained, Env-dependent contacts with target cells through uropod-like structures. The polarized T-cell morphology, Env-CD4 coordinated adhesion, and viral transfer from HIV-infected to uninfected cells suggest that VS allows HIV-1 to evade antibody neutralization and to disseminate efficiently. Future studies will discern to what extent this massive viral transfer contributes to productive infection or viral dissemination through the migration of virus-carrying T cells.

Predominant mode of human immunodeficiency virus transfer between T cells is mediated by sustained Env-dependent neutralization-resistant virological synapses.

Cell-libre de type virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine 1 (VIH-1) peut d&#xE9;clencher des infections, mais les contacts entre les cellules infect&#xE9;es et non infect&#xE9;es T peut am&#xE9;liorer la propagation du virus &#xE0; travers des structures appel&#xE9;es synapses virologiques intercellulaires (VS). La contribution relative de VS &#xE0; la cellule sans transfert virale n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; soigneusement mesur&#xE9;s. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un ultrasensible, immunofluorescence transfert du virus, nous estimons que, quand VS entre le VIH-exprimant cellules Jurkat T CD4 et primaires (+) des cellules T sont form&#xE9;es, associ&#xE9; &#xE0; une cellule de transfert du virus est de 18.000 fois plus efficace que l&#x26;#39;absorption de la cellule sans virus. En outre, contrairement &#xE0; l&#x26;#39;absorption du virus sans cellule, le virus VS d&#xE9;p&#xF4;ts rapidement dans focaux, r&#xE9;sistant &#xE0; la trypsine compartiments dans les lymphocytes T cibles. Cette internalisation du virus massif n&#xE9;cessite des interactions r&#xE9;cepteurs Env-CD4, mais r&#xE9;siste &#xE0; l&#x26;#39;inhibition par d&#xE9;riv&#xE9; du patient antis&#xE9;rums neutralisant qui inhibent virus homologue acellulaire. Suppression de la queue cytoplasmique Env n&#x26;#39;abroge pas VS-m&#xE9;diation transfert, mais il rend le VS sensible aux anticorps neutralisants, ce qui sugg&#xE8;re que la queue limite l&#x26;#39;exposition des &#xE9;pitopes neutralisants VS-sur la surface des cellules infect&#xE9;es. Imagerie dynamique en direct de la VS r&#xE9;v&#xE8;le que le VIH des cellules exprimant sont polaris&#xE9;es et faire subies, Env-d&#xE9;pendants contacts avec les cellules cibles par le biais des structures de type uropode. La polarisation des cellules T morphologie, ENV-CD4 adh&#xE9;rence coordonn&#xE9;, et le transfert viral &#xE0; partir infect&#xE9;s par le VIH &#xE0; des cellules non infect&#xE9;es sugg&#xE8;rent que VS permet au VIH-1 &#xE0; &#xE9;chapper &#xE0; la neutralisation des anticorps et de diffuser efficacement. De futures &#xE9;tudes discerner dans quelle mesure ce transfert massif virale contribue &#xE0; une infection productive ou de la diffusion virale par le biais de la migration des virus portant des cellules T.

Principal mode de transfert du virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine entre les cellules T est m&#xE9;di&#xE9;e par Env-d&#xE9;pendante soutenus Neutralisation r&#xE9;sistant synapses virologiques

Zellfreien humanen Immundefizienz-Virustyp 1 (HIV-1) kann Infektionen initiieren kann, aber Kontakt zwischen infizierten und nicht infizierten T-Zellen virale Verbreitung durch interzellul&auml;re Strukturen genannt virologische Synapsen (VS). Der relative Beitrag der VS zellfreien viralen &Uuml;bertragung wurde nicht sorgf&auml;ltig gemessen. Verwenden ein hochsensitives, fluoreszierende Virus-&Uuml;bertragung-Assay, sch&auml;tzen wir, dass bei VS zwischen HIV-Ausdr&uuml;cken Jurkat T-Zellen und prim&auml;re CD4(+) T-Zellen gebildet werden, Zelle-assoziierte &Uuml;bertragung des Virus 18,000-fold effizienter als Aufnahme von zellfreien Virus. Dar&uuml;ber hinaus im Gegensatz zur zellfreien Virus-Aufnahme, die VS Einlagen Virus rasch in fokale, Trypsin-resistenten Depots in Zielzellen T. Diese massiven Virus-Internalisierung erfordert Env-CD4-Rezeptor-Interaktionen aber resistent gegen Hemmung von Patienten abgeleiteten neutralisierende Antiseren, die homologe zellfreien Virus hemmen. L&ouml;schen des Env zytoplasmatischen Schwanzes nicht aufhebt, VS-vermittelte Transfer, aber es macht die VS empfindlich auf neutralisierenden Antik&ouml;rper, was darauf hindeutet, dass der Schwanz von VS-Neutralisierung Epitopes auf der Oberfl&auml;che der infizierten Zellen Expositionsgrenzwerte. Dynamische Leben Bildgebung des VS zeigt, dass HIV-Ausdruck Zellen polarisiert ist und nachhaltiges, Env-abh&auml;ngige Kontakte mit Zielzellen durch Uropod-Strukturen. Die polarisierte T-Zell-Morphologie, Env-CD4-koordiniert Adh&auml;sion und viralen &Uuml;bertragung von HIV-infizierten auf nicht infizierten Zellen schlagen vor, da&szlig; VS mit HIV-1, Antik&ouml;rper Neutralisierung zu entgehen und effizient zu verbreiten k&ouml;nnen. Zuk&uuml;nftige Studien werden erkennen, inwieweit diese massive viralen &Uuml;bertragung zur produktiven Infektion oder virale Verbreitung durch die Migration von Virus-tragenden T-Zellen beitr&auml;gt.

Vorherrschende Modus des humanen Immundefizienz-Virus-&Uuml;bertragung zwischen T-Zellen ist durch anhaltende Env-abh&auml;ngige Neutralisierung und s&auml;urefeste virologischen Synapsen vermittelt.

Cell-free virus dell&#39;immunodeficienza umana di tipo 1 (HIV-1) pu&ograve; avviare le infezioni, ma il contatto tra cellule T infettate e non infette pu&ograve; migliorare la diffusione virale attraverso strutture intercellulare chiamato sinapsi virologiche (VS). Il contributo relativo del VS trasferimento senza cellula virale non &egrave; stato accuratamente misurato. Utilizzando un dosaggio di trasferimento virus ultrasensibile, fluorescenti, si stima che quando VS tra cellule che esprimono l&#39;HIV Jurkat T e le cellule T CD4(+) primarie sono formate, cell-associated trasferimento del virus &egrave; 18,000-fold pi&ugrave; efficiente rispetto all&#39;assorbimento del virus senza cellula. Inoltre, a differenza di assorbimento di cell-free virus, il VS depositi virus rapidamente in compartimenti focali, tripsina-resistenti in cellule bersaglio T. Questa interiorizzazione massiccia virus richiede interazioni recettore CD4 Env ma &egrave; resistente all&#39;inibizione di antisieri neutralizzanti derivato da paziente che inibiscono il virus omologo senza cellula. L&#39;eliminazione della coda citoplasmatica Env non abrogare trasferimento VS-mediata, ma rende il VS sensibili a neutralizzare gli anticorpi, suggerendo che la coda limita l&#39;esposizione di epitopi neutralizzando VS sulla superficie delle cellule infette. Dinamica imaging diretta del VS rivela che le cellule che esprimono l&#39;HIV sono polarizzate e sostenuta, Env-dipendente contatti con cellule bersaglio attraverso uropod-come le strutture. La morfologia delle cellule T polarizzata, Env-CD4 coordinato adesione e trasferimento virale da infezione da HIV di cellule non infette suggeriscono che la VS permette l&#39;HIV-1 a sottrarsi alla neutralizzazione dell&#39;anticorpo e diffondere in modo efficiente. Gli studi futuri saranno discernere in quale misura questo massiccio trasferimento virale contribuisce alla diffusione virale attraverso la migrazione di cellule T che trasportano virus o infezione produttiva.

Modalit&agrave; predominante del virus dell&#39;immunodeficienza umana trasferimento tra cellule T &egrave; mediata da sostenuta sinapsi di virologiche neutralizzazione-resistente Env-dipendente.

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Env&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5C3E;&#x90E8;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;VS-&#x5A92;&#x4ECB;&#x8EE2;&#x9001;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5C3E;&#x304C;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;VS-&#x4E2D;&#x548C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;VS&#x3092;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; VS&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;HIV&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x504F;&#x5149;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x8179;&#x80A2;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6301;&#x7D9A;&#x306F;&#x3001;env-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x63A5;&#x70B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x504F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x3001;env-CD4&#x8ABF;&#x6574;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x3001;&#x975E;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;HIV&#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306F;VS&#x304C;HIV-1&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x666E;&#x53CA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3084;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3069;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x307E;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

T&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x304C;&#x6301;&#x7D9A;Env&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x4E2D;&#x548C;&#x8010;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;

&#xD734;&#xB300; &#xBB34;&#xB8CC; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD0C0;&#xC785; 1 (hiv-1) &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418; &#xACE0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC811;&#xCD09; virological &#xB0C5; (VS) &#xB77C;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB300;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xC911; &#xD558; &#xAC8C; &#xCE21;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. &#xC608;&#xC0C1; &#x78C1;, &#xD615;&#xAD11; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; HIV &#xD45C;&#xD604; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAE30;&#xBCF8; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xC758; &#xB300; &#xD615;&#xC131; &#xB418; &#xBA74; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC804;&#xC1A1; &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; 18,000-fold &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xB2EC;&#xB9AC; VS &#xC608;&#xAE08; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xC0C1; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;, trypsin &#xBC29;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC774; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xD658;&#xACBD;&#xC744; CD4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3D9;&#xC885; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD658;&#xC790; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC911;&#xD654; antisera&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0;. &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB300; &#xC911;&#xC7AC; &#xC804;&#xC1A1; &#xD30C;&#xAE30; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; VS &#xC911;&#xD654; &#xD56D; &#xCCB4;, &#xAF2C;&#xB9AC; VS &#xC911;&#xD654; epitopes &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xC81C;&#xC548; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1;. &#xB300;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; HIV &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xD3B8;&#xAD11;&#xC740; &#xD558; &#xACE0; uropod &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC18D;, &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xC885;&#xC18D; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xBC1D;&#xD78C;&#xB2E4;. &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xD658;&#xACBD;&#xC744; CD4 &#xC811;&#xCC29;, &#xC870;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; HIV &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC804;&#xC1A1; VS &#xC218; HIV-1 &#xD56D; &#xCCB4; &#xC911;&#xD654;&#xB97C; &#xD68C;&#xD53C; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xD30C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB798; &#xD559;&#xBB38;&#xC774; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB610;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC5B4;&#xB290; &#xC815;&#xB3C4; &#xBD84;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC6B0;&#xC138; &#xBAA8;&#xB4DC; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xC885;&#xC18D; &#xC911;&#xD654; &#xBC29;&#xC9C0; virological &#xB0C5; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La c&#xE9;lula libre de virus de inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) pueden iniciar las infecciones, pero el contacto entre las c&#xE9;lulas T infectadas y no infectadas puede mejorar la propagaci&#xF3;n viral a trav&#xE9;s de estructuras intercelulares llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas (VS). La contribuci&#xF3;n relativa de VS a la celda libre de la transferencia viral no ha sido cuidadosamente medido. Utilizando un ensayo ultrasensible, fluorescente transferencia de virus, estimamos que cuando VS entre el VIH-expresi&#xF3;n de c&#xE9;lulas Jurkat T y CD4 primarias (+) las c&#xE9;lulas T se forman, asociada a las c&#xE9;lulas de transferencia de virus es 18.000 veces m&#xE1;s eficiente que la absorci&#xF3;n de c&#xE9;lulas libres virus. Adem&#xE1;s, en contraste con la absorci&#xF3;n del virus libre de c&#xE9;lulas, el virus SV dep&#xF3;sitos r&#xE1;pidamente en focales, tripsina resistentes compartimentos en las c&#xE9;lulas T diana. Esta internalizaci&#xF3;n del virus masivo requiere Env-CD4 interacciones de los receptores, pero es resistente a la inhibici&#xF3;n por paciente derivado de antisueros neutralizantes que inhiben virus hom&#xF3;logo libre de c&#xE9;lulas. La eliminaci&#xF3;n de la cola citopl&#xE1;smica Env no anula VS-mediada por la transferencia, pero hace que los SV sensible a los anticuerpos neutralizantes, lo que sugiere que la cola limita la exposici&#xF3;n de los SV-neutralizantes ep&#xED;topos en la superficie de las c&#xE9;lulas infectadas. Im&#xE1;genes din&#xE1;micas en vivo de la VS revela que el VIH-que expresan las c&#xE9;lulas est&#xE1;n polarizadas y hacer que haya sufrido, Env-dependientes de los contactos con las c&#xE9;lulas diana a trav&#xE9;s de ur&#xF3;podo-como las estructuras. La polarizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas T morfolog&#xED;a, Env-CD4 adherencia coordinada, y la transferencia viral de infectados por el VIH a las c&#xE9;lulas no infectadas sugieren que VS permite que el VIH-1 para eludir la neutralizaci&#xF3;n de anticuerpos y de difundir con eficacia. Futuros estudios podr&#xE1;n percibir hasta qu&#xE9; punto esta transferencia viral masiva contribuye a la infecci&#xF3;n productiva o de difusi&#xF3;n viral a trav&#xE9;s de la migraci&#xF3;n del virus de la portadora de las c&#xE9;lulas T.

Modo predominante de transferencia de virus de inmunodeficiencia humana entre las c&#xE9;lulas T est&#xE1; mediada por Env sostenidos dependiente de la resistencia-sinapsis virol&#xF3;gicas Neutralizaci&#xF3;n

&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x8FDE;&#x79F0;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5E95;&#x5C42;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E00;&#x76F4;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x4E0E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8DDF;&#x8E2A; Gag &#x6D3B;&#x7684; CD4 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x6355;&#x83B7;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8DE8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3001; &#x9AD8;&#x901F;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x89C6;&#x9891;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x663E;&#x793A;&#x5FAE;&#x7C73;&#x5927;&#x5C0F;&quot;&#x6309;&#x94AE;&quot;&#x542B; oligomerized &#x75C5;&#x6BD2; hiv-1 &#x6838;&#x5FC3;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6309;&#x94AE;&#x6324;&#x6EE1;&#x4E86;&#x840C;&#x82BD;&#x75C5;&#x6BD2; crescents&#x3002;&#x5F80;&#x7A97;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2;-&#x62C9;&#x767B;&#x5185;&#x90E8;&#x8F66;&#x53A2;&#x5728;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x8F93;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FDE;&#x7EED;&#x5B9A;&#x65F6;&#x76D1;&#x6D4B;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F18;&#x60E0;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x541E;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x52A0;&#x5F3A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;

&#x5B9A;&#x91CF; 3D &#x89C6;&#x9891;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x8DE8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;

The spread of HIV between immune cells is greatly enhanced by cell-cell adhesions called virological synapses, although the underlying mechanisms have been unclear. With use of an infectious, fluorescent clone of HIV, we tracked the movement of Gag in live CD4 T cells and captured the direct translocation of HIV across the virological synapse. Quantitative, high-speed three-dimensional (3D) video microscopy revealed the rapid formation of micrometer-sized "buttons" containing oligomerized viral Gag protein. Electron microscopy showed that these buttons were packed with budding viral crescents. Viral transfer events were observed to form virus-laden internal compartments within target cells. Continuous time-lapse monitoring showed preferential infection through synapses. Thus, HIV dissemination may be enhanced by virological synapse-mediated cell adhesion coupled to viral endocytosis.

Quantitative 3D video microscopy of HIV transfer across T cell virological synapses.

La propagation du VIH entre les cellules immunitaires est grandement renforc&#xE9;e par cellule-cellule, appel&#xE9;es synapses virologiques adh&#xE9;rences, bien que les m&#xE9;canismes sous-jacents ont &#xE9;t&#xE9; claire. Avec l&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;une maladie infectieuse, le clone fluorescent du VIH, nous avons suivi le mouvement de Gag en direct les cellules T CD4 et s&#x26;#39;empara de la translocation directe du VIH &#xE0; travers la synapse virologique. Quantitative, &#xE0; haute vitesse en trois dimensions la vid&#xE9;o-microscopie (3D) a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la formation rapide d&#x26;#39;taille microm&#xE9;trique &#x26;quot;boutons&#x26;quot; contenant oligom&#xE9;ris&#xE9; prot&#xE9;ine Gag virale. La microscopie &#xE9;lectronique a montr&#xE9; que ces boutons ont &#xE9;t&#xE9; emball&#xE9;s avec herbe croissants virales. &#xC9;v&#xE9;nements de transfert virales ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es pour former charg&#xE9;es de virus compartiments internes au sein des cellules cibles. Continue time-lapse de surveillance ont montr&#xE9; une infection pr&#xE9;f&#xE9;rentielle par des synapses. Ainsi, la diffusion du VIH peut &#xEA;tre renforc&#xE9;e par l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire m&#xE9;di&#xE9;e par synapse virologique coupl&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;endocytose virale.

Microscopie quantitative vid&#xE9;o 3D du VIH de transfert &#xE0; travers les synapses virologiques cellules T

Die Ausbreitung von HIV zwischen Immunzellen wird durch Zell-Zell-Adh&auml;sionen genannt virologische Synapsen erheblich verbessert, obwohl die zugrunde liegenden Mechanismen unklar gewesen. Mit Einsatz von einer infekti&ouml;sen, fluoreszierend Klon des HIV wir verfolgt die Bewegung der Gag in lebenden CD4 T-Zellen und erfasst den direkten Translokation von HIV in der virologischen Synapse. Quantitative, High-Speed-dreidimensionale (3D)-video-Mikroskopie deckte die rasche Bildung von Mikrometer Gr&ouml;&szlig;e &quot;Schaltfl&auml;chen&quot; mit oligomerized virale Gag-Protein. Elektronenmikroskopie zeigte, dass diese Tasten mit angehenden virale Halbmonde verpackt wurden. Zum Formular Virus beladene Innenf&auml;cher in Zielzellen wurden virale Transfer Ereignisse beobachtet. Kontinuierliche &Uuml;berwachung der Zeitraffer zeigte bevorzugte Infektionen durch Synapsen. Somit kann HIV-Verbreitung durch virologische Synapse-vermittelte Zelladh&auml;sion gekoppelt mit viralen Endozytose verbessert werden.

Quantitative 3D video-Mikroskopie der HIV-&Uuml;bertragung &uuml;ber T-Zell-virologischen Synapsen.

La diffusione dell&#39;HIV tra cellule del sistema immunitario &egrave; notevolmente migliorata da adesioni cellula-cellula chiamati sinapsi virologiche, sebbene i meccanismi sottostanti sono state poco chiari. Con l&#39;uso di un clone infettivo, fluorescente dell&#39;HIV, abbiamo monitorato il movimento di Gag in vivo delle cellule T CD4 e catturato la traslocazione diretta dell&#39;HIV attraverso la sinapsi virologica. Quantitativa, ad alta velocit&agrave; tridimensionale (3D) video microscopia rivel&ograve; la rapida formazione di dimensioni micrometriche &quot;pulsanti&quot; contenente oligomerized proteina virale di Gag. La microscopia elettronica ha dimostrato che questi pulsanti sono stati confezionati con mezzaluna virale in erba. Gli eventi di trasferimento virale sono stati osservati a scomparti interni carichi di virus forma all&#39;interno delle cellule bersaglio. Time-lapse di monitoraggio continuo hanno mostrato infezione preferenziale attraverso la sinapsi. Cos&igrave;, diffusione dell&#39;HIV pu&ograve; essere rafforzata dall&#39;adesione virologica mediata da sinapsi cellulare accoppiato per endocitosi virale.

Quantitativa 3D video microscopia del trasferimento dell&#39;HIV attraverso cellule T virologica sinapsi.

&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;HIV&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HIV&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;CD4 T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;HIV&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x6355;&#x7372;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x306A;3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x30D3;&#x30C7;&#x30AA;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;Gag&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E; &#x26;quot;&#x30DC;&#x30BF;&#x30F3;&#x26;quot;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DC;&#x30BF;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x82BD;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E09;&#x65E5;&#x6708;&#x304C;&#x8A70;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3060;&#x5185;&#x90E8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HIV&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;HIV&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;3D&#x30D3;&#x30C7;&#x30AA;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;

&#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xC758; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBD84;&#xBA85; &#xC788;&#xB2E4; &#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140; &#xC720;&#xCC29; virological &#xB0C5; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xBA74; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. HIV&#xC758; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131;, &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC1C; &#xADF8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; CD4 T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xCEA1;&#xCC98;&#xD55C; virological &#xB0C5;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; HIV&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC804;. &#xC591;&#xC801;, &#xACE0;&#xC18D; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xC601;&#xC0C1; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD130; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &quot;&#xBC84;&#xD2BC;&quot; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; oligomerized &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC1C; &#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC774;&#xC774; &#xB2E8;&#xCD94; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD06C;&#xB808;&#xC13C;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB77C;&#xB374; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD6C;&#xD68D; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xC120; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; HIV &#xBCF4;&#xAE09; virological &#xB0C5; &#xC911;&#xC7AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; endocytosis &#xD558; &#xAC8C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

T &#xC140; virological &#xAC78;&#xCCD0; HIV &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC591;&#xC801; 3D &#xBE44;&#xB514;&#xC624; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; synapses.

La propagaci&#xF3;n del VIH entre las c&#xE9;lulas del sistema inmune es mucho mayor por las adherencias c&#xE9;lula-c&#xE9;lula llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas, aunque los mecanismos subyacentes no han sido claros. Con el uso de un clon infeccioso, fluorescente de VIH, seguimiento del movimiento de la mordaza en vivo las c&#xE9;lulas T CD4 y captur&#xF3; la translocaci&#xF3;n directa del VIH a trav&#xE9;s de la sinapsis virol&#xF3;gica. Cuantitativo, de alta velocidad en tres dimensiones (3D) la microscop&#xED;a de v&#xED;deo revela la r&#xE1;pida formaci&#xF3;n de micr&#xF3;metros de tama&#xF1;o &#x26;quot;botones&#x26;quot; que contienen la prote&#xED;na Gag oligomerizarse viral. La microscopia electr&#xF3;nica demostr&#xF3; que estos botones se llena de medias lunas en ciernes virales. Eventos virales de transferencia se observaron para formar virus cargados de compartimentos internos dentro de las c&#xE9;lulas diana. Continua de lapso de tiempo de seguimiento mostraron infecci&#xF3;n preferencial a trav&#xE9;s de las sinapsis. As&#xED;, la difusi&#xF3;n del VIH puede ser mejorada por adhesi&#xF3;n celular sinapsis virol&#xF3;gicas mediada acoplado a endocitosis viral.

Microscop&#xED;a cuantitativa de v&#xED;deo 3D del VIH de transferencia a trav&#xE9;s de sinapsis virol&#xF3;gicas de c&#xE9;lulas T

&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D;&#x901A;&#x4FE1;&#x548C;&#x534F;&#x8C03;-&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211; &#xFF08;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1&#xFF09; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; CD4(+) &#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7C7B;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5411; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7A7F;&#x68AD;&#x3002;&#x76EE;&#x6807;&#x4E86;&#x89E3;&#x901A;&#x8FC7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F93;&#x9001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5141;&#x8BB8;&#x6709;&#x673A;&#x4F1A;&#x9047;&#x5230;&#x6210;&#x4E3A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5149;&#x5B66;&#x954A;&#x5B50;&#x6765;&#x64CD;&#x7EB5;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP &#x9644;&#x8FD1;&#x672A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x539F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x67D3; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x63A2;&#x6D4B;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x9ECF;&#x9644;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x4E0D;&#x53EA;&#x662F;&#x4E3A;&#x4E86;&#x65B9;&#x4FBF;&#x8054;&#x7CFB;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x540C;&#x65F6;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x65F6;&#x4E0E;&#x5FEB;&#x901F; 4 D &#x5171;&#x7126;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x672F;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5229;&#x7528;&#x5149;&#x5B66;&#x954A;&#x5B50;&#x548C;&#x6700;&#x7EC8;&#x6765;&#x63A2;&#x6D4B;&#x4E4B;&#x524D;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

&#x64CD;&#x7EB5; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5149;&#x954A;&#x542F;&#x52A8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1&#x3002;

Cell-cell interactions through direct contact are very important for cellular communication and coordination - especially for immune cells. The human immunodeficiency virus type I (HIV-1) induces immune cell interactions between CD4(+) cells to shuttle between T cells via a virological synapse. A goal to understand the process of cell-cell transmission through virological synapses is to determine the cellular states that allow a chance encounter between cells to become a stable cell-cell adhesion. We demonstrate the use of optical tweezers to manipulate uninfected primary CD4(+) T cells near HIV Gag-iGFP transfected Jurkat T cells to probe the determinants that induce stable adhesion. When combined with fast 4D confocal fluorescence microscopy, optical tweezers can be utilized not only to facilitate cell-cell contact, but also to simultaneously track the formation of a virological synapse, and ultimately to probe the events that precede virus transfer.

Manipulating CD4+ T cells by optical tweezers for the initiation of cell-cell transfer of HIV-1.

Interactions cellule-cellule par contact direct sont tr&#xE8;s importants pour la communication cellulaire et de la coordination - en particulier pour les cellules immunitaires. Le virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine de type I (VIH-1) induit des interactions entre les cellules immunitaires CD4 (+) pour la navette entre les lymphocytes T via une synapse virologique. Un but de comprendre le processus de la cellule des cellules de transmission par des synapses virologiques est de d&#xE9;terminer les &#xE9;tats cellulaires qui permettent une rencontre fortuite entre les cellules de devenir une &#xE9;curie adh&#xE9;sion cellule-cellule. Nous d&#xE9;montrons l&#x26;#39;utilisation des pinces optiques &#xE0; manipuler non infect&#xE9;s CD4 primaires (+) des cellules T pr&#xE8;s du VIH Gag-iGFP cellules transfect&#xE9;es T Jurkat pour sonder les d&#xE9;terminants qui induisent une adh&#xE9;sion stable. Lorsqu&#x26;#39;il est combin&#xE9; avec la microscopie de fluorescence 4D rapide confocale, pinces optiques peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s non seulement pour faciliter contact cellule-cellule, mais aussi de suivre simultan&#xE9;ment la formation d&#x26;#39;une synapse virologique, et, finalement, pour sonder les &#xE9;v&#xE9;nements qui pr&#xE9;c&#xE8;dent le transfert du virus.

Manipulation cellules T CD4 + par pinces optiques pour l&#x26;#39;Initiation de cellule-cellule de transfert du VIH-1

Zell-Zell-Interaktionen durch den direkten Kontakt sind sehr wichtig f&uuml;r zellulare Kommunikation und Koordination - vor allem f&uuml;r Immunzellen. Der humanen Immundefizienz-Virustyp I HIV-1 induziert Immunzellen Interaktionen zwischen CD4(+) Zellen an Shuttle zwischen T-Zellen &uuml;ber eine virologische Synapse. Ein Ziel zu verstehen, dass der Prozess der Zell-Zell-&Uuml;bertragung durch virologischen Synapsen ist f&uuml;r die Bestimmung die zellul&auml;ren Staaten, die eine Chance erm&ouml;glichen Begegnung zwischen Zellen, eine stabile Zell-Zell-Adh&auml;sion zu werden. Wir zeigen, dass die Verwendung von optischen Pinzette, nicht infizierte prim&auml;re CD4(+) T-Zellen in der N&auml;he von HIV Gag-iGFP zu manipulieren die transfected Jurkat T-Zellen um die Determinanten zu sondieren, die stabile Haftung ausl&ouml;sen. In Kombination mit schnellen 4D konfokale Fluoreszenzmikroskopie kann eine optische Pinzette verwendet werden, nicht nur f&uuml;r Zell-Zell-Kontakt zu erleichtern, sondern auch gleichzeitig die Bildung einer virologischen Synapse, verfolgen und letztlich um die Ereignisse zu untersuchen, die Virus-&Uuml;bertragung vorausgehen.

Bearbeiten von CD4 + T &uuml;bertragen Zellen durch Optische Pinzette f&uuml;r die Einleitung von Zell-Zell HIV-1.

Interazioni cellula-cellula attraverso il contatto diretto sono molto importanti per la comunicazione cellulare e coordinamento - soprattutto per le cellule del sistema immunitario. Il virus dell&#39;immunodeficienza umana tipo I (HIV-1) induce le interazioni cellula immunitaria tra CD4(+) cellule a navetta tra cellule T attraverso una sinapsi virologiche. Un obiettivo per capire il processo di trasmissione della cellula-cellula attraverso sinapsi virologiche &egrave; quello di determinare gli Stati cellulari che permettono una possibilit&agrave; incontro tra cellule a diventare un&#39;adesione cellula-cellula stabili. Dimostriamo che l&#39;uso di una pinzetta ottica per manipolare le cellule T CD4(+) primarie non infette vicino HIV Gag-iGFP transfected le cellule Jurkat T per sondare i determinanti che inducono adesione stabile. Quando combinato con microscopia di fluorescenza confocale veloce 4 D, pinzette ottiche possono essere utilizzate non solo per facilitare il contatto cellula-cellula, ma anche di monitorare contemporaneamente la formazione di una sinapsi virologiche e in definitiva per sondare gli eventi che precedono il trasferimento di virus.

Manipolare T CD4 + le cellule di una pinzetta ottica per l&#39;avvio della cellula-cellula trasferimento di HIV-1.

&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x8ABF;&#x6574;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B; - &#x7279;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;I&#x578B;&#xFF08;HIV-1&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;T&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C8;&#x30EB;&#x30D0;&#x30B9;&#x306B;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x5076;&#x7136;&#x306E;&#x51FA;&#x4F1A;&#x3044;&#x304C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;HIV GAG-iGFP&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;Jurkat T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x4E3B;&#x306A;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x901F;&#x3044;4D&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x540C;&#x200B;&#x200B;&#x6642;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x524D;&#x306B;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CD4&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;+ HIV-1&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;

&#xC140;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC811;&#xCD09;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC740; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xBC0F; &#xC870;&#xC815;-&#xD2B9;&#xD788; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC720;&#xD615; I (HIV-1) CD4(+) &#xAC04;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774; &#xC154;&#xD2C0;&#xC744;. Virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xACFC;&#xC815; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xC811;&#xCC29; &#xB418;&#xB294; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP &#xADFC;&#xCC98; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD398; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xC811;&#xCC29; &#xB825;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Virological &#xB0C5;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xCD94;&#xC801; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC140; &#xC811;&#xCD09;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBE60;&#xB978; 4d confocal &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC55E;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;.

&#xC140;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC791; CD4 + T V-1&#xC758; &#xC804;&#xC1A1;.

Interacciones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula a trav&#xE9;s de contacto directo son muy importantes para la comunicaci&#xF3;n celular y la coordinaci&#xF3;n - especialmente para las c&#xE9;lulas del sistema inmune. El virus de inmunodeficiencia humana tipo I (VIH-1) induce interacciones celulares inmunes entre las c&#xE9;lulas CD4 (+) a lanzadera entre las c&#xE9;lulas T a trav&#xE9;s de una sinapsis virol&#xF3;gica. Un objetivo de comprender el proceso de c&#xE9;lula-c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n a trav&#xE9;s de las sinapsis virol&#xF3;gicas es determinar los estados celulares que permiten un encuentro casual entre las c&#xE9;lulas para convertirse en un estable adhesi&#xF3;n c&#xE9;lula-c&#xE9;lula. Se demuestra el uso de pinzas &#xF3;pticas para manipular c&#xE9;lulas CD4 infectadas primarias (+) cerca de las c&#xE9;lulas T contra el VIH iGFP Gag transfectadas las c&#xE9;lulas Jurkat T para investigar los factores determinantes que inducen la adhesi&#xF3;n estable. Cuando se combina con microscop&#xED;a de fluorescencia confocal r&#xE1;pido 4D, pinzas &#xF3;pticas se pueden utilizar no s&#xF3;lo para facilitar contacto c&#xE9;lula-c&#xE9;lula, sino tambi&#xE9;n para rastrear simult&#xE1;neamente la formaci&#xF3;n de una sinapsis virol&#xF3;gica, y en &#xFA;ltima instancia para sondar los eventos que preceden a la transferencia de virus.

La manipulaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T CD4 + por Pinzas &#xD3;pticas para el inicio de la transferencia de c&#xE9;lulas de c&#xE9;lulas del VIH-1

&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6807;&#x8BB0;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x542F;&#x7528;&#x4E86;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4F18;&#x5316; Gag GFP &#x6784;&#x9020;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92; &#xFF08;VLP&#xFF09; &#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x53D8;&#x79CD;&#x643A;&#x5E26;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x76D1;&#x6D4B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x5305;&#x542B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x63D2;&#x5165;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x77E9;&#x9635; (MA) &#x548C;&#x8863;&#x58F3; (CA) &#x57DF;&#xFF0C;&#x662F;&#x538B;&#x5236;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x590D;&#x5236;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#x751F;&#x6210;&#x8367;&#x5149;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5229;&#x7528;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP &#x6D41;&#x5F0F;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x5728;&#x5927;&#x4F1A;&#x548C;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x4F20;&#x8F93;&#x671F;&#x95F4;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x8DDF;&#x8E2A;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4F20;&#x9001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

The green fluorescent protein (GFP) is a powerful genetic marking tool that has enabled virologists to monitor and track viral proteins during HIV infection. Expression-optimized Gag-GFP constructs have been used to study virus-like particle (VLP) assembly and localization in cell types that are easily transfected. The development of HIV-1 variants carrying GFP within the context of the viral genome has facilitated the study of infection and has been particularly useful in monitoring the transfer of virus between cells following virological synapse formation. HIV Gag-iGFP, a viral clone that contains GFP inserted between the matrix (MA) and capsid (CA) domains of Gag, is the first replication competent molecular clone that generates fluorescent infectious particles. Here, we discuss some methods that exploit HIV Gag-iGFP to quantify cell-to-cell transmission of virus by flow cytometry and to track the proteins during assembly and transmission using live-cell imaging.

Tracking and quantitation of fluorescent HIV during cell-to-cell transmission.

La prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP) est un puissant outil de marquage g&#xE9;n&#xE9;tique qui a permis virologues pour surveiller et suivre les prot&#xE9;ines virales lors de l&#x26;#39;infection par le VIH. Expression optimis&#xE9;s Gag-GFP ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es pour &#xE9;tudier les virus-like particle (VLP) de montage et de la localisation dans des types cellulaires qui sont facilement transfect&#xE9;es. Le d&#xE9;veloppement de la lutte contre le VIH-1 des variantes portant GFP dans le contexte du g&#xE9;nome viral a facilit&#xE9; l&#x26;#39;&#xE9;tude de l&#x26;#39;infection et a &#xE9;t&#xE9; particuli&#xE8;rement utile dans le suivi du transfert du virus entre les cellules suivantes formation de la synapse virologique. VIH-gag iGFP, un clone viral qui contient la GFP ins&#xE9;r&#xE9; entre la matrice (MA) et de capside (CA) de domaines Gag, la premi&#xE8;re r&#xE9;plication est comp&#xE9;tente clone mol&#xE9;culaire qui g&#xE9;n&#xE8;re fluorescentes particules infectieuses. Ici, nous discutons de certaines m&#xE9;thodes qui exploitent le VIH Gag-iGFP de quantifier de cellule &#xE0; cellule de transmission du virus par cytom&#xE9;trie de flux et de suivre les prot&#xE9;ines lors de l&#x26;#39;assemblage et la transmission en utilisant imagerie des cellules vivantes.

Suivi et quantification de Fluorescent VIH cours de cellule &#xE0; cellule-Transmission

Das gr&uuml;ne fluoreszierende Protein (GFP) ist eine starke genetische Kennzeichnung-Tool, mit dem Virologen zur &Uuml;berwachung und Verfolgung virale Proteine w&auml;hrend der HIV-Infektion aktiviert hat. Optimiert f&uuml;r Ausdruck Gag-GFP-Konstrukte sind benutzt worden, Virus-Like Particle (VLP) Montage und Lokalisierung in Zelltypen, die leicht die transfected sind zu studieren. Die Entwicklung von HIV-1 Varianten mit GFP im Rahmen des viralen Genoms hat erleichtert das Studium der Infektion und wurde besonders f&uuml;r die &Uuml;bertragung des Virus zwischen Zellen, die nach Gr&uuml;ndung der virologischen Synapse &Uuml;berwachung. HIV Gag-iGFP, eine virale Klon, die GFP eingef&uuml;gt zwischen der Matrix (MA) und Kapsid (CA) Dom&auml;nen der Gag, enth&auml;lt ist die erste Replikation zust&auml;ndigen Molekulare Klon, der fluoreszierende infekti&ouml;se Partikel erzeugt. Hier diskutieren wir einige Methoden, die HIV Gag-iGFP, Zell-Zell-&Uuml;bertragung des Virus durch Durchflusszytometrie zu quantifizieren und die Proteine w&auml;hrend der Versammlung und Getriebe nach Leben-Zelle Darstellung verfolgen ausnutzen.

Tracking und quantitative Bestimmung der fluoreszierenden HIV w&auml;hrend der &Uuml;bertragung von Zelle zu Zelle.

La proteina fluorescente verde (GFP) &egrave; uno strumento potente marcatura genetica che ha permesso i virologi a monitor e traccia le proteine virali durante l&#39;infezione da HIV. Espressione-ottimizzato costrutti Gag-GFP sono stati utilizzati per studiare le particelle virus-simili (VLP) montaggio e localizzazione in tipi di celle transfected facilmente. Lo sviluppo delle varianti di HIV-1 che trasportano GFP all&#39;interno del contesto del genoma virale ha facilitato lo studio dell&#39;infezione ed &egrave; stato particolarmente utile nel monitoraggio il trasferimento del virus tra cellule in seguito formazione sinapsi virologiche. HIV Gag-iGFP, un clone virale contenente GFP inserito tra i domini di capside (CA) di Gag, e matrix (MA) &egrave; il primo replica competente molecular clone che genera particelle infettive fluorescenti. Qui, discuteremo alcuni metodi che sfruttano l&#39;HIV Gag-iGFP per quantificare la cella di trasmissione del virus tramite citometria a flusso e per tenere traccia delle proteine durante la trasmissione utilizzando live-cell imaging e assemblaggio.

Rilevamento e la quantificazione dell&#39;HIV fluorescenti durante la trasmissione di cella.

&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x8005;&#x306F;&#x3001;HIV&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x3001;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;-GFP&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#xFF08;VLP&#xFF09;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;GFP&#x3092;&#x904B;&#x3076;HIV-1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; HIV GAG-iGFP&#x3001;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;MA&#xFF09;&#x3068;Gag&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#xFF08;CA&#xFF09;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;GFP&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x7C92;&#x5B50;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HIV GAG-iGFP&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;&#x4F1D;&#x9001;&#x4E2D;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6D3B;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x9001;&#x4FE1;&#x6642;&#x306E;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;HIV&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;

&#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)&#xB294; HIV &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; virologists &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xCD94;&#xC801; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C; &#xADF8;-GFP &#xAD6C;&#xBB38; &#xC2DD; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD398; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790; (VLP) &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hiv-1 &#xBCC0;&#xC885; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; GFP&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xACE0; virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP, GFP &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; (MA)&#xACFC; &#xAC1C; &#xADF8;&#xC758; capsid (CA) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC720;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB860;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD615;&#xAD11; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC545;&#xC6A9; HIV &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP cytometry&#xB85C; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xACC4;&#xB7C9; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD94;&#xC801; &#xBC0F; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911; &#xD615;&#xAD11; HIV&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;.

La prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) es una poderosa herramienta de marcado gen&#xE9;tico que ha permitido a los vir&#xF3;logos para supervisar y realizar un seguimiento de las prote&#xED;nas virales durante la infecci&#xF3;n por el VIH. Optimizaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n-GFP Gag-construcciones se han utilizado para estudiar el virus-como part&#xED;cula (VLP) de la Asamblea y la localizaci&#xF3;n de los tipos de c&#xE9;lulas que son f&#xE1;cilmente transfectadas. El desarrollo de VIH-1 variantes que llevan GFP en el contexto del genoma viral ha facilitado el estudio de la infecci&#xF3;n y ha sido particularmente &#xFA;tiles para controlar la transferencia de virus entre las c&#xE9;lulas siguientes formaci&#xF3;n de sinapsis virol&#xF3;gicas. VIH Gag-iGFP, un clon viral que contiene las buenas pr&#xE1;cticas agrarias insertada entre la matriz (MA) y la c&#xE1;pside (CA) los dominios de la mordaza, es la primera replicaci&#xF3;n competente clon molecular que genera fluorescentes part&#xED;culas infecciosas. En este caso, hablamos de algunos de los m&#xE9;todos que se aprovechan de VIH Gag-iGFP para cuantificar la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n del virus por citometr&#xED;a de flujo y para realizar un seguimiento de las prote&#xED;nas durante el montaje y la transmisi&#xF3;n que utiliza c&#xE9;lulas vivas im&#xE1;genes.

Seguimiento y cuantificaci&#xF3;n de VIH durante el fluorescente de la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n

&#x5408;&#x5E76;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2; (HIV) &#x548C;&#x4E19;&#x578B;&#x809D;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2; (HCV) &#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x5236;&#x5B9A;&#x66F4;&#x5FEB;&#x901F;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BD4;&#x90A3;&#x4E9B;&#x53EA;&#x4E19;&#x578B;&#x809D;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5728;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E19;&#x578B;&#x809D;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x91CD;&#x53E0;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x6709;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x8FDB;&#x5C55;&#x5173;&#x8054;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; RNA &#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50; (C C &#x6BCD;&#x9898;) 5 (CCR5&#xFF09;&#x3001; &#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x8F85;&#x52A9;&#x53D7;&#x4F53;&#x53D7;&#x4F53;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;-X-&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178; (CXCR4) 4&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x5BF9;&#x6D3B;&#x5316;&#x809D;&#x661F;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x661F;) &#x539F;&#x5219;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x809D;&#x810F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x5BA1;&#x67E5;&#x662F;&#x5426;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x611F;&#x67D3;&#x661F;&#x3001; &#x63A2;&#x8BA8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x6761;&#x76EE;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6240;&#x53CD;&#x6620;&#x7684;&#x661F;&#x5C06;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4FC3;&#x708E;&#x548C; profibrogenic &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x62A5;&#x544A;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x9002;&#x5E94;&#x75C5;&#x6BD2;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; iiib &#x90E8; &#xFF08;CXCR4 &#x70ED;&#x5E26;&#x6216; X 4&#xFF09; &#x548C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; BaL &#xFF08;CCR5 &#x70ED;&#x5E26;&#x6216; R5&#xFF09; &#x548C;&#x4E3B;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x53EF;&#x611F;&#x67D3;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x661F;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3001; LX-2 &#x548C;&#x4E3B;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x661F;.&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5165;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x661F;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4F7F;&#x7528;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x6784;&#x9020;&#x4E2D;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x9F50;&#x591A;&#x592B;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;CD4 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x7684;&#x521D;&#x7EA7;&#x661F;&#x6F14;&#x793A;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x3002;&#x963B;&#x6B62;&#x6297; CD4&#x3001; &#x53CD;-CXCR4 &#x548C;&#x6297; CCR5 &#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5165;&#x661F;&#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F; CD4/&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50; hiv &#x611F;&#x67D3;&#x6291;&#x5236;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x4FC3;&#x8FDB; HSC &#x80F6;&#x539F;&#x6211;&#x8868;&#x8FBE;&#x53CA;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x4FC3;&#x708E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;-1&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; LX 2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x8F6C; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x7EFC;&#x4E0A;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;/&#x708E;&#x75C7;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x901A;&#x8FC7;&#x5BF9;&#x661F;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E2D;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;/&#x4E19;&#x578B;&#x809D;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6DF7;&#x5408;&#x611F;&#x67D3;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9AD8;&#x6D3B;&#x6027;&#x6297;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CBB;&#x7597;&#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x503C;&#x5F97;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;

&#x4EBA;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2; (HIV)-1 &#x611F;&#x67D3;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x661F;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x80F6;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6211;&#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;-1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF1A; &#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;/&#x4E19;&#x578B;&#x809D;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Patients coinfected with human immunodeficiency virus (HIV) and hepatitis C virus (HCV) develop more rapid fibrosis than those infected with HCV only. In HIV/HCV-coinfected patients, fibrosis progression correlates with HIV RNA levels, suggesting a direct role of HIV in liver fibrogenesis. Chemokine (C-C motif) receptor 5 (CCR5) and cysteine-X-cysteine receptor 4 (CXCR4), the two major coreceptors required for HIV entry into cells, are expressed on activated hepatic stellate cells (HSCs), the principle fibrogenic cell type in the liver. We therefore examined whether HIV can infect HSCs, explored the potential mechanisms of viral entry, and assessed the impact of infection as reflected by the ability of HSCs to transfer virus to T lymphocytes and elicit a proinflammatory and profibrogenic response. We report that the laboratory-adapted viruses HIV-IIIB (CXCR4-tropic or X4) and HIV-BaL (CCR5-tropic or R5) and primary HIV isolates can infect both a human stellate cell line, LX-2, and primary human HSCs. HIV entry and gene expression in HSCs was confirmed using HIV-green fluorescent protein (GFP) expression viral constructs in the presence or absence of the reverse-transcriptase inhibitor azidothymidine. CD4 expression on a subset of primary HSCs was demonstrated using fluorescence-activated cell sorting and immunofluorescence staining. Blocking experiments in the presence of anti-CD4, anti-CXCR4, and anti-CCR5 revealed that HIV entry into HSCs is predominantly CD4/chemokine coreceptor-independent. HIV infection promoted HSC collagen I expression and secretion of the proinflammatory cytokine monocyte chemoattractant protein-1. Furthermore, infected LX-2 cells were capable of transferring GFP-expressing virus to T lymphocytes in a coculture system. Conclusion: Taken together, our results suggest a potential role of HIV in liver fibrosis/inflammation mediated through effects on HSCs. The role of early highly active antiretroviral therapy initiation in patients with HIV/HCV coinfection warrants further investigation.

Human immunodeficiency virus (HIV)-1 infects human hepatic stellate cells and promotes collagen I and monocyte chemoattractant protein-1 expression: implications for the pathogenesis of HIV/hepatitis C virus-induced liver fibrosis.

Les patients co-infect&#xE9;s par le virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine (VIH) et de l&#x26;#39;h&#xE9;patite C (VHC) d&#xE9;veloppent une fibrose plus rapide que ceux qui sont infect&#xE9;s par le VHC seulement. Dans le VIH / VHC patients co-infect&#xE9;s, la progression de la fibrose est corr&#xE9;l&#xE9;e avec les niveaux d&#x26;#39;ARN du VIH, ce qui sugg&#xE8;re un r&#xF4;le direct du VIH dans la fibrogen&#xE8;se h&#xE9;patique. Chemokine (CC motif) des r&#xE9;cepteurs 5 (CCR5) et de la cyst&#xE9;ine-X-cyst&#xE9;ine r&#xE9;cepteur 4 (CXCR4), les deux cor&#xE9;cepteurs majeurs requis pour l&#x26;#39;entr&#xE9;e du VIH dans les cellules, sont exprim&#xE9;s sur les cellules &#xE9;toil&#xE9;es h&#xE9;patiques activ&#xE9;es (CSH), le type de cellule principe fibrog&#xE8;ne dans le foie. Nous avons donc examin&#xE9; si le VIH peut infecter les CSH, a explor&#xE9; les m&#xE9;canismes potentiels de l&#x26;#39;entr&#xE9;e virale, et &#xE9;valu&#xE9; l&#x26;#39;impact de l&#x26;#39;infection comme en t&#xE9;moigne la capacit&#xE9; des cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques de transf&#xE9;rer le virus aux lymphocytes T et induire une r&#xE9;ponse pro-inflammatoire et profibrogenic. Nous rapportons que les adapt&#xE9;es au laboratoire des virus VIH-IIIB (tropisme CXCR4 ou X4) et le VIH-Bal (&#xE0; tropisme CCR5 ou R5) et primaires isolats du VIH peut infecter &#xE0; la fois une lign&#xE9;e cellulaire humaine stellaire, LX-2, et primaires CSH humaines . L&#x26;#39;entr&#xE9;e du VIH et d&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes dans CSH a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9; en utilisant le VIH-vert fluorescent constructions prot&#xE9;iques expression (GFP) virales, en pr&#xE9;sence ou en l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;azidothymidine inhibiteur de transcriptase inverse. Expression de CD4 sur un sous-ensemble de cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques primaires a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;aide de tri cellulaire activ&#xE9; par fluorescence et coloration par immunofluorescence. Blocage des exp&#xE9;riences dans la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;anticorps anti-CD4, anti-CXCR4, et anti-CCR5 a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que l&#x26;#39;entr&#xE9;e du VIH dans les cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques est essentiellement CD4/chemokine cor&#xE9;cepteur ind&#xE9;pendant. Une infection &#xE0; VIH promu collag&#xE8;ne I HSC expression et la s&#xE9;cr&#xE9;tion de cytokines pro-inflammatoires du facteur chimiotactique monocytaire-1 prot&#xE9;ine. En outre, infect&#xE9;s LX-2 des cellules &#xE9;taient capables de transf&#xE9;rer la GFP-exprimer le virus aux lymphocytes T dans un syst&#xE8;me de coculture. Conclusion: Dans l&#x26;#39;ensemble, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un r&#xF4;le potentiel du VIH dans le foie fibrose / inflammation m&#xE9;di&#xE9;e par des effets sur les CSH. Le r&#xF4;le de l&#x26;#39;initiation pr&#xE9;coce th&#xE9;rapie antir&#xE9;trovirale hautement active chez les patients co-infection avec bons de souscription sur le VIH / VHC enqu&#xEA;te plus approfondie.

Virus d&#x26;#39;Immunod&#xE9;ficience Humaine (VIH) -1 Infecte l&#x26;#39;homme cellules &#xE9;toil&#xE9;es du foie et de promouvoir les collag&#xE8;ne I et monocytes Protein-1 Expression Chemoattractant: Implications pour la pathogen&#xE8;se du VIH / h&#xE9;patite fibrose induite par le virus C du foie

Patienten, die coinfected mit Human Immunodeficiency Virus (HIV) und Hepatitis-C-Virus (HCV) entwickeln eine raschere Fibrose als solche nur mit HCV infiziert. Bei HIV/HCV-coinfected Patienten korreliert Fibrose Fortschreiten mit HIV-RNA-Level, was auf eine direkte Rolle von HIV in Leber Fibrogenesis. Chemokine (C-C-Motiv) Rezeptor 5 (CCR5) und Cystein-X-Cystein-Rezeptor 4 (CXCR4), die zwei gro&szlig;en Corezeptors ben&ouml;tigt f&uuml;r die Einreise von HIV in Zellen, werden ausgedr&uuml;ckt auf aktivierten hepatischen stellate Zellen (HSCs), das Prinzip Fibrogenic Zelltyp in der Leber. Wir daher gepr&uuml;ft, ob HIV HSCs infizieren kann, untersucht die m&ouml;glichen Mechanismen der viralen Eintrag und bewertet die Auswirkungen einer Infektion, wie Sie sich von der F&auml;higkeit des HSCs Virus auf T-Lymphozyten &uuml;bertragen und eine Proinflammatory und Profibrogenic Antwort zu entlocken. Wir berichten, dass das Labor angepassten Viren HIV-IIIB (CXCR4-Tropic oder X 4) und HIV-BaL (CCR5-Tropic oder R5) und prim&auml;re HIV-Isolate infizieren k&ouml;nnen sowohl eine menschliche stellate Zelllinie, LX-2 und prim&auml;ren menschlichen HSCs HIV-Eintrag und Genexpression in HSCs mit HIV-gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (GFP) Ausdruck virale Konstrukte in das Vorhandensein oder Fehlen der Reverse-Transkriptase-Inhibitor Azidothymidine best&auml;tigt wurde. CD4 Ausdruck auf eine Teilmenge des prim&auml;ren HSCs zeigte mit Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung und Immunfluoreszenz-F&auml;rbung. Experimente in Anwesenheit von Anti-CD4, Anti-CXCR4 und Anti-CCR5 blockiert ergeben, dass HIV-Inkrafttreten HSCs vorwiegend CD4/Chemokine Coreceptor unabh&auml;ngig. HIV-Infektionen gef&ouml;rdert HSC Kollagen ich Expression und Sekretion der Proinflammatory Cytokine Monozyte Chemoattractant Protein-1. Dar&uuml;ber hinaus konnten infizierte LX-2-Zellen GFP-Ausdr&uuml;cken Virus auf T-Lymphozyten in einem Coculture-System zu &uuml;bertragen. Fazit: Zusammengenommen deuten unsere Ergebnisse eine m&ouml;gliche Rolle von HIV in Fibrose/Leberentz&uuml;ndung durch Auswirkungen auf HSCs vermittelt. Die Rolle der fr&uuml;hen hochaktive antiretrovirale Therapie Einleitung bei Patienten mit HIV/HCV Coinfection garantiert weitere Untersuchung.

Human Immunodeficiency Virus (HIV)-1 infiziert menschliche Leber stellate Zellen und f&ouml;rdert Kollagen I und Monozyte Chemoattractant Protein 1 Ausdruck: Implikationen f&uuml;r die Pathogenese der HIV/Hepatitis C Virus-induzierte Leberfibrose.

I pazienti coinfettati con virus dell&#39;immunodeficienza umana (HIV) e virus dell&#39;epatite C (HCV) sviluppano fibrosi pi&ugrave; rapida rispetto a quelli infettati con HCV solo. Nei pazienti con coinfezione HIV/HCV, progressione della fibrosi correla con livelli di HIV RNA, suggerendo un ruolo diretto del virus HIV nel fegato fibrogenesis. Recettore di chemochina (motivo C-C) 5 (CCR5) e cisteina-X-cisteina recettore 4 (CXCR4), le due principali coreceptors necessaria per l&#39;ingresso dell&#39;HIV nelle cellule, sono espressi sulle cellule stellate epatiche attivate (HSCs), il tipo di cella fibrogenic principio nel fegato. Abbiamo quindi esaminato se l&#39;HIV pu&ograve; infettare HSCs, esplorato i possibili meccanismi di entrata virale e valutato l&#39;impatto dell&#39;infezione come riflesso dalla capacit&agrave; di HSCs trasferire virus ai linfociti T e suscitare una risposta proinflammatory e profibrogenic. Segnaliamo che il laboratorio-adattato virus HIV-IIIB (CXCR4-Tropico o X 4) e HIV-BaL (CCR5-Tropico o R5) e gli isolati primari di HIV possono infettare sia una linea cellulare umana stellate, LX-2 e ingresso di HSCs. HIV umano primario ed espressione genica in HSCs &egrave; stata confermata mediante costrutti virali di HIV-green fluorescent protein (GFP) espressione in presenza o assenza di azidothymidine l&#39;inibitore della trascrittasi inversa. CD4 espressione su un sottoinsieme di HSCs primaria &egrave; stata dimostrata mediante fluorescenza-attivato delle cellule l&#39;ordinamento e la colorazione di immunofluorescenza. Bloccando gli esperimenti in presenza di anti-CD4, anti-CXCR4 e anti-CCR5 ha rivelato che l&#39;HIV entrata HSCs &egrave; prevalentemente CD4 delle chemochine coreceptor-indipendente. L&#39;infezione da HIV promosso collagene HSC sono espressione e la secrezione di proinflammatory cytokine monocyte chemoattractant proteina-1. Inoltre, LX-2 cellule infette sono stati in grado di trasferire virus che esprimono GFP di linfociti T in un sistema coculture. Conclusione: Presi insieme, i nostri risultati suggeriscono un potenziale ruolo dell&#39;HIV nella fibrosi epatica/infiammazione mediata attraverso effetti su HSCs. Il ruolo dell&#39;inizio terapia antiretrovirale altamente attiva precoce nei pazienti con coinfezione HIV/HCV garantisce ulteriore indagine.

Virus dell&#39;immunodeficienza umana (HIV) -1 infetta le cellule stellate epatiche umane e promuove collagene I e monocyte chemoattractant protein-1 espressione: implicazioni per la patogenesi della fibrosi epatica indotta dal virus HIV/epatite C.

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HIV / HCV&#x91CD;&#x8907;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x4FDD;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x65E9;&#x671F;&#x306B;&#x9AD8;&#x6D3B;&#x6027;&#x6297;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7642;&#x6CD5;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;HIV&#xFF09;-1&#x306F;&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;I&#x3068;&#x5358;&#x7403;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x4FC3;&#x9032;&#xFF1A;HIV / C&#x578B;&#x809D;&#x708E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x75C7;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;

&#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HIV)&#xC640; C &#xD615; &#xAC04;&#xC5FC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HCV) coinfected &#xD658;&#xC790; HCV&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xB9CC; &#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xBE60;&#xB978; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. HIV/HCV-coinfected &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D; &#xC9C4;&#xD589; &#xAC04; fibrogenesis&#xC5D0; HIV&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; HIV RNA &#xB808;&#xBCA8; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; Chemokine (C C &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;) 5 (CCR5) &#xBC0F; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;-X-&#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 4 (CXCR4), HIV &#xD56D;&#xBAA9; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; coreceptors &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC8FC;&#xBB38;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; (HSCs)&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xB9AC; fibrogenic &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; HSCs HIV&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558; &#xACE0; proinflammatory &#xBC0F; profibrogenic &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; Hscs&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC18;&#xC601;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC801;&#xC751; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; HIV IIIB (CXCR4 &#xD2B8;&#xB85C;&#xD53D; &#xB610;&#xB294; X 4) HIV-&#xBCA8; (CCR5-&#xD2B8;&#xB85C;&#xD53D; &#xB610;&#xB294; R5) &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; HIV &#xACA9;&#xB9AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC8FC;&#xBB38;&#xACFC; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;, LX 2&#xC640; &#xC8FC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; HSCs. HIV &#xD56D;&#xBAA9; &#xBC0F; Hscs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC720;&#xBB34;-&#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xBC18;&#xC751; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; azidothymidine&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-&#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xC2DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAD6C;&#xBB38;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; Hscs&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; CD4 &#xC2DD; &#xD615;&#xAD11; &#xD65C;&#xC131; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xC785;&#xAD6D; Hscs&#xB294; &#xC8FC;&#xB85C; CD4/chemokine &#xACF5;&#xAC1C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xC548;&#xD2F0;-CD4, &#xC548;&#xD2F0; CXCR4 &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0; CCR5 &#xC874;&#xC7AC; &#xC2E4;&#xD5D8; coreceptor &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;. HIV &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2B9;&#xC9C4; HSC &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xB098; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; proinflammatory cytokine monocyte chemoattractant &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; LX 2 &#xC140; coculture &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; GFP &#xD45C;&#xD604; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC804;&#xC1A1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;: &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; HIV&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; Hscs&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;/&#xC5FC;&#xC99D;&#xC5D0; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HIV/HCV coinfection &#xAC00;&#xC9C4; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131; &#xD56D; &#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xCD94;&#xAC00; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC99D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HIV)-1 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC8FC;&#xBB38;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD558; &#xACE0; &#xB098; &#xACE0; monocyte &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; chemoattractant &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 &#xC2DD;: &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;/C &#xD615; &#xAC04;&#xC5FC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;.

Los pacientes coinfectados con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) y hepatitis C (VHC) desarrollan fibrosis m&#xE1;s r&#xE1;pida que las personas infectadas con el VHC solo. En el VIH / VHC los pacientes coinfectados, la progresi&#xF3;n de la fibrosis se correlaciona con los niveles de ARN del VIH, lo que sugiere un papel directo del VIH en la fibrog&#xE9;nesis hep&#xE1;tica. Quimioquinas (motivo CC) del receptor de 5 (CCR5) y ciste&#xED;na-X-ciste&#xED;na del receptor 4 (CXCR4), los dos principales co-receptores necesarios para la entrada del VIH en las c&#xE9;lulas, se expresan en las c&#xE9;lulas estrelladas hep&#xE1;ticas activadas (HSC), el principio en el tipo de c&#xE9;lula fibrog&#xE9;nicos el h&#xED;gado. Por lo tanto, examinar si el VIH puede infectar a las CMH, explorar los posibles mecanismos de entrada del virus, y se evalu&#xF3; el impacto de la infecci&#xF3;n como se refleja en la capacidad de las CMH para transferir el virus a los linfocitos T y obtener una respuesta proinflamatoria y profibrog&#xE9;nica. Nos informan de que las pruebas de laboratorio adaptadas virus VIH-IIIB (CXCR4 o X4) y el VIH Bal-(con tropismo CCR5 o R5) y primarios aislados de VIH puede infectar a la vez una l&#xED;nea humana de c&#xE9;lulas estrelladas, LX-2, y de primaria HSCs humanas . La entrada del VIH y la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica en las CMH se confirm&#xF3; utilizando VIH-prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) construcciones de expresi&#xF3;n virales en presencia o ausencia de la azidotimidina inhibidor de la transcriptasa inversa. La expresi&#xF3;n de CD4 en un subconjunto de las CMH primarios se demostr&#xF3; mediante fluorescencia activada por clasificaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas y tinci&#xF3;n de inmunofluorescencia. El bloqueo de los experimentos en la presencia de anticuerpos anti-CD4, anti-CXCR4, CCR5 y anti-revel&#xF3; que la entrada del VIH en las CMH es predominantemente CD4/chemokine correceptor independiente. La infecci&#xF3;n por VIH promovido col&#xE1;geno HSC I de expresi&#xF3;n y secreci&#xF3;n de la citoquina proinflamatoria quimioatrayente monocitos prote&#xED;na-1. Por otra parte, infectados LX-2 c&#xE9;lulas fueron capaces de transferir las buenas pr&#xE1;cticas agrarias-que expresa el virus a los linfocitos T en un sistema de cocultivo. Conclusi&#xF3;n: En conjunto, nuestros resultados sugieren un posible papel del VIH en la fibrosis hep&#xE1;tica / inflamaci&#xF3;n mediada por los efectos sobre las CMH. El papel de la iniciaci&#xF3;n temprana la terapia antirretroviral altamente activa en pacientes con &#xF3;rdenes de coinfecci&#xF3;n VIH / VHC m&#xE1;s investigaci&#xF3;n.

Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH) -1 infecta a humanos las c&#xE9;lulas estrelladas hep&#xE1;ticas y promueve el col&#xE1;geno I y los monocitos chemoattractant prote&#xED;na-1 de expresi&#xF3;n: implicaciones para la patog&#xE9;nesis del VIH / hepatitis fibrosis inducida por virus C del h&#xED;gado

&#x4E2D;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x76F8;&#x5173;&#x80BE;&#x75C5;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5F15;&#x8D77;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x4F46; CD4 &#x9634;&#x6027;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x5982;&#x4F55;&#x8868;&#x8FBE;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x4E4B;&#x6570;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x4E0E;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x662F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x8981;&#x5927;&#x5927;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x548C; CD4 &#x6216; Env &#x53D1;&#x751F;&#x65E0;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A5;&#x89E6;&#x5230;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x9700;&#x8981;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x963B;&#x6B62;&#x7531;&#x786B;&#x9178;&#x7684;&#x591A;&#x7CD6;&#x6216;&#x805A;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x4F20;&#x5165;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2; Rna&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5B58;&#x5728;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684; de novo &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; nonimmune &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x5141;&#x8BB8;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7A9D;&#x85CF;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x5141;&#x8BB8;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

In animal models of HIV-associated nephropathy, the expression of HIV regulatory genes in epithelial cells is sufficient to cause disease, but how the CD4-negative epithelial cells come to express HIV genes is unknown. Here, we co-cultured T cells infected with fluorescently tagged HIV with renal tubular epithelial cells and observed efficient virus transfer between these cells. The quantity of HIV transferred was much greater than that achieved by exposure to large amounts of cell-free virus and occurred without a requirement for CD4 or Env. The transfer required stable cell-cell adhesion, which could be blocked by sulfated polysaccharides or poly-anionic compounds. We found that the internalization of virus could lead to de novo synthesis of viral protein from incoming viral RNAs even in the presence of a reverse transcriptase inhibitor. These results illustrate an interaction between infected T cells and nonimmune cells, supporting the presence of virological synapses between HIV-harboring T cells and renal tubular epithelial cells, allowing viral uptake and gene expression in epithelial cells.

Virological synapses allow HIV-1 uptake and gene expression in renal tubular epithelial cells.

Dans les mod&#xE8;les animaux de n&#xE9;phropathie li&#xE9;e au VIH, l&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes de r&#xE9;gulation du VIH dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales est suffisante pour causer la maladie, mais la fa&#xE7;on dont les CD4 n&#xE9;gatives cellules &#xE9;pith&#xE9;liales viennent d&#x26;#39;exprimer les g&#xE8;nes du VIH est inconnu. Ici, nous avons des cellules T co-cultiv&#xE9;es infect&#xE9;es par le VIH marqu&#xE9;es par fluorescence avec des tubules r&#xE9;naux et les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales observ&#xE9;e transfert efficace du virus entre ces cellules. La quantit&#xE9; de VIH transf&#xE9;r&#xE9;e &#xE9;tait beaucoup plus grande que celle obtenue par l&#x26;#39;exposition &#xE0; de grandes quantit&#xE9;s de cellules sans virus et a eu lieu sans l&#x26;#39;exigence d&#x26;#39;CD4 ou Env. Le transfert doit stable adh&#xE9;sion cellule-cellule, ce qui pourrait &#xEA;tre bloqu&#xE9; par des polysaccharides sulfat&#xE9;s ou poly-anioniques de compos&#xE9;s. Nous avons constat&#xE9; que l&#x26;#39;internalisation du virus pourrait conduire &#xE0; la synth&#xE8;se de novo de la prot&#xE9;ine virale ARN viraux &#xE0; partir entrants, m&#xEA;me en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;un inhibiteur de la transcriptase inverse. Ces r&#xE9;sultats illustrent une interaction entre les cellules T infect&#xE9;es et les cellules non immunes, en soutenant la pr&#xE9;sence de synapses virologiques entre le VIH-abritant les cellules T et les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales tubulaires r&#xE9;nales, ce qui permet l&#x26;#39;absorption virale et l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales.

Synapses virologiques Autoriser le VIH-1 Absorption et l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales tubulaires r&#xE9;nales

In Tiermodellen f&uuml;r HIV-assoziierte Nephropathie die Expression von HIV Regulatory Genen Epithelzellen ist ausreichend, um Krankheit zu verursachen, aber wie die CD4-Negative-Epithelzellen kommen HIV Gene auszudr&uuml;cken, ist unbekannt. Hier, co-cultured wir T-Zellen, die mit Leuchtstoff markierte HIV mit renale tubul&auml;re Epithelzellen und beobachteten effiziente Virus-&Uuml;bertragung zwischen diesen Zellen infiziert. Die Menge des HIV &uuml;bertragen war viel gr&ouml;&szlig;er als die Gef&auml;hrdung durch gro&szlig;e Mengen von zellfreien Virus erreicht und trat ohne Voraussetzung f&uuml;r CD4 oder Env. Die &Uuml;bertragung ben&ouml;tigt stabile Zell-Zell-Adh&auml;sion, die durch sulfatierten Polysaccharide oder Poly-anionische Verbindungen blockiert werden k&ouml;nnte. Wir fanden, dass die Internalisierung der Virus eingehende virale RNA auch in Gegenwart von einem Reverse-Transkriptase-Inhibitor zur de-Novo-Synthese von viral Protein f&uuml;hren k&ouml;nnte. Diese Ergebnisse zeigen eine Interaktion zwischen infizierte T-Zellen und nicht immune, erworbene, die Pr&auml;senz der virologischen Synapsen zwischen HIV-beherbergen T-Zellen und renale tubul&auml;re Epithelzellen, so dass virale Verbreitung und Genexpression in Epithelzellen zu unterst&uuml;tzen.

Virologische Synapsen k&ouml;nnen HIV-1-Aufnahme und Gen-Ausdruck in renale tubul&auml;re Epithelzellen.

In modelli animali di nefropatia da HIV-associati, l&#39;espressione dei geni regolatori dell&#39;HIV nelle cellule epiteliali &egrave; sufficiente a causare la malattia, ma come le cellule epiteliali CD4-negativo per esprimere geni HIV &egrave; sconosciuto. Qui, abbiamo co-cultured T cellule infettate con HIV fluorescente contrassegnati con delle cellule epiteliali tubulari renali e osservati virus efficiente trasferimento tra queste cellule. La quantit&agrave; di HIV trasferito era molto superiore a quello raggiunto da esposizione a grandi quantit&agrave; di virus cell-free e si &egrave; verificato senza un requisito per CD4 o Env. Il trasferimento richiesto adesione cellula-cellula stabile, che potrebbe essere bloccato dai polisaccaridi o composti anionici di poli. Abbiamo trovato che l&#39;internalizzazione del virus potrebbe portare a de novo sintesi di proteine virali da RNAs virale in arrivo anche in presenza di un inibitore della trascrittasi inversa. Questi risultati illustrano un&#39;interazione tra cellule T infettate e cellule non immune, sostenendo la presenza di sinapsi virologiche tra HIV-harboring T cellule e renale delle cellule epiteliali tubulari, permettendo la diffusione virale e l&#39;espressione genica in cellule epiteliali.

Sinapsi virologiche permettono l&#39;espressione di assorbimento e gene HIV-1 in cellule epiteliali tubulari renali.

HIV&#x95A2;&#x9023;&#x814E;&#x75C7;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HIV&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;CD4&#x9670;&#x6027;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;HIV&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;HIV&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8EE2;&#x9001;HIV&#x306E;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3068;CD4&#x307E;&#x305F;&#x306F;env&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8EE2;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x591A;&#x7CD6;&#x985E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3067;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x3067;&#x3082;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x53D7;&#x4FE1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RNA&#x304B;&#x3089;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;de novo&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;HIV&#x4FDD;&#x6709;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x975E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HIV-1&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;

HIV &#xAD00;&#xB828; &#xC2E0; &#xC7A5;&#xBCD1;&#xC758; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; HIV &#xADDC;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; HIV &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; CD4 &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC11C;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; co-cultured &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAD00; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; HIV&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;. HIV &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC218;&#xB7C9; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB9CE;&#xC740; &#xC591;&#xC758; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; CD4 &#xB610;&#xB294; &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D; &#xC5C6;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xD070; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC1A1; sulfated &#xB2E4; &#xB2F9; &#xB958; &#xB610;&#xB294; &#xD3F4; &#xB9AC; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD569;&#xC131; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xBC18;&#xC751; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB3C4; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC624;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; Rnas&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAE00;&#xADC0;&#xC640; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; HIV &#xC740;&#xB2C9; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAD00; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774; virological &#xB0C5;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; nonimmune &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Virological &#xB0C5; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAD00; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; HIV 1 &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBC0F; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xD5C8;&#xC6A9;.

En modelos animales de nefropat&#xED;a asociada al VIH, la expresi&#xF3;n de genes reguladores del VIH en las c&#xE9;lulas epiteliales es suficiente para causar la enfermedad, pero c&#xF3;mo los CD4-negativas c&#xE9;lulas epiteliales llegado a expresar genes del VIH es desconocida. Aqu&#xED;, se co-cultivaron c&#xE9;lulas T infectadas con VIH fluorescentemente marcados con las c&#xE9;lulas tubulares renales epiteliales y la transferencia de virus de la observada eficiente entre estas c&#xE9;lulas. La cantidad de VIH transferida fue mucho mayor que el conseguido por la exposici&#xF3;n a grandes cantidades de c&#xE9;lulas libres de virus y se produjo sin un requisito de CD4 o Env. La transferencia requiere estable adhesi&#xF3;n c&#xE9;lula-c&#xE9;lula, lo que podr&#xED;a ser bloqueado por polisac&#xE1;ridos sulfatados o compuestos poli-ani&#xF3;nicos. Hemos encontrado que la internalizaci&#xF3;n de virus podr&#xED;a conducir a la s&#xED;ntesis de novo de prote&#xED;na viral de ARN virales entrantes incluso en presencia de un inhibidor de la transcriptasa inversa. Estos resultados ilustran una interacci&#xF3;n entre las c&#xE9;lulas T infectadas y las c&#xE9;lulas no inmunes, apoyando la presencia de las sinapsis virol&#xF3;gicas entre el VIH-albergan las c&#xE9;lulas T y c&#xE9;lulas epiteliales tubulares renales, permitiendo la absorci&#xF3;n viral y la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica en las c&#xE9;lulas epiteliales.

Las sinapsis virol&#xF3;gicas permitir que el VIH-1 y la captaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica en c&#xE9;lulas epiteliales tubulares renales

&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1&#xFF09; 1 &#x7684;&#x4F20;&#x8F93;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8BB8;&#x591A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7C92;&#x5B50;&#x53EF;&#x4EE5;&#x540C;&#x65F6;&#x4F20;&#x8F93;&#x4ECE;&#x611F;&#x67D3;&#x5230;&#x672A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; CD4 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x7528;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6; (VS) &#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F4;&#x63A5;&#x68C0;&#x67E5;&#x5982;&#x4F55;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x7740;&#x624B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4EE3;&#x4E00;&#x4EE3;&#x4F20;&#x7ED9;&#x4E0B;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;&#x5373;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x67D3;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x66DD;&#x5149;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x5438;&#x6536;&#x4E86;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x66F4;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D7;&#x5230;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; coexpress &#x4E0D;&#x540C;&#x8367;&#x5149;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x53D8;&#x79CD;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8DE8;&#x5355;&#x4E2A; VS cotransmitted &#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x526F;&#x672C;&#x3002;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; hiv-1 &#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;titrates &#x4E0E;&#x6CCA;&#x677E;&#x7EDF;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x603B;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x7387;&#x504F;&#x4F4E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x6EF4;&#x5B9A;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x65B0;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x662F; cofluorescent &#x5E38;&#x91CF;&#x7684;&#x4E00;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x4E09;&#x91CD;&#x611F;&#x67D3;&#x65F6;&#x8868;&#x793A;&#x4E09;&#x79CD;&#x8367;&#x5149;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6350;&#x8D60;&#x8005;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E5F;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x6A21;&#x578B;&#x548C;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4F30;&#x8BA1;&#x5176;&#x4E2D; cofluorescence &#x4F4E;&#x4F30;&#x4E86;&#x661F;&#x5EA7;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x76F4;&#x63A5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 proviruses &#x5229;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5927;&#x5927;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 DNA &#x62F7;&#x8D1D;&#x90FD;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x4E3B;&#x6BD4;&#x5C06;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x8005;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x917F;&#x9152;&#x7EE7;&#x627F;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; hiv-1 &#x611F;&#x67D3;&#x662F;&#x5E38;&#x89C1;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x67D3;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E3;&#x91CA; proviruses &#x9AD8;&#x526F;&#x672C;&#x6570;&#x76EE;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5185;&#x53D1;&#x73B0;&#x53CA;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BE5;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4FDD;&#x7559;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x901A;&#x8FC7;&#x9057;&#x4F20;&#x4E92;&#x8865;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51C6;&#x79CD;&#x7684;&#x5F02;&#x8D28;&#x6027;&#x3002;

&#x5C06;&#x7EE7;&#x627F;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x917F;&#x9152;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;

During cell-to-cell transmission of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), many viral particles can be simultaneously transferred from infected to uninfected CD4 T cells through structures called virological synapses (VS). Here we directly examine how cell-free and cell-to-cell infections differ from infections initiated with cell-free virus in the number of genetic copies that are transmitted from one generation to the next, i.e., the genetic inheritance. Following exposure to HIV-1-expressing cells, we show that target cells with high viral uptake are much more likely to become infected. Using T cells that coexpress distinct fluorescent HIV-1 variants, we show that multiple copies of HIV-1 can be cotransmitted across a single VS. In contrast to cell-free HIV-1 infection, which titrates with Poisson statistics, the titration of cell-associated HIV-1 to low rates of overall infection generates a constant fraction of the newly infected cells that are cofluorescent. Triple infection was also readily detected when cells expressing three fluorescent viruses were used as donor cells. A computational model and a statistical model are presented to estimate the degree to which cofluorescence underestimates coinfection frequency. Lastly, direct detection of HIV-1 proviruses using fluorescence in situ hybridization confirmed that significantly more HIV-1 DNA copies are found in primary T cells infected with cell-associated virus than in those infected with cell-free virus. Together, the data suggest that multiploid inheritance is common during cell-to-cell HIV-1 infection. From this study, we suggest that cell-to-cell infection may explain the high copy numbers of proviruses found in infected cells in vivo and may provide a mechanism through which HIV preserves sequence heterogeneity in viral quasispecies through genetic complementation.

Multiploid inheritance of HIV-1 during cell-to-cell infection.

Au cours de cellule &#xE0; cellule de transmission du type de virus de l&#x26;#39;immunod&#xE9;ficience humaine 1 (VIH-1), de nombreuses particules virales peuvent &#xEA;tre transf&#xE9;r&#xE9;s simultan&#xE9;ment des personnes infect&#xE9;es aux CD4 non infect&#xE9;s cellules T par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire des structures appel&#xE9;es synapses virologiques (VS). Ici, nous avons directement examiner la mani&#xE8;re dont les infections des cellules libres et de cellule &#xE0; cellule diff&#xE8;rent d&#x26;#39;infections initi&#xE9;es avec la cellule sans virus dans le nombre de copies g&#xE9;n&#xE9;tiques qui sont transmis d&#x26;#39;une g&#xE9;n&#xE9;ration &#xE0; l&#x26;#39;autre, c&#x26;#39;est &#xE0; dire, l&#x26;#39;h&#xE9;ritage g&#xE9;n&#xE9;tique. Apr&#xE8;s une exposition au VIH-1-cellules exprimant, nous montrons que les cellules cibles &#xE0; forte absorption d&#x26;#39;virale &#xE9;lev&#xE9;e sont beaucoup plus susceptibles d&#x26;#39;&#xEA;tre infect&#xE9;es. L&#x26;#39;utilisation de cellules T qui coexpress distinctes fluorescentes variants VIH-1, nous montrons que plusieurs copies de VIH-1 peut &#xEA;tre cotransmitted &#xE0; travers une seule VS. En revanche &#xE0; la cellule sans infection VIH-1, qui titre avec les statistiques de Poisson, le titrage de la cellule associ&#xE9;e au VIH-1 &#xE0; faible taux d&#x26;#39;infection global g&#xE9;n&#xE8;re une fraction constante des cellules nouvellement infect&#xE9;es qui sont cofluorescent. L&#x26;#39;infection a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; Triple facilement d&#xE9;tect&#xE9;e lorsque les cellules exprimant trois virus fluorescents ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s comme les cellules du donneur. Un mod&#xE8;le de calcul et un mod&#xE8;le statistique sont pr&#xE9;sent&#xE9;s pour estimer le degr&#xE9; de sous-estime la fr&#xE9;quence cofluorescence co-infection. Enfin, la d&#xE9;tection directe du VIH-1 en utilisant provirus hybridation fluorescente in situ ont confirm&#xE9; que beaucoup plus de copies d&#x26;#39;ADN VIH-1 se trouvent dans des cellules primaires de T infect&#xE9;es par le virus associ&#xE9; aux cellules que chez ceux infect&#xE9;s par le virus de la cellule sans. Ensemble, les donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;h&#xE9;ritage multiploid est fr&#xE9;quente au cours de cellule &#xE0; cellule du VIH-1. De cette &#xE9;tude, nous sugg&#xE9;rons que la cellule &#xE0; cellule infection peut expliquer le nombre &#xE9;lev&#xE9; de copies de provirus trouv&#xE9;s dans les cellules infect&#xE9;es in vivo et peut fournir un m&#xE9;canisme par lequel le VIH pr&#xE9;serve l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; de s&#xE9;quence dans quasi-esp&#xE8;ce virale par compl&#xE9;mentation g&#xE9;n&#xE9;tique.

H&#xE9;ritage Multiploid du VIH-1 Lors de cellule &#xE0; cellule des infections

W&auml;hrend der Zell-Zell-&Uuml;bertragung des humanen Immundefizienz-Virustyp 1 (HIV-1) k&ouml;nnen viele virale Partikel gleichzeitig von &uuml;bertragen werden infiziert, nicht infizierten CD4 T-Zellen durch Strukturen genannt virologische Synapsen (VS). Hier untersuchen wir direkt, wie zellfreien und Zell-Zell-Infektionen unterscheiden sich von Infektionen initiierte mit zellfreien Virus in die Anzahl der genetische Kopien, die von einer Generation zur n&auml;chsten, d.h. das genetische Erbe &uuml;bertragen werden. Nach Exposition gegen&uuml;ber HIV-1-Ausdruck Zellen zeigen wir, dass Zielzellen mit hohen virale Aufnahme viel eher infiziert wird. Mit T-Zellen, die unterschiedliche Fluoreszenz HIV-1 Varianten coexpress, zeigen wir, dass mehrere Kopien HIV-1 in einem einzigen VS cotransmitted werden k&ouml;nnen. Im Gegensatz zur zellfreien HIV-1 Infektion, die mit Poisson Statistiken zu titrates, die Titrierung der Zelle-assoziierter HIV-1 zu g&uuml;nstigen Tarifen der allgemeinen Infektion erzeugt einen konstanten Bruchteil des neu infizierten Zellen, die Cofluorescent sind. Dreifach-Infektion wurde auch bereitwillig erkannt, wenn Zellen auszudr&uuml;cken drei fluoreszierende Viren als Spenderzellen verwendet wurden. Ein Computermodell und ein statistisches Modell werden vorgestellt, um den Grad an welcher Cofluorescence veranschlagt Coinfection Frequenz zu sch&auml;tzen. Schlie&szlig;lich best&auml;tigte direkte Nachweis von HIV-1 Proviren mit Fluoreszenz in Situ Hybridisierung, dass deutlich mehr HIV-1 DNA-Kopien im prim&auml;ren T-Zellen, die infizierte Zelle-assoziiertes Virus als in zellfreien Virus-infizierten befinden. Zusammen, zufolge die Daten Multiploid Vererbung Zell-Zell-HIV-1 Infektion gibt. Aus dieser Studie empfehlen wir, dass Zell-Zell-Infektion erkl&auml;ren k&ouml;nnten, die hohe Kopie-Nummern der Proviren in infizierten Zellen in-vivo gefunden und k&ouml;nnen bieten einen Mechanismus, durch den HIV Sequenz Heterogenit&auml;t in viraler Quasispezies durch genetische Komplementation bewahrt.

Multiploid Vererbung von HIV-1 w&auml;hrend der Zell-Zell-Infektion.

Durante la cella di trasmissione del virus dell&#39;immunodeficienza umana di tipo 1 (HIV-1), molte particelle virali possono essere contemporaneamente trasferiti da infezione di cellule T CD4 non infette attraverso strutture chiamate sinapsi virologiche (VS). Qui esaminiamo direttamente come cell-free e infezioni da cellula a cellula differiscono dalle infezioni ha avviate con il virus senza cellula del numero di copie genetiche che vengono trasmesse da una generazione alla successiva, vale a dire, l&#39;eredit&agrave; genetica. A seguito dell&#39;esposizione alle cellule che esprimono l&#39;HIV-1, ci mostra che le cellule bersaglio con alto assorbimento virale sono molto pi&ugrave; probabili essere infettati. Usando le cellule T che coesprimere distinte varianti fluorescenti di HIV-1, mostriamo che pi&ugrave; copie di HIV-1 possono essere cotransmitted attraverso un singolo VS. Contrariamente a cella senza infezione da HIV-1, che titola con statistiche di Poisson, la titolazione di HIV-1 cella associata a bassi tassi di infezione generale genera una frazione costante di cellule infette appena che sono cofluorescent. Tripla infezione rilevata prontamente anche quando le cellule che esprimono tre virus fluorescenti sono state usate come cellule del donatore. Un modello computazionale e un modello statistico sono presentati per stimare il grado a cui cofluorescence sottovaluti coinfezioni frequenza. Infine, rilevazione diretta di provirus di HIV-1 mediante fluorescenza in situ hybridization confermato che significativamente pi&ugrave; copie di HIV-1 DNA si trovano in cellule T primarie infettate con virus cell-associated rispetto a quelli infettati con virus senza cellula. Insieme, i dati suggeriscono che multiploid eredit&agrave; &egrave; comune durante l&#39;infezione da HIV-1 cellula-cellula. Da questo studio, consigliamo di che infezione da cellula a cellula pu&ograve; spiegare i numeri alti copia del provirus trovano in cellule infettate in vivo e possono fornire un meccanismo attraverso il quale l&#39;HIV conserva eterogeneit&agrave; di sequenza a quasispecie virale attraverso complementazione genetica.

Multiploid eredit&agrave; di HIV-1 durante l&#39;infezione da cellula a cellula.

&#x30D2;&#x30C8;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1&#x578B;&#xFF08;HIV-1&#xFF09;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x9593;&#x306E;&#x4F1D;&#x9001;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#xFF08;VS&#xFF09;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;CD4&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x306B;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x611F;&#x67D3;&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D99;&#x627F;&#x306B;&#x4E00;&#x4E16;&#x4EE3;&#x304B;&#x3089;&#x9001;&#x4FE1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x306E;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x958B;&#x59CB;&#x304B;&#x3089;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HIV-1&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x591A;&#x304F;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x86CD;&#x5149;HIV-1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;HIV-1&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x304C;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;VS&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;cotransmitted&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30A2;&#x30BD;&#x30F3;&#x7D71;&#x8A08;&#x3067;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;HIV-1&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x7387;&#x304C;&#x4F4E;&#x3044;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x95A2;&#x9023;HIV-1&#x306E;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x306F;cofluorescent&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E00;&#x5B9A;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 3&#x3064;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB;&#x611F;&#x67D3;&#x3082;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8A08;&#x7B97;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;cofluorescence&#x304C;&#x91CD;&#x8907;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x904E;&#x5C0F;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;HIV-1&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x691C;&#x51FA;&#x306F;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;HIV-1 DNA&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x304C;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x95A2;&#x9023;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x304C;multiploid&#x7D99;&#x627F;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;HIV-1&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9AD8;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;HIV&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306E;HIV-1&#x306E;Multiploid&#x7D99;&#x627F;

&#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 1 (hiv-1) &#xD615;&#xC758; &#xC140;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC785;&#xC790; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC62E;&#xACA8;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C; virological &#xB0C5; (VS) &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; CD4 T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC140; &#xAC10;&#xC5FC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC989;, &#xC720;&#xC804; &#xC0C1;&#xC18D; &#xB2E4;&#xC74C; &#xD55C; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC1A1; &#xB418;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xC218;&#xC5D0; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xC791;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; 1 &#xD45C;&#xD604; &#xC140;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;, &#xB2E4;&#xC74C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAE00;&#xADC0;&#xC640; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC740; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xD615;&#xAD11; hiv-1 &#xBCC0;&#xC885; coexpress T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB300;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1&#xC758; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8;&#xC744; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xB97C; cotransmitted &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; &#xD504;&#xB9AC; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xC544;&#xC1A1; &#xD1B5;&#xACC4; titrates &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xAC10;&#xC5FC; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB97C; V 1 &#xC140;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xC801;&#xC815; &#xC0DD;&#xC131; cofluorescent&#xC740; &#xC0C8;&#xB85C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xBD84;. &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB54C;&#xC5D0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACC4;&#xC0B0; &#xBAA8;&#xB378;&#xACFC; &#xD1B5;&#xACC4; &#xBAA8;&#xB378; cofluorescence underestimates coinfection &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC5B4;&#xB290; &#xC815;&#xB3C4; &#xCD94;&#xC815; &#xB418; &#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD615;&#xAD11; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; h i V-1 proviruses&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD655;&#xC778;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; HIV 1 DNA &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC140; &#xAD00;&#xB828; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC140; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; multiploid &#xC0C1;&#xC18D;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xAC10;&#xC5FC; proviruses&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC0AC;&#xBCF8; &#xBC88;&#xD638;&#xAC00; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; quasispecies&#xC5D0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Multiploid &#xC140; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1&#xC758; &#xC0C1;&#xC18D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Durante la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n de virus de inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1), muchas part&#xED;culas virales pueden ser simult&#xE1;neamente transfiere desde infectado a CD4 no infectadas c&#xE9;lulas T a trav&#xE9;s de estructuras llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas (VS). Aqu&#xED; se examinan directamente c&#xF3;mo las infecciones libres de c&#xE9;lulas y de c&#xE9;lula a c&#xE9;lula, se diferencian de las infecciones iniciados con c&#xE9;lulas libres de virus en el n&#xFA;mero de copias gen&#xE9;ticas que se transmiten de una generaci&#xF3;n a la siguiente, es decir, la herencia gen&#xE9;tica. Despu&#xE9;s de la exposici&#xF3;n al VIH-1-las c&#xE9;lulas que expresan, nos muestran que las c&#xE9;lulas diana con captaci&#xF3;n viral alta son mucho m&#xE1;s propensos a infectarse. El uso de c&#xE9;lulas T que coexpresan fluorescentes distintas variantes del VIH-1, se muestra que varias copias del VIH-1 puede ser cotransmitted a trav&#xE9;s de una sola VS. En contraste con c&#xE9;lulas libres de la infecci&#xF3;n por VIH-1, que titula con la estad&#xED;stica de Poisson, la valoraci&#xF3;n de la c&#xE9;lula asociada a VIH-1 a las bajas tasas de infecci&#xF3;n global genera una fracci&#xF3;n constante de las c&#xE9;lulas reci&#xE9;n infectadas que son cofluorescent. Infecci&#xF3;n triple fue tambi&#xE9;n detectar f&#xE1;cilmente cuando las c&#xE9;lulas que expresan tres virus fluorescentes se utilizaron como c&#xE9;lulas del donante. Un modelo computacional y un modelo estad&#xED;stico que se presentan para estimar el grado en que la frecuencia de coinfecci&#xF3;n cofluorescence subestima. Por &#xFA;ltimo, la detecci&#xF3;n directa del VIH-1 provirus mediante hibridaci&#xF3;n in situ fluorescente confirm&#xF3; que un n&#xFA;mero significativamente mayor de VIH-1 copias de ADN se encuentran en la ense&#xF1;anza primaria las c&#xE9;lulas T infectadas con el virus asociado a c&#xE9;lulas que en los infectados por el virus libre de c&#xE9;lulas. En conjunto, los datos sugieren que la herencia multiploid es com&#xFA;n durante la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de infecci&#xF3;n VIH-1. A partir de este estudio, sugieren que la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de la infecci&#xF3;n podr&#xED;a explicar el n&#xFA;mero de copias de alta de provirus que se encuentran en las c&#xE9;lulas infectadas in vivo y pueden proporcionar un mecanismo mediante el cual el VIH conserva heterogeneidad de la secuencia en cuasiespecies virales a trav&#xE9;s de la complementaci&#xF3;n gen&#xE9;tica.

La herencia Multiploid del VIH-1 durante la infecci&#xF3;n de la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula

&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x53EF;&#x7531;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x76F4;&#x63A5;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A5;&#x89E6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x79F0;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; (VS)&#x3002;&#x671F;&#x95F4; VS &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;virions &#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C; endosomes &#x5185;&#x5806;&#x79EF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7A7F;&#x8D8A; VS &#x540E;, &#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7ECF;&#x5386;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;VS &#x8F6C;&#x8BA9;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x51FA;&#x73B0;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684; virions &#x5411;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8840;&#x6E05;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6210;&#x719F;&#x3001; &#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x663E;&#x793A;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7C92;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x9700;&#x8981;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684; virions &#x63A5;&#x53D7;&#x627F;&#x5151;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE; endosomes&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8868;&#x660E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x53EF;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x5DF2;&#x8FC1;&#x79BB; VS &#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9897;&#x7C92;&#x6210;&#x719F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x76EE;&#x6807; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE; endosomes &#x4EE5;&#x4E0B;&#x901A;&#x8FC7; VS &#x4F20;&#x8F93;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9003;&#x907F;&#x6297;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7684; endosomal &#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#x3002;

HIV-1 can infect T cells by cell-free virus or by direct virion transfer between cells through cell contact-induced structures called virological synapses (VS). During VS-mediated infection, virions accumulate within target cell endosomes. We show that after crossing the VS, the transferred virus undergoes both maturation and viral membrane fusion. Following VS transfer, viral membrane fusion occurs with delayed kinetics and transferred virions display reduced sensitivity to patient antisera compared to mature, cell-free virus. Furthermore, particle fusion requires that the transferred virions undergo proteolytic maturation within acceptor cell endosomes, which occurs over several hours. Rapid, live cell confocal microscopy demonstrated that viral fusion can occur in compartments that have moved away from the VS. Thus, HIV particle maturation activates viral fusion in target CD4+ T cell endosomes following transfer across the VS and may represent a pathway by which HIV evades antibody neutralization.

Cell-to-cell transfer of HIV-1 via virological synapses leads to endosomal virion maturation that activates viral membrane fusion.

VIH-1 peut infecter des cellules T par acellulaire virus ou par transfert direct entre virion cellules &#xE0; travers de cellules de contact induites structures appel&#xE9; synapses virologiques (VS). Au cours de VS-m&#xE9;diation infection, les virions s&#x26;#39;accumulent dans la cellule cible endosomes. Nous montrons que, apr&#xE8;s avoir travers&#xE9; la VS, le virus transmis subit &#xE0; la fois la maturation et la fusion des membranes virale. Apr&#xE8;s le transfert VS, la fusion des membranes virale se produit avec une cin&#xE9;tique retard&#xE9;s et des virions transf&#xE9;r&#xE9;es s&#x26;#39;affichent une sensibilit&#xE9; r&#xE9;duite &#xE0; antis&#xE9;rums patient par rapport &#xE0; maturit&#xE9;, sans cellule du virus. En outre, la fusion des particules exige que les virions transmis subissent une maturation prot&#xE9;olytique dans la cellule accepteur endosomes, qui se produit pendant plusieurs heures. Rapide, la microscopie confocale de cellules vivantes ont d&#xE9;montr&#xE9; que la fusion virale peut se produire dans les compartiments qui ont d&#xE9;m&#xE9;nag&#xE9; loin de la VS. Ainsi, la maturation des particules VIH active la fusion virale des cellules CD4 + lymphocytes T cibles endosomes apr&#xE8;s le transfert &#xE0; travers le VS et peut repr&#xE9;senter une voie par laquelle le VIH &#xE9;chappe la neutralisation des anticorps.

Cell-&#xE0;-cellule de transfert du VIH-1 via les synapses virologiques m&#xE8;ne &#xE0; la maturation Virion endosomal qui active Fusion membrane virale

HIV-1 T-Zellen durch zellfreien Virus infizieren kann oder durch direkte Virion &Uuml;bertragung von Zellen durch Zelle Kontakt induziert Strukturen genannt virologischen Synapsen (VS). Sammeln Sie w&auml;hrend der VS-vermittelte Infektion Virionen innerhalb deiner Zelle Endosomen. Wir zeigen, dass das &uuml;bertragene Virus nach dem &Uuml;berqueren der VS, Reifung und virale Membrane Fusion durchl&auml;uft. Nach VS-Transfer virale Membran Verschmelzung tritt bei verz&ouml;gerten Kinetik und &uuml;bertragene Virionen geringere Empfindlichkeit f&uuml;r Patienten im Vergleich zu Reifen, zellfreien Virus Antiseren anzuzeigen. Partikel Fusion erfordert dar&uuml;ber hinaus, dass die &uuml;bertragenen Virionen proteolytische Reifung innerhalb Akzeptor Zelle Endosomen, unterziehen, die &uuml;ber mehrere Stunden auftritt. Schnelle, live Zelle confocal Mikroskopie gezeigt, dass virale Verschmelzung in den Abteilen auftreten kann, die Weg von der VS verschoben haben. Daher aktiviert HIV-Partikel-Reifung virale Schmelzverfahren in deiner CD4 + T Zelle Endosomen Folgendes &uuml;ber die VS &uuml;bertragen und kann einen Weg durch den HIV Antik&ouml;rper Neutralisierung entzieht.

Zell-Zell-&Uuml;bertragung von HIV-1 &uuml;ber virologischen Synapsen f&uuml;hrt zu Endosomen Virion Reifung, die virale Membran Verschmelzung aktiviert wird.

HIV-1 possono infettare le cellule T dal virus senza cellula o di trasferimento diretto virione tra cellule attraverso strutture cellulari indotta dal contatto chiamati virologiche sinapsi (VS). Durante l&#39;infezione VS-mediata, virioni si accumulano all&#39;interno endosomes delle cellule bersaglio. Mostriamo che dopo aver attraversato il VS, il virus trasferito subisce la maturazione e la fusione della membrana virale. In seguito VS trasferimento, fusione della membrana virale avviene con ritardo cinetica e virioni trasferiti visualizzazione ridotta sensibilit&agrave; al pazienti antisieri rispetto al virus maturo, privo di cella. Inoltre, la fusione delle particelle richiede che i virioni trasferiti sottoposti a maturazione proteolitica entro accettore cella endosomes, che si verifica sopra parecchie ore. Microscopia confocale cella rapida, diretta ha dimostrato che la fusione virale pu&ograve; verificarsi in compartimenti che hanno allontanato la VS. Cos&igrave;, maturazione della particella HIV attiva fusione virale nel bersaglio CD4 + T cell endosomes seguente trasferimento attraverso la VS e possono rappresentare un percorso da cui l&#39;HIV sfugge neutralizzazione dell&#39;anticorpo.

Trasferimento a cella di HIV-1 via sinapsi virologiche conduce alla maturazione del virione endosomal che attiva la fusione della membrana virale.

HIV-1&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#xFF08;VS&#xFF09;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; VS-&#x5A92;&#x4ECB;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;VS&#x3092;&#x6A2A;&#x65AD;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; VS&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x3084;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x611F;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x3067;&#x5206;&#x89E3;&#x719F;&#x6210;&#x3092;&#x7D4C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8FC5;&#x901F;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;VS&#x304B;&#x3089;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x533A;&#x753B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HIV&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;CD4&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;+ T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;VS&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;HIV&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x3092;&#x5FCC;&#x907F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;HIV-1&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x5C0E;&#x304F;

&#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; virological &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xC140; &#xC811;&#xCD09; &#xC720;&#xBC1C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; virion &#xC1A1;&#xAE08; synapses (&#xB300;). VS &#xC911;&#xC7AC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; virions &#xB300;&#xC0C1; &#xC140; endosomes &#xB0B4;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;. &#xC6B0;&#xB9AC; VS &#xAC74;&#xB108; &#xD6C4; &#xC131;&#xC219;&#xACFC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC218;&#xD589;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300; &#xC804;&#xC1A1; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; virions &#xD658;&#xC790; antisera &#xC131;&#xC219;, &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xAC10;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC785;&#xC790; &#xD4E8;&#xC804; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; virions &#xC218;&#xC220; &#xBA87; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC140; endosomes &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xC219; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD4E8;&#xC804; VS &#xBA40;&#xB9AC; &#xC774;&#xB3D9; &#xB41C; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; HIV &#xC785;&#xC790; &#xC131;&#xC219; &#xB300;&#xC0C1; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; endosomes &#xB2E4;&#xC74C; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; HIV &#xD56D; &#xCCB4; &#xC911;&#xD654;&#xB97C; evades &#xD1B5;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; h i V-1&#xC758; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; endosomal virion &#xC131;&#xC219;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

VIH-1 puede infectar a las c&#xE9;lulas T de c&#xE9;lulas libres de virus o viri&#xF3;n transferencia directa entre las c&#xE9;lulas a trav&#xE9;s de c&#xE9;lulas inducidas por contacto-estructuras llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas (VS). Durante la infecci&#xF3;n VS-mediada, los viriones se acumulan en la c&#xE9;lula diana endosomas. Se demuestra que despu&#xE9;s de cruzar el VS, el virus se transfiere sufre la maduraci&#xF3;n y la fusi&#xF3;n de la membrana viral. Despu&#xE9;s de la transferencia de VS, la fusi&#xF3;n de la membrana viral se produce con retraso y la cin&#xE9;tica de viriones transferidas aparecen disminuci&#xF3;n de la sensibilidad a la paciente en comparaci&#xF3;n con antisueros madura, c&#xE9;lulas libres de virus. Adem&#xE1;s, la fusi&#xF3;n de part&#xED;culas requiere que los viriones transferidos someterse a la maduraci&#xF3;n proteol&#xED;tica dentro de la celda aceptor endosomas, que se produce durante varias horas. Microscopio r&#xE1;pido, celular confocal en vivo demostr&#xF3; que la uni&#xF3;n del virus puede ocurrir en compartimientos que se han alejado de los SV. De este modo, la maduraci&#xF3;n de las part&#xED;culas del VIH activa la uni&#xF3;n del virus en las c&#xE9;lulas CD4 + de destino de las c&#xE9;lulas T endosomas despu&#xE9;s de su traslado a trav&#xE9;s de la SV y puede representar una v&#xED;a por la cual el VIH evade la neutralizaci&#xF3;n de anticuerpos.

De la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transferencia del VIH-1 trav&#xE9;s de las sinapsis virol&#xF3;gicas lleva a la maduraci&#xF3;n del viri&#xF3;n endosomal que activa fusi&#xF3;n de la membrana viral

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Publication title Cited by 3	2010
Publication title Cited by 8	2018

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Benjamin K. Chen

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