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University of Pennsylvania 

Drexel University

&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x7ACB; 11 (R)-&#x7F9F;&#x57FA;-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z) eicosatetraenoic &#x9178; (&#x8D6B;&#x7279;&#xFF09; &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176; (COX)-2-&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x82B1;&#x751F;&#x56DB;&#x70EF;&#x9178; (AA) &#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x3002;&#x7A33;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x7D20;&#x7A00;&#x91CA;&#x624B;&#x6027;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31; (LC)-&#x7535;&#x5B50;&#x6355;&#x83B7;&#x5927;&#x6C14;&#x538B;&#x5316;&#x5B66;&#x7535;&#x79BB; &#xFF08;ECAPCI&#xFF09; / &#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5; (MS) &#x7528;&#x6765;&#x91CF;&#x5316;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2 &#x6D3E;&#x751F; eicosanoids &#x4EBA;&#x7ED3;&#x76F4;&#x80A0;&#x817A;&#x764C; &#xFF08;LoVo) &#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2 &#x548C; 15-&#x7F9F;&#x57FA;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; (15-PGDH) &#x4E2D;&#x7684;&#x3002;11 (R)-&#x8D6B;&#x7279;&#x5206;&#x6CCC; AA &#x52A0;&#x6CD5;&#x4E4B;&#x524D;&#x8FC5;&#x901F;&#x7F29;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4EE3;&#x8C22;&#x53D1;&#x751F;&#x540E;&#x6570;&#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x8FBE;&#x5230;&#x5CF0;&#x503C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x91CD;&#x7EC4; 15-PGDH&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x6C27;&#x5316;&#x65F6;&#x82B1;&#x751F;&#x56DB;&#x70EF;&#x9178; 15 (S)-&#x7F9F;&#x57FA;&#xFF0C;&#x627E;&#x5230;&#x8981;&#x8F6C;&#x6362; 11 (R)-&#x8D6B;&#x7279;&#x5411; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z) eicosatetraenoic &#x9178; (&#x589E;&#x5B89;&#x578B;)&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;LoVo &#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x8F6C;&#x6362;&#x8D6B; 11 (R)-&#x7279;&#x4E3A; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x548C; 15-PGDH 5-[[4-(ethoxycarbonyl)phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic &#x9178; (CAY10397) &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528; &#xFF08;50 &mu; M&#xFF09; &#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E0E;&#x8D6B; 11 (R)-&#x7279;&#x76F8;&#x5E94;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2 &#x548C; 15 PGDH &#x4F5C;&#x4E3A;&#x8D1F;&#x8D23; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x9176;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x673A;&#x7BA1;&#x5C40;&#x52A0;&#x5165; LoVo &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFC;&#x81F4; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x5230;&#x5A92;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x5230;&#x5CF0;&#x503C;&#x6C34;&#x5E73;&#x5F00;&#x59CB;&#x5B75;&#x5316;&#x7684; 20 &#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x8FD9;&#x88AB;&#x8DDF; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x6C34;&#x5E73;&#x5927;&#x5E45;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; (GSH) S-&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; (GST) &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EE3;&#x8C22; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x5230; 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;-&#x80F1;&#x6B27;&#x745E; (&#x5409;)-&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;-&#x8D28;&#x8C31;/&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x7ECF;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5728; LoVo &#x7EC6;&#x80DE;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x6EB4;&#x8131;&#x6C27;&#x5C3F;&#x7519; (BrdU)-&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8110;) &#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x6563;&#x653E;&#x5C04;&#x514D;&#x75AB;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x534A;-&#x6781;&#x5927;&#x6291;&#x5236;&#x6D53;&#x5EA6; (IC(50)) 11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x4E3A;&#x8110;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F; 2.1 &mu; M&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;11-&#x7FB0;&#x57FA;-&#x589E;&#x5B89;&#x578B;&#x65F6;&#x82B1;&#x751F;&#x65B0;&#x578B;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2/15-PGDH-&#x6D3E;&#x751F;&#x56DB;&#x70EF;&#x9178;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4E3A; 15d-PGJ(2) &#x7684;&#x6548;&#x80FD;&#x4E0E;&#x6291;&#x5236;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;

11-Oxoeicosatetraenoic &#x9178;&#x662F;&#x73AF;&#x6C27;&#x5408;&#x9176;-2/15-&#x7F9F;&#x57FA;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x6E90;&#x6027;&#x6297;&#x589E;&#x6B96;&#x65F6;&#x82B1;&#x751F;&#x56DB;&#x70EF;&#x9178;&#x3002;

Previously, we established that 11(R)-hydroxy-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoic acid (HETE) was a significant cyclooxygenase (COX)-2-derived arachidonic acid (AA) metabolite in epithelial cells. Stable isotope dilution chiral liquid chromatography (LC)-electron capture atmospheric pressure chemical ionization (ECAPCI)/mass spectrometry (MS) was used to quantify COX-2-derived eicosanoids in the human colorectal adenocarcinoma (LoVo) epithelial cell line, which expresses both COX-2 and 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase (15-PGDH). 11(R)-HETE secretion reached peak concentrations within minutes after AA addition before rapidly diminishing, suggesting further metabolism had occurred. Surprisingly, recombinant 15-PGDH, which is normally specific for oxidation of eicosanoid 15(S)-hydroxyl groups, was found to convert 11(R)-HETE to 11-oxo-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoic acid (ETE). Furthermore, LoVo cell lysates converted 11(R)-HETE to 11-oxo-ETE and inhibition of 15-PGDH with 5-[[4-(ethoxycarbonyl)phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic acid (CAY10397) (50 Î¼M) significantly suppressed endogenous 11-oxo-ETE production with a corresponding increase in 11(R)-HETE. These data confirmed COX-2 and 15-PGDH as enzymes responsible for 11-oxo-ETE biosynthesis. Finally, addition of AA to the LoVo cells resulted in rapid secretion of 11-oxo-ETE into the media, reaching peak levels within 20 min of starting the incubation. This was followed by a sharp decrease in 11-oxo-ETE levels. Glutathione (GSH) S-transferase (GST) was found to metabolize 11-oxo-ETE to the 11-oxo-ETE-GSH (OEG)-adduct in LoVo cells, as confirmed by LC-MS/MS analysis. Bromodeoxyuridine (BrdU)-based cell proliferation assays in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) revealed that the half-maximal inhibitory concentration (IC(50)) of 11-oxo-ETE for inhibition of HUVEC proliferation was 2.1 Î¼M. These results show that 11-oxo-ETE is a novel COX-2/15-PGDH-derived eicosanoid, which inhibits endothelial cell proliferation with a potency that is similar to that observed for 15d-PGJ(2).

11-Oxoeicosatetraenoic acid is a cyclooxygenase-2/15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase-derived antiproliferative eicosanoid.

Auparavant, nous avons &#xE9;tabli que 11 (R)-hydroxy-5, 8,12,14 - (Z, Z, E, Z)-&#xE9;icosat&#xE9;tra&#xE9;no&#xEF;que (HETE) &#xE9;tait un inhibiteur de cyclooxyg&#xE9;nase significative (COX)-2-d&#xE9;riv&#xE9;e de l&#x26;#39;acide arachidonique (AA ) m&#xE9;tabolite dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales. Stable dilution isotopique par chromatographie liquide chiral (LC)-capture &#xE9;lectronique ionisation chimique &#xE0; pression atmosph&#xE9;rique (ECAPCI) / spectrom&#xE9;trie de masse (MS) a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour quantifier la COX-2-eicosano&#xEF;des d&#xE9;riv&#xE9;s de l&#x26;#39;ad&#xE9;nocarcinome colorectal humain (LoVo) lign&#xE9;e de cellules &#xE9;pith&#xE9;liales, qui exprime &#xE0; la fois COX-2 et 15-hydroxy prostaglandine d&#xE9;shydrog&#xE9;nase (15-PGDH). 11 (R)-HETE s&#xE9;cr&#xE9;tion atteint des concentrations maximales en minutes apr&#xE8;s l&#x26;#39;addition AA avant diminue rapidement, ce qui sugg&#xE8;re un m&#xE9;tabolisme suppl&#xE9;mentaire a eu lieu. &#xC9;tonnamment, recombinant 15-PGDH, qui est normalement sp&#xE9;cifique pour l&#x26;#39;oxydation des eicosano&#xEF;des 15 (S)-hydroxyle, a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; pour convertir 11 (R)-HETE &#xE0; 11-oxo-5, 8,12,14 - (Z, Z , E, Z)-&#xE9;icosat&#xE9;tra&#xE9;no&#xEF;que (ETE). En outre, la cellule transform&#xE9;e LoVo lysats 11 (R)-HETE &#xE0; 11-oxo-ETE et l&#x26;#39;inhibition de la 15-PGDH avec 5 - [[4 - (&#xE9;thoxycarbonyl) ph&#xE9;nyl] azo]-2-hydroxy-benz&#xE8;neac&#xE9;tique (CAY10397) (50 uM) a significativement r&#xE9;duit endog&#xE8;ne 11-oxo-ETE de production avec une augmentation correspondante de 11 (R)-HETE. Ces donn&#xE9;es ont confirm&#xE9; la COX-2 et la 15-PGDH que les enzymes responsables de la 11-oxo-ETE biosynth&#xE8;se. Enfin, outre des AA aux cellules LoVo entra&#xEE;n&#xE9; s&#xE9;cr&#xE9;tion rapide de 11-oxo-ETE dans le milieu, pour atteindre les niveaux de cr&#xEA;te en moins de 20 min &#xE0; partir de l&#x26;#39;incubation. Elle a &#xE9;t&#xE9; suivie par une forte diminution de 11-oxo-ETE niveaux. Le glutathion (GSH) S-transf&#xE9;rase (GST) a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; &#xE0; m&#xE9;taboliser 11-oxo-ETE &#xE0; la 11-oxo-ETE-GSH (OEG) d&#x26;#39;adduits dans les cellules LoVo, tel que confirm&#xE9; par l&#x26;#39;analyse LC-MS/MS. Bromod&#xE9;soxyuridine (BrdU) essais bas&#xE9;s sur la prolif&#xE9;ration cellulaire dans les cellules humaines endoth&#xE9;liales de veine ombilicale (HUVEC) ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la concentration inhibitrice demi-maximale (IC (50)) de la 11-oxo-ETE pour l&#x26;#39;inhibition de la prolif&#xE9;ration des HUVEC &#xE9;tait de 2,1 uM. Ces r&#xE9;sultats montrent que 11-oxo-ETE est un roman d&#x26;#39;eicosano&#xEF;des COX-2/15-PGDH-derived, qui inhibe la prolif&#xE9;ration des cellules endoth&#xE9;liales avec une puissance qui est semblable &#xE0; celle observ&#xE9;e pour 15d-PGJ (2).

11-Oxoeicosatetraenoic acide est un d&#xE9;riv&#xE9; de Cyclooxygenase-2/15-hydroxyprostaglandin d&#xE9;shydrog&#xE9;nase eicosano&#xEF;des antiprolif&#xE9;rative

Zuvor wir festgestellt, dass-11 (R) hydroxy - 5,8,12,14--(Z,Z,E,Z)-Eicosatetraenoic S&auml;ure (HETE) eine bedeutende Cyclooxygenase (COX)-2 war-Metaboliten der Arachidons&auml;ure (AA) in Epithelzellen abgeleitet. Stabile Isotope Verd&uuml;nnung chirale Fl&uuml;ssigchromatographie (LC)-Elektron Erfassung Atmospheric Pressure chemical Ionization (ECAPCI) / Massenspektrometrie (MS) wurde verwendet, um die COX-2 abgeleitete Eicosanoide der menschlichen kolorektalen Adenokarzinoms (LoVo) Epithelzellen Linie, quantifizieren, COX-2 und 15-Hydroxyprostaglandin-Dehydrogenase (15-PGDH) ausdr&uuml;ckt. 11 (R)-HETE Sekretion erreicht H&ouml;hepunkt Konzentrationen innerhalb von Minuten nach Zugabe der AA vor rasch r&uuml;ckl&auml;ufig, vorschlagen weitere Stoffwechsel gekommen. &Uuml;berraschenderweise rekombinante 15-PGDH, der normalerweise spezifisch f&uuml;r Oxidation von Eikosanoide 15 (S) ist-Hydroxylgruppen, wurde festgestellt, dass konvertieren 11 (R) - HETE bis 11 - Oxo-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-Eicosatetraenoic S&auml;ure (ETE). Dar&uuml;ber hinaus konvertiert LoVo Zelllysate 11 (R)-HETE 11-Oxo-ETE und Hemmung der 15-PGDH mit 5-[[4-(ethoxycarbonyl)phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic S&auml;ure (CAY10397) (50 &mu;M) erheblich unterdr&uuml;ckt endogene 11-Oxo-ETE-Produktion mit einem entsprechenden Anstieg der 11 (R)-HETE. Diese Daten werden als Enzyme verantwortlich f&uuml;r 11-Oxo-ETE-Biosynthese COX-2 und 15-PGDH best&auml;tigt. Zusatz von AA auf die LoVo-Zellen f&uuml;hrte schlie&szlig;lich schnelle Sekretion von 11-Oxo-ETE in den Medien, h&ouml;chstem Niveau innerhalb 20 Minuten beginnen die Inkubation zu erreichen. Danach folgte ein starker R&uuml;ckgang in 11-Oxo-ETE-Ebenen. Glutathion (GSH) S-Transferase (GST) wurde festgestellt, dass 11-Oxo-ETE-11-Oxo-ETE-GSH (OEG) metabolisieren-Addukt in LoVo Zellen, wie LC-MS/MS-Analyse best&auml;tigt. Bromdesoxyuridin (BrdU)-je Zelle Vermehrung Proben in menschliche Nabelschnur Venen Endothelzellen (HUVECs) ergab, dass die H&auml;lfte-maximale inhibitorischen Konzentration (Hemmkonzentration von 11-Oxo-ETE Hemmung der HUVEC Verbreitung war 2.1 &mu;M. Diese Ergebnisse zeigen, dass dieser 11-Oxo-ETE eine neuartige COX-2/15-PGDH-abgeleitete Eikosanoide, ist die endotheliale Zellproliferation mit einer Potenz hemmt, die &auml;hnlich wie 15d-PGJ(2) zu beobachten ist.

11-Oxoeicosatetraenoic-S&auml;ure ist ein Cyclooxygenase-2/15-Hydroxyprostaglandin-Dehydrogenase abgeleitete Antiproliferative Eikosanoide.

In precedenza, abbiamo stabilito che 11 (R) - idrossi - 5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoic acid (HETE) &egrave; stato un significativo cyclooxygenase (COX) -2-derivati metabolita acido arachidonico (AA) nelle cellule epiteliali. Stabile chirale cromatografia liquida (LC) di diluizione isotopica-ionizzazione chimica elettronica cattura pressione atmosferica (ECAPCI) / spettrometria di massa (MS) &egrave; stata utilizzata per quantificare eicosanoidi derivati COX-2 nella linea di cellule epiteliali umane adenocarcinoma del colon-retto (LoVo), che esprime sia la COX-2 e 15-idrossiprostaglandina deidrogenasi (15-PGDH). 11 (R)-secrezione HETE raggiunto concentrazioni di picco in pochi minuti dopo l&#39;aggiunta di AA prima rapidamente diminuendo, suggerendo ulteriore metabolismo si fosse verificato. Sorprendentemente, 15-PGDH ricombinante, che &egrave; normalmente specifico per ossidazione di eicosanoid 15 (S)-gruppi idrossilici, &egrave; stato trovato per convertire 11 (R) - HETE 11 - oxo-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoic acid (ETE). Inoltre, lisati cellulari LoVo convertito 11 (R)-HETE 11-oxo-ETE e inibizione del 15-PGDH con acido 5-[[4-(ethoxycarbonyl)phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic (CAY10397) (50 &mu;M) significativamente soppressa produzione endogena 11-oxo-ETE con un corrispondente aumento in 11 (R)-HETE. Questi dati confermano COX-2 e 15-PGDH come enzimi responsabili della biosintesi 11-oxo-ETE. Infine, aggiunta di AA per le cellule LoVo provocato rapida secrezione di 11-oxo-ETE in media, raggiungendo livelli di picco entro 20 min di iniziare l&#39;incubazione. Questa fu seguita da una forte diminuzione livelli 11-oxo-ETE. S-transferasi del glutatione (GSH) (GST) &egrave; stato trovato a metabolizzare 11-oxo-ETE a 11-oxo-ETE-GSH (OEG)-addotto in cellule LoVo, come confermato dalle analisi LC-MS/MS. Bromodeoxyuridine (BrdU)-dosaggi proliferazione cellulare basato in cellule endoteliali di vena ombelicale umana (HUVECs) ha rivelato che la met&agrave;-massima concentrazione inibitoria (IC(50)) di 11-oxo-ETE per inibizione della proliferazione HUVEC era 2,1 &mu;M. Questi risultati mostrano che 11-oxo-ETE &egrave; un romanzo eicosanoid COX-2/15-PGDH-derivato, che inibisce la proliferazione delle cellule endoteliali con una potenza che &egrave; simile a quella osservata per 15d-PGJ(2).

11-Oxoeicosatetraenoic acido &egrave; un eicosanoid cyclooxygenase-2/15-idrossiprostaglandina deidrogenasi-derivato antiproliferativi.

&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;11&#xFF08;R&#xFF09; - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;-5&#x3001;8,12,14  - &#xFF08;Z&#x3001;Z&#x3001;E&#x3001;Z&#xFF09; - &#x30A8;&#x30A4;&#x30B3;&#x30B5;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A8;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;HETE&#xFF09;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;COX&#xFF09;-2&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30A2;&#x30E9;&#x30AD;&#x30C9;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;AA&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#xFF09;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7523;&#x7269;&#x3002;&#x5B89;&#x5B9A;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53;&#x5E0C;&#x91C8;&#x30AD;&#x30E9;&#x30EB;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#xFF08;LC&#xFF09;&#x96FB;&#x5B50;&#x6355;&#x7372;&#x5927;&#x6C17;&#x5727;&#x5316;&#x5B66;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#xFF08;ECAPCI&#xFF09;/&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;MS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x5927;&#x8178;&#x817A;&#x764C;&#xFF08;LOVO&#xFF09;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;COX-2&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30A8;&#x30A4;&#x30B3;&#x30B5;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;COX-2&#x304A;&#x3088;&#x3073;15  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;15-PGDH&#xFF09;&#x3002; 11&#xFF08;R&#xFF09;-HETE&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x304C;&#x8D77;&#x3053;&#x3063;&#x305F;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;AA&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x6570;&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08;Z&#x3001;Z  - &#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A8;&#x30A4;&#x30B3;&#x30B5;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;15&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x306F;15-PGDH&#x3001;&#xFF08;S&#xFF09; - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x57FA;&#x3001;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-5&#x3001;8,12,14&#x301C;11&#xFF08;R&#xFF09;-HETE&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;E&#x3001;Z&#xFF09; - &#x30A8;&#x30A4;&#x30B3;&#x30B5;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A8;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;ETE&#xFF09;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;LOVO&#x30BB;&#x30EB;&#x304C;5&#x3068;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-ETE&#x3001;15-PGDH&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;11&#xFF08;R&#xFF09;-HETE&#x3092;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30FC;&#x30C8; -  [[4  - &#xFF08;&#x30A8;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30CB;&#x30EB;&#xFF09;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;]&#x30A2;&#x30BE;] -2  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D9;&#x30F3;&#x30BC;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;CAY10397&#xFF09;&#xFF08;50 &#x3BC;M&#xFF09;&#x304C;&#x6709;&#x610F;&#x306B;11&#xFF08;R&#xFF09;-HETE&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x305F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-ETE&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-ETE&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;COX-2&#x304A;&#x3088;&#x3073;15-PGDH&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;LoVo&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;AA&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;20&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x3001;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3078;&#x306E;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-ETE&#x306E;&#x6025;&#x6FC0;&#x306A;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-ETE&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6025;&#x6FC0;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#xFF08;GSH&#xFF09;S-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;GST&#xFF09;&#x306F;LC-MS/MS&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;LoVo&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;ETE-GSH&#x301C;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;ETE&#xFF08;OEG&#xFF09;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x3092;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D6;&#x30ED;&#x30E2;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#xFF08;BrdU&#xFF09;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;HUVEC&#xFF09;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;HUVEC&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;ETE&#x306E;&#x534A;&#x6700;&#x5927;&#x963B;&#x5BB3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;IC&#xFF08;50&#xFF09;&#xFF09;2.1&#x3BC;M&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;11  - &#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-ETE&#x306F;15D-PGJ&#xFF08;2&#xFF09;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;C&#x200B;&#x200B;OX-2/15-PGDH-derived&#x30A8;&#x30A4;&#x30B3;&#x30B5;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x3001;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

11-Oxoeicosatetraenoic&#x9178;&#x306F;Cyclooxygenase-2/15-hydroxyprostaglandin&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x6297;&#x5897;&#x6B96;&#x30A8;&#x30A4;&#x30B3;&#x30B5;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 11 (R)--5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoic &#xC528;&#xB4DC; (HETE)&#xB294; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; cyclooxygenase (COX)-2 &#xC124;&#xB9BD;-&#xC544;&#xB77C;&#xD0A4; &#xB3C8; &#xC0B0; (AA) &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;. &#xC548;&#xC815; &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; &#xD76C;&#xC11D; &#xD0A4; &#xB784; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (LC)-&#xC804;&#xC790; &#xCEA1;&#xCC98; &#xB300;&#xAE30;&#xC555; &#xD654;&#xD559; &#xC774;&#xC628;&#xD654; (ECAPCI) / &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (MS)&#xB294; 15 hydroxyprostaglandin&#xC640; c o X-2 &#xD6A8;&#xC18C; (15-PGDH)&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04; &#xB300; &#xC7A5; &#xC120; &#xC554; (LoVo) &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xCF55;&#xC2A4; 2 &#xD30C;&#xC0DD; eicosanoids &#xACC4;&#xB7C9; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 11 (R)-HETE &#xBD84; &#xBE44; &#xBD84; &#xC774;&#xB0B4; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC810;&#xAC10; &#xD558; &#xACE0;, &#xC81C;&#xC548; &#xB354; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; AA &#xCD94;&#xAC00; &#xD6C4; &#xCD5C;&#xACE0; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB3C4;&#xB2EC;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; 15-PGDH, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0B0;&#xD654; eicosanoid 15&#xC758; (S)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815;-&#xC218; &#xC0B0; &#xAE30; &#xADF8;&#xB8F9; 11 (R)-11 HETE-oxo &#xBCC0;&#xD658; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoic &#xC0B0; (&#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0;). &#xB610;&#xD55C;, LoVo &#xC140; lysates &#xBCC0;&#xD658; 11 (R)-HETE 11 oxo &#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0;&#xACFC; 15-PGDH 5-[[4-(ethoxycarbonyl)phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic &#xC0B0; (CAY10397)&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; (50 &mu; M)&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; 11 (R)-HETE &#xD574;&#xB2F9; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xC0DD; 11 oxo &#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; 11 oxo &#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC73C;&#xB85C; c o X-2&#xC640; 15-PGDH&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, LoVo &#xC140; AA&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xACB0;&#xACFC; &#xBD80; &#xD654;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; 20 &#xBD84; &#xC774;&#xB0B4; &#xCD5C;&#xB300; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xB85C; 11 oxo &#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0;&#xC758; &#xAE09;&#xACA9; &#xD55C; &#xBD84; &#xBE44;. &#xC774; 11 oxo &#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0; &#xB808;&#xBCA8; &#xB0A0;&#xCE74;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8; &#xB4A4;&#xB97C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. Glutathione (GSH) S-&#xC804;&#xC774; (GST) &#xC8FD;&#xC5B4;-11-oxo &#xC57C; &#xC9C0;&#xB97C; 11-oxo-&#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xC9C0;-GSH (OEG) &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;-LoVo &#xC140;&#xC5D0; adduct LC-MS/MS &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. Bromodeoxyuridine (BrdU)-&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HUVECs)&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; (11-oxo-&#xC8FD;&#xC5B4; HUVEC &#xD655;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC57C; &#xC9C0;&#xC758; IC(50))&#xB294; 2.1 &mu; M &#xD558;&#xD504; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB18D;&#xB3C4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC8FD;&#xC5B4; &#xC57C; &#xADF8; 11-&#xC625; &#xC18C;-&#xC9C0;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xCF55;&#xC2A4;-2/15 PGDH-&#xD30C;&#xC0DD; eicosanoid &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; 15d-pgj(2)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xD798;&#xACFC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

11-Oxoeicosatetraenoic &#xC0B0; cyclooxygenase 2/15 hydroxyprostaglandin &#xD6A8;&#xC18C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; antiproliferative eicosanoid &#xC774;&#xB2E4;.

Anteriormente, se estableci&#xF3; que 11 (R)-hidroxi-5, 8,12,14 - (Z, Z, E, Z)-eicosatetraenoico &#xE1;cido (HETE) era un importante ciclooxigenasa (COX)-2-derivado del &#xE1;cido araquid&#xF3;nico (AA ) metabolito en las c&#xE9;lulas epiteliales. Cromatograf&#xED;a quiral diluci&#xF3;n isot&#xF3;pica estable l&#xED;quida (CL)-captura de electrones de ionizaci&#xF3;n qu&#xED;mica a presi&#xF3;n atmosf&#xE9;rica (ECAPCI) / espectrometr&#xED;a de masas (MS) se utiliz&#xF3; para cuantificar la COX-2-derivados de eicosanoides en el adenocarcinoma colorrectal humano (LoVo) l&#xED;nea de c&#xE9;lulas epiteliales, que expresa a la vez COX-2 y el 15 de hydroxyprostaglandin-deshidrogenasa (15-PGDH). 11 (R)-HETE secreci&#xF3;n alcanz&#xF3; las concentraciones m&#xE1;ximas en cuesti&#xF3;n de minutos despu&#xE9;s de la adici&#xF3;n de AA antes disminuyendo r&#xE1;pidamente, lo que sugiere posterior metabolismo se hab&#xED;a producido. Sorprendentemente, 15-PGDH recombinante, que normalmente es espec&#xED;fico para la oxidaci&#xF3;n de eicosanoides 15 (S)-hidroxilo grupos, se encontr&#xF3; para convertir 11 (R)-HETE a 11-oxo-5, 8,12,14 - (Z, Z , E, Z)-eicosatetraenoico &#xE1;cido (ETE). Adem&#xE1;s, c&#xE9;lulas LoVo lisados &#x200B;&#x200B;convertido 11 (R)-HETE a 11-oxo-ETE y la inhibici&#xF3;n de la 15-PGDH con 5 - [[4 - (etoxicarbonil) fenil] azo]-2-hidroxi-bencenoac&#xE9;tico (CAY10397) (50 M) suprimi&#xF3; significativamente end&#xF3;gena 11-oxo-ETE producci&#xF3;n con un aumento correspondiente en 11 (R)-HETE. Estos datos confirman la COX-2 y 15 PGDH-como las enzimas responsables de la bios&#xED;ntesis de 11-oxo-ETE. Finalmente, la adici&#xF3;n de AA a las c&#xE9;lulas LoVo result&#xF3; en la secreci&#xF3;n r&#xE1;pida de 11-oxo-ETE en los medios de comunicaci&#xF3;n, alcanzando los niveles m&#xE1;ximos dentro de 20 minutos de partida de la incubaci&#xF3;n. Esto fue seguido por una disminuci&#xF3;n brusca en los niveles de 11-oxo-ETE. El glutati&#xF3;n (GSH) S-transferasa (GST) fue encontrado para metabolizar 11-oxo-ETE a la 11-oxo-ETE-GSH (OEG)-aducto en las c&#xE9;lulas Lovo, seg&#xFA;n lo confirmado por el an&#xE1;lisis LC-MS/MS. Bromodeoxyuridine (BrdU)-basados &#x200B;&#x200B;en ensayos de proliferaci&#xF3;n celular en c&#xE9;lulas humanas endoteliales de vena umbilical (HUVEC) revel&#xF3; que la concentraci&#xF3;n inhibitoria media-m&#xE1;xima (IC (50)) de 11-oxo-ETE para la inhibici&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n de HUVEC fue de 2,1 mM. Estos resultados muestran que el 11-oxo-ETE es un eicosanoide novela COX-2/15-PGDH-derived, que inhibe la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas endoteliales con una potencia que es similar a la observada para 15d-PGJ (2).

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Nathaniel W. Snyder

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