14.11
【讲师】在RNA干扰或RNAi中, 小RNA与信使RNA(mRNA)结合, 以防止蛋白质的翻译。 首先,双链RNA通过靶基因的 互补序列被合成。 它可能是一个小干扰RNA(siRNA), 长度约为22个核苷酸, 也可能是一个siRNA前体,例如短发夹RNA(shRNA)。
如果shRNA被使用,那么,细胞中的酶, 例如Dicer酶,就会把它切成siRNA, 使之与一组蛋白质结合, 这组蛋白质名为RNA诱导沉默复合物, 然后,双链就会分离。 仍然与RISC链接的那条引导链 随后会与其在mRNA中的互补序列结合。 AGO蛋白质,作为RISC中的一种酶, 随后会劈开并降解mRNA, 从而沉默靶基因。
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一个小的非编码RNA分子通过与信使RNA(mRNA)转录物结合而阻断基因表达,阻止蛋白质翻译的过程。
这一过程在细胞内自然发生,通常是通过microRNAs的活性。研究人员可以利用这一机制,通过引入合成的RNAs选择性地去激活特定的基因用于研究或治疗目的。例如,RNAi可以用来抑制癌症等疾病中过度活跃的基因。
首先,合成与目标基因互补的双链RNA可以使用不同类型的双链RNA,包括短干扰 RNA (siRNA) 和小发夹RNA (shRNA)。shRNA是一条折叠的RNA链,在一侧形成一个发夹环的双链RNA,是siRNA的前体。
然后,双链RNA通过一些方法被导入细胞,如通过载体(如修饰病毒)注射或传递。如果使用 shRNA细胞中的RNAse酶,如Dicer,将其切割成较短的siRNA,去掉发夹环。
然后siRNA与一种叫做Argonaute的酶结合,Argonaute是RISC (RNA-诱导沉默复合物)的复合物的一部分。在这里,siRNA 的两条线分开了。其中一个漂浮而另一个称为导向链,仍与RISC相连。它被称为引导链,因为这是通过互补碱基配对与mRNA结合的链,将整个RISC带到mRNA。这种结合是非常特异的,因为siRNA通常被设计成与靶向mRNA完全互补。然后Argonaute 切割并降解mRNA,防止其转化为蛋白质,从而有效地沉默基因。
【讲师】在RNA干扰或RNAi中, 小RNA与信使RNA(mRNA)结合, 以防止蛋白质的翻译。 首先,双链RNA通过靶基因的 互补序列被合成。 它可能是一个小干扰RNA(siRNA), 长度约为22个核苷酸, 也可能是一个siRNA前体,例如短发夹RNA(shRNA)。
如果shRNA被使用,那么,细胞中的酶, 例如Dicer酶,就会把它切成siRNA, 使之与一组蛋白质结合, 这组蛋白质名为RNA诱导沉默复合物, 然后,双链就会分离。 仍然与RISC链接的那条引导链 随后会与其在mRNA中的互补序列结合。 AGO蛋白质,作为RISC中的一种酶, 随后会劈开并降解mRNA, 从而沉默靶基因。
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