缓冲液是能够维持体系 pH 值稳定的溶液,即使加入强酸或强碱也能保持 pH 基本不变。在没有缓冲液的情况下,向溶液中加入强酸或强碱会导致 pH 值发生显著变化。缓冲液在日常生活中至关重要。例如,血液具有缓冲作用,能够将 pH 值维持在 7.35 至 7.45 之间,因为 pH 值高于 7.8 或低于 6.8 均可导致死亡。
那么,缓冲液是如何起作用的呢?缓冲液本质上是由一种弱酸或弱碱与其共轭碱或共轭酸组成的平衡体系。例如,由乙酸和乙酸钠配制的缓冲液。该缓冲溶液中含有弱酸及其共轭盐,后者解离生成共轭碱乙酸根离子。该溶液呈酸性,因为乙酸的酸解离常数 Ka 高于其共轭碱的碱解离常数 Kb。
请记住,解离常数 Ka 或 Kb 分别定义了酸或碱的强度,因为它是化合物在水中解离反应的平衡常数。解离常数也可以用 pKa 表示,即 Ka 的负对数,pKa 越小,酸性越强。pKb 同理,pKb 越小,碱性越强。
回到乙酸盐缓冲液,如果加入强碱(如氢氧化钠),氢氧根离子会与溶液中已有的水合氢离子发生反应。这会导致更多的乙酸与水反应,以重新达到平衡,从而生成更多的水合氢离子。如果加入强酸(如盐酸),溶液中会形成更多的水合氢离子。这些离子会与乙酸根离子反应,生成更多的乙酸。在这两种情况下,溶液的 pH 值变化都非常小。
需要注意的是,每种缓冲液都有其特定的 pH 范围,在此范围内才能有效缓冲溶液。此处展示了乙酸缓冲液的滴定曲线,其缓冲范围已被标出。该范围由 Henderson-Hasselbalch 方程确定,该方程告诉我们缓冲液的 pH 取决于弱酸的 Ka 值以及共轭碱与弱酸的浓度比。
当远离该 pH 值时,缓冲液中的弱酸或弱碱将被耗尽,从而无法再缓冲 pH 值。因此,在为实验应用选择缓冲液时,应选择其 pKa 接近所需 pH 值的缓冲液。
最后,所有缓冲液都有其缓冲容量的限度,即在 pH 值发生显著变化之前,可加入缓冲溶液中的酸或碱的量。例如,如果向乙酸和乙酸钠缓冲溶液中加入过多的酸,将会使所有的乙酸根离子质子化,并积累大量水合氢离子,从而导致 pH 值下降。
同样,如果加入过多的碱,将会使所有的乙酸去质子化,并积累大量氢氧根离子,从而导致 pH 升高。因此,缓冲能力受到弱酸及其共轭盐浓度的影响。例如,1 摩尔的乙酸盐缓冲液比 0.1 摩尔的乙酸盐缓冲液具有更高的缓冲能力。
在本实验中,您将配制并检测多种不同 pH 范围的缓冲液。随后,您将使用这些缓冲液测定一种名为中性红的 pH 指示剂的 pKa,并探究当加入核黄素结合蛋白时,中性红 pKa 的变化情况。