对黑腹果蝇(Drosophila)胚胎进行电生理记录,可分析发育中肌肉和神经元的电学特性,并表征谷氨酸能神经肌肉接头以及中枢胆碱能和GABA能突触的功能性突触形成过程。
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对黑腹果蝇(Drosophila)胚胎进行电生理记录,可分析发育中肌肉和神经元的电学特性,并表征谷氨酸能神经肌肉接头以及中枢胆碱能和GABA能突触的功能性突触形成过程。
第1部分:设备与耗材
第二部分:记录配置
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对果蝇(Drosophila)胚胎进行电生理记录需要手动操作和解剖。制备样本的健康状况以及记录质量,取决于操作者能否快速而整齐地准备好脆弱的胚胎组织,随后顺利开展实验。实验人员在尝试同时进行胚胎解剖和膜片钳电生理记录之前,应已熟练掌握这两项技术。
记录可在多种“改良标准”或“血淋巴样”(HL)任氏液中进行。这两类任氏液的主要区别在于:1)Na+ 浓度(标准任氏液为 120–135 mM,HL 任氏液为 70 mM);2)Mg2+ 浓度(标准任氏液为 4 mM,HL 任氏液为 20 mM)。标准任氏液中较高的 Na+ 浓度主要优势在于促进动作电位的传导,从而维持正常的、有节律的突触传递。而 HL 任氏液则会抑制由动作电位介导的突触传递。Mg2+ 的差异会阻断电压门控钙通道,从而改变突触传递的幅度,并使 HL 任氏液中突触传递对 Ca2+ 依赖性的范围向更高浓度偏移(Stewart 等,1994)。因此,在相同 [Ca2+] 条件下,H.......
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作者无任何利益冲突需要披露。
K.B. 由美国国立卫生研究院(NIH)资助项目 GM54544 支持。
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