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方法文章

LAD结扎:一种小鼠心肌梗死模型

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DOI:

10.3791/1438

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2009年10月14日

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本文内容

摘要

本视频演示了如何使用一种快速且可靠的模型来研究心肌缺血的病理生物学和病理生理学过程。

摘要

研究梗死和心肌缺血的模型对于探讨心肌缺血过程中急性和慢性阶段的病理生物学与病理生理学过程,以及开发和优化未来治疗方案至关重要。

在实验啮齿类动物中,有两种不同的方法可诱导心肌缺血。第一种方法是制造冷冻性梗死,这是一种快速但不精确的技术,通过将冷冻探针作用于心脏表面来实现(1-3)。使用该方法时,研究者无法确保冷冻瘢痕必然导致缺血,同时还会造成大范围的心肌损伤,引发与心肌梗死无关的病理生理学副作用。第二种方法是永久性结扎左前降支冠状动脉(LAD)。该方法通过单针缝合结扎LAD,几乎可立即形成缺血区域。通过闭合LAD,该区域的血液流动被完全阻断,而周围心肌组织则基本不受影响。这一手术操作能够模拟与梗死相关的心肌缺血所发生的病理生物学和病理生理学变化。

本视频介绍的方法展示了通过结扎左前降支(LAD)建立小鼠心肌梗死模型的手术操作。该模型适用于心肌梗死的病理生物学、病理生理学以及免疫生物学研究。该技术具有高度准确性,并与组织学切片结果具有良好相关性。

方案

从查尔斯河公司(Charles River,地址:Sandhofer Weg 7, D-97633 Sulzfeld)购买8至12周龄、体重不低于20 g的Balb/C小鼠。
小鼠在常规条件下饲养,饲喂标准小鼠颗粒饲料并自由饮水 随意摄取使用异氟烷(2%)通过诱导室对小鼠进行麻醉。

  1. 剃除颈部区域和左侧肋骨区域的毛发,并使用80%乙醇进行消毒。
  2. 将小鼠仰卧放置,并在其鼻口部覆盖面罩以维持麻醉状态。
  3. 通过夹捏尾巴和后肢足部检查反射,以确保小鼠已达到足够的麻醉深度。
  4. 在显微镜下进行正中颈部切口,分离覆盖气管的皮肤、肌肉和组织。
  5. 暴露气管后,在声门下方两个软骨环之间的组织上剪开一个小孔,以插入气管插管(图1)。使用显微外科镊夹住气管的颅侧部分,插入气管插管。观察胸壁运动,确认双肺通气良好。
  6. 呼吸频率(RR)应约为每分钟110次,吸气压为17至18 cm H₂O。2O. 小心地将小鼠翻转,使其仰卧于右侧,暴露其左侧。在第3肋间进行左侧开胸术rd 以及 4th 肋骨处小心分离组织和肌肉,使用电灼器防止出血。
  7. 小心打开胸腔,胸腔打开后,找到心脏,注意不要用任何锐器触碰肺部。随后去除覆盖在心脏表面的心包膜部分。
  8. 左前降支位于肺动脉和左心耳之间。使....

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讨论

综上所述,本视频逐步展示了左前降支结扎模型的操作过程,并指出在小鼠中进行左前降支结扎是一种易于实施的外科手术。

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披露

资金支持

本研究由汉堡大学医院(M.K.,女性资格认证资助)、德国研究基金会(S.S.,SCHR992/3-1)和国际心肺移植学会(T.D.,2009年研究奖)提供支持。

声明

所有动物均按照《实验室动物护理原则》接受人道护理,动物实验严格遵循国家医学研究学会制定的指南和规定,以及美国国立卫生研究院出版的《实验室动物护理与使用指南》(美国国立卫生研究院出版物85-23,1985年修订版)。

所有动物均购自查尔斯河实验室公司(德国苏尔茨菲尔德),并在汉堡埃彭多夫大学医院的动物饲养设施中进行饲养。动物可自由摄取标准饲料和水。

致谢

作者感谢Christiane Pahrmann提供的技术协助以及进行组织学实验。

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参考文献

  1. Atkins, B. Z., Hueman, M. T. Cellular cardiomyoplasty improves diastolic properties of injured Heart. J Surg Res. 85 (2), 234-242 (1999).
  2. Jaquet, K., KT, K. rause Reduction of myocardial scar size after implantation of mesenchymal stem....

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