研究果蝇（Drosophila）中的攻击行为

摘要

攻击行为是一种在争夺或获取资源过程中进化而来的先天性行为。这种复杂的社交行为受到遗传、激素和环境因素的影响。在许多生物中，攻击行为对生存至关重要，但在特定情境下控制和抑制攻击行为也变得愈发重要。近年来，无脊椎动物作为研究复杂社会行为遗传基础和系统生物学机制的模型系统，其应用价值日益凸显，部分原因在于这些生物展现出丰富多样的行为谱系。在配套视频中，我们介绍了一种用于分析果蝇攻击行为的方法，其设计涵盖了重要的生态行为学约束条件。具体步骤包括：制作打斗室、分离并标记果蝇、将果蝇放入打斗室以及录制打斗视频。目前，该方法正被用于鉴定与攻击行为相关的关键候选基因，并进一步阐明支配攻击行为及其他社会行为输出的神经环路机制。

方案

1. 组装腔室壁

1. 取两张普通载玻片，在两侧边缘的中点处做标记，以直边尺为引导，用金刚石切割刀在玻璃上划痕。
2. 来回滑动金刚石切割刀数次，直到听到刮擦声。
3. 用两张纸巾包裹玻璃器皿并将其置于碎玻璃回收容器上方，靠近划痕线处轻轻施加压力，划痕面朝上
   背向自己将玻片折断成两半。
4. 在一块玻璃的一条边缘上均匀涂抹足量玻璃胶，将另一块玻璃以直角垂直压接到胶粘剂上。将其放置在平坦表面（铝箔、蜡纸或普通纸）上，静置至少一小时使其固化。
5. 一小时后，重复涂布粘合剂步骤以形成方形腔室，并静置过夜使其完全固化。
   
   
   

2. 将壁置于培养皿中

1. 取一个培养皿的上半部分，倒入加热的2%琼脂糖溶液，深度至少达到5 mm（将琼脂糖加入去离子水中，用微波炉加热至完全溶解）。
2. 静置数分钟，待其仍处于溶解状态时，将 chamber 的壁结构置于培养皿中央。取培养皿的下半部分，倒置放置。使用火焰加热的直头解剖针，在培养皿中心位置打一组小孔（>1 mm），用于通风。在偏侧位置打一个较大的孔（直径约4 mm），用于将果蝇引入 chamber。用一块可移除的标签胶带盖住较大的孔。
   
   
   
   
   
   
   

3. 制作食物杯

1. 将一瓶果蝇培养基加热至完全融化。使用巴斯德移液管将培养基转移至闪烁瓶盖中，填充至顶部形成平整表面。注意避免产生气泡，并静置冷却。
2. 在研钵中加入少量干酵母和几滴水，研磨制成新鲜酵母糊。根据需要添加更多酵母或水，直至其稠度适中，能够用牙签蘸取一小滴可见的酵母糊，并将其涂抹于培养基表面中央。
3. 将装有培养基的瓶子置于观察室中央，将培养皿底部倒置（使边缘朝上，不遮挡视野）盖在观察室上方。通过顶部较大的孔口用吸管将两只3-5日龄的果蝇引入观察室内。用胶带封住该孔口，并在上方培养皿中放置一张带有直径2 cm圆孔的黑色滤纸。
4. 在观察室上方放置台灯，距离应足够远，以免加热观察室，同时调整位置以确保光照均匀覆盖培养基表面。整个装置最好置于湿度较高、温度为22-25°C的环境中。
   
   
   

4. 当两只果蝇均位于食物表面时，开始通过观察室前壁进行录像。