用于电生理研究的新生小鼠脊髓分离示例。
用于电生理研究的新生小鼠脊髓分离示例。
1. 配制人工脑脊液（aCSF）1。首先配制2升不含镁和钙的10倍浓缩aCSF储备液。所列试剂浓度单位为毫摩尔。目录编号参考Sigma/Aldrich公司产品。
| 2升10倍浓度人工脑脊液（不含Mg或Ca） | |||
| 试剂 | 毫摩尔浓度（mM） | 每2升所需克数（g/2L） | 货号 |
| KCl | 40 | 5.96 | P-9333 |
| NaCl | 1280 | 149.61 | S-7653 |
| NaHCO3 | 210 | 35.28 | S-6297 |
| NaH2PO4 | 5 | 1.38 | S-9638 |
| 葡萄糖 | 300 | 108.12 | D-9434 |
| 加蒸馏水.... | |||
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分离的新生脊髓为研究神经系统发育提供了一种可行的方法1,2。在新生啮齿类动物腰段脊髓中，中枢模式发生器回路可在神经递质存在的情况下产生拟态行走活动。这种拟态行走表现为节律性活动增强，即频率为0.2至0.5 Hz的簇状放电。这些放电活动在脊髓纵向上呈现左右交替模式，并在同侧L2与L5节段之间形成屈肌-伸肌交替放电。已有研究表明，多种小鼠基因突变可导致行为异常3-5。阐明脊髓神经回路在发育过程及遗传干扰下的改变机制，将有助于推动对中枢神经系统其他部位神经回路的研究。
值得注意的是，目前有几种常规使用的标准 aCSF 溶液。以下是常用 aCSF 配方的对照表。
表1：常用aCSF配方
| 实验室 | aCSF（人工脑脊液）成分（单位：mM） |
| Pfaff, O’D....... |
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Samuel L. Pfaff 是索尔克生物研究所基因表达实验室的教授，同时也是霍华德·休斯医学研究所的研究员。本工作由克里斯托弗和丹娜·里夫基金会资助。索尔克研究所多媒体资源部门的 Joe Belcovson、Kent Schnoeker 和 Mike Sullivan 在摄影和编辑方面提供了协助。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| KCl | P-9333 | ||
| NaCl | S-7653 | ||
| NaHCO3 | S-6297 | ||
| NaH2PO4 | S-9638 | ||
| 葡萄糖 | D-9434 | ||
| CaCl2 | C-5080 | ||
| MgSO4 | M-5921 | ||
| 大型剪刀 | Fine Science Tools | 14070-12 | |
| 镊子 | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| 精细剪刀 | Fine Science Tools | 15000-10 | |
| 昆虫针 | Fine Science Tools | 26002-10 | |
| Sylgard 184 (Dow-Corning) | |||
| 1L 容量瓶 | |||
| 100mL 容量瓶 |
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