通过闭塞内淋巴管手术诱导内淋巴积水

摘要

本视频展示了如何通过手术阻塞豚鼠的内淋巴管以产生内淋巴积水。

摘要

通过闭塞和阻断豚鼠的内淋巴管来手术诱导内淋巴积水（ELH），是一种被广泛接受的该病症动物模型，也是人类梅尼埃病的重要相关模型。1965年，Robert Kimura 和 Harold Schuknecht 首次描述了一种用于阻断内淋巴管的硬膜内入路方法（Kimura 1965）。尽管该方法有效，但由于需要穿透脑部保护膜，导致实验动物出现较高水平的并发症和死亡率，因而存在明显缺陷。因此，Andrews 和 Bohmer 开发了一种硬膜外入路方法，可显著减少与中枢神经系统（CNS）穿透相关的并发症发生率（Andrews and Bohmer 1989）。

此处所述的硬膜外入路首先需要在枕部区域做一正中切口，以暴露其下方的肌肉层。我们仅在右侧进行操作。在适当牵开覆盖的组织后，于右侧枕部肌肉层做一横向切口，以暴露右侧颞枕缝线。随后使用耳科钻头在缝线下方偏外侧的骨质区域（图1）进行钻孔，直至乙状窦显露。将乙状窦向内侧牵开后，即可暴露容纳内淋巴囊的内淋巴管骨盖。在骨盖内侧进一步向内淋巴囊区域钻孔，即可显露内淋巴管，随后用骨蜡填塞该管以造成阻塞，最终形成内淋巴积水（ELH）。

在接下来的几周内，该动物将表现出进行性、波动性的听力下降以及内淋巴积水的组织学证据。

方案

第1部分：麻醉与手术准备

1. 一只成年雌性Duncan-Hartley豚鼠（购自查尔斯河国际实验室公司，Wilmington，MA）通过肌内注射给予氯胺酮60 mg/kg和赛拉嗪12 mg/kg进行麻醉。
2. 在动物眼睛上涂抹石油润滑剂，以防止因干燥导致的角膜损伤。
3. 从头顶到肩部以及两耳之间区域进行剃毛。
4. 剃毛区域先以7.5%聚维酮碘进行无菌准备，随后使用70%乙醇。
5. 将动物置于带有加热毯的手术台上，并放置于一个可抬高头部并屈曲颈部的平台。动物头部应背向外科医生。为充分暴露枕骨嵴，必须实现足够的颈部屈曲。
6. 以无菌方式覆盖动物。

第二部分：骨性枕部的切口与暴露

1. 沿预期切口部位（枕部背侧中线皮肤切口）应用含肾上腺素的布比卡因（Marcaine）0.25%。该处理可引起局部血管收缩，减少出血，并在动物苏醒后提供持久的术后镇痛效果。
2. 在头皮枕部沿背侧中线做皮肤切口。
   

讨论

在内淋巴管手术阻塞后的数周内，实验动物会出现波动性感音神经性听力损失，通过听觉诱发电位脑干反应进行评估。图3展示了一次听觉脑干反应（ABR）记录的示例。左耳作为未手术的对照耳。

图3： 一只豚鼠术后28周在16 kHz频率下的ABR听阈水平。左耳（未手术耳）的听阈为30 dB SPL，右耳（手术耳）的听阈接近70 dB。

耳蜗的组织学检查还显示Reissner膜扩张（图4）。