Method Article

在小鼠体内的横向主动脉缩窄

DOI:

10.3791/1729

April 21st, 2010

In This Article

Summary

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横向主动脉缩窄(TAC)的鼠标是一种常用的实验模型研究的内在机制,心肌肥厚和心力衰竭的发展。在这里,我们描述程序,创建一个小鼠心肌肥厚的重复性程度的主动脉。

Abstract

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横向主动脉缩窄(交咨会)在小鼠压力超负荷引起的心肌肥厚和心力衰竭是一种常用的的实验模型。

Protocol

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第1部分:操作现场的制备

  1. 操作现场消毒用75%异丙醇。
  2. 确保加热垫,并在合适的温度是。一个推荐系统是一个Gaymar循环水泵连接到一个治疗垫,保持在37 ° C ± 1 ° C。重要的是要在手术过程中保持正常体温,以避免在心率迅速下降。
  3. 在炎热珠手术前灭菌消毒外科手术工具。对于此过程,您将需要手术器械:钝剪刀,当然弯钳× 2,罚款45 ° × 2,角度弹簧剪刀,胸部拉钩和持针器,直角钳。
  4. 棉花施药应在出血的情况下的手。

第2部分:对小鼠的制备和插管

  1. 小鼠是麻醉诱导室与2%异氟醚0.5 -1.0升/分钟100%O 2的混合。
  2. 卷发器是用来刮胡子的皮草,从领口到中期胸部水平。
  3. 鼠标被放置在一个加热垫上面的仰卧姿势,以保持体温。
  4. 橡皮筋的是放置在动物的前牙颈部延长。一方面在使用弯钳,舌头轻轻地操纵到了一边。另一方面,进行气管插管,使用了PE 90管。气管内管,然后连接到一个哈佛量循环灭鼠呼吸机在125-150次/分钟骑自行车和潮气量的0.1 -0.3毫升。在手术过程中,麻醉维持在1.5-2%异氟醚为0.5 - 1.0 L / min的100%O 2 。麻醉正确的验证鼠标钉床(趾捏反射)施加压力。
  5. 与70%的酒精优碘溶液消毒手术野。此过程重复三次。
  6. 为....

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Discussion

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交咨会,它模仿人类的​​主动脉瓣狭窄,是一种常见的方法诱导小鼠心肌肥厚和心脏衰竭。主动脉缩窄的其他地点包括升序和腹主动脉。升主动脉缩窄提供了一个极端,更迅速地的超负荷左心室(LV)的。相比之下,腹主动脉缩窄叶完整的作为一个可能的补偿手段的流通的较大部分。因此,交咨会往往是首选模式,因为它提供了足够的低压过载时间依赖性的方式更适合调查。虽然此程序可以在技术上具有挑战性与实践,我们已经取得了野生型小鼠的80%-90%的成活率。

横向主动脉缩窄的松紧程度决定了肥大的发展程度和时限,心脏衰竭和扩张发展。此外,小鼠的年龄影响回收率和心脏衰竭的发展动力。年纪较大的老鼠(> 12月龄)需要更长的时间开发一种适应性反应,交咨会的颈动脉,并有可能发展扩张型心肌病的速度比年轻的老鼠(3-4个月的年龄)5

小鼠的非侵入性插管需要一些练习。另一种方法是如下:

  1. 一个小的中线颈椎切口是钝的剪刀和组织,用弯钳,以揭露气管气管周围隔开。
  2. 一块缝合周围放置的门牙,轻轻拉远离动物的尸体,以.......

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Acknowledgements

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XHTW是WM凯克基金会杰出青年学者在医学研究中,也是由NHLBI /美国国立卫生研究院拨款HL089598 R01 - R01 - R01HL091947,和肌肉萎缩症协会授予#69238支持。 RJvO是2008-2010年美国生理学学会在生理基因组学博士后奖学金收件人。这项工作是支持部分由Leducq基金会CaMKII在心脏信号的联盟。

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Gaymar T/pump哈佛仪器型号 TP-500循环水泵
温度治疗垫哈佛仪器60-3414
热珠消毒器精细科学工具18000-45
钝剪刀Roboz 手术器械公司RS-5980
斜角弹簧剪刀Roboz Surgical Instruments Co.RS-5668
胸部牵开器Fine Science Tools17002-02
课程弯曲镊子Roboz Surgical Instruments Co.RS-5138
Dumont fine 45° 斜镊子Fine Science Tools11253-25
持针Fine Science Tools12565-14
电动剃须刀GE Healthcare用于剃须鼠毛
PE 90 管BD Biosciences427420用于插管
MiniVent (呼吸机)哈佛仪器类型 845
BetadineFisher Scientific19-027132可在医疗用品商店购买
无菌手套Mckesson20-1565
体视显微镜UnicoZM186
6-0 丝线缝合精细科学工具18020-60
27 ½量规针BD Biosciences 305109
6-0 prolene 缝合线 Mckesson3286
丁丙诺啡机构动物设施
器 线

References

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  1. Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J. Jr, Chein, K. R. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).
  2. Heineke, J., Molkentin, J. D.

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