程序性电刺激可用于评估心脏的传导特性，并通过不同的起搏方案诱导和终止心律失常。利用经静脉导管，在小鼠中实施程序性电刺激方案后，可获取心内电图记录，以识别致心律失常的基质。
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摘要
摘要
转基因小鼠已成为研究传导异常、心房和心室心律失常以及心脏性猝死分子机制的优选动物模型。1通过将一根1.1F八极导管插入小鼠颈静脉并推进至右心房和右心室，可对其进行心内起搏研究。本文展示了在小鼠中进行程序性电刺激的步骤。同时记录体表心电图以及心房、房室交界区和心室心肌的腔内电图，同时使用外部刺激器对心房进行心内起搏。因此，小鼠的程序性电刺激为探索传导障碍和心律失常的分子机制提供了独特的机会。
方案
第1部分：手术准备
- 如果在小鼠中进行程序性电刺激实验作为可存活手术，则需要无菌条件。然而，最常见的实验类型为终点性实验，此类实验采用常规清晰的外科技术即可。
- 使用2%异氟烷与0.5 L/min的100% O2对小鼠进行麻醉。
- 使用毛发剪将小鼠颈部至胸部中段的毛发剪除。
- 将麻醉后的小鼠仰卧固定，四肢用胶带固定在加热板（Indus Instruments, Houston, TX）集成的ECG电极上。手术区域使用10%聚维酮碘进行消毒。推荐使用直肠温度探头连接温控加热垫，并由热分析系统调控，以维持小鼠体温在37.0 °C ± 1.0 °C。
第2部分. 右心房和右心室的插管及电生理导管置入
- 通过夹捏脚趾确认小鼠已完全麻醉后，在正中线右侧做一长约1/2英寸的切口，切口尾端位于锁骨水平。
- 通过钝性分离皮下组织、唾液腺和淋巴组织，以暴露右侧颈静脉。
- 用6-0缝线结扎静脉近端。轻拉此缝线可在插入导管时保持颈内静脉平直。在可视段静脉远端下方另置一根缝线，待导管在心脏内达到理想位置后，将此缝线绑扎于导管周围，以确保止血并固定导管于所需位置（图1）。
- 启动基于计算机的数据采集系统，同步记录体表心电图和4通道心内电图（例如IOX-2采集软....
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讨论
在心脏导管术过程中，导管插入期间大量出血可能因低血容量导致心率增加。此时，腹腔注射无菌生理盐水（0.3–1.0 mL）可恢复正常充盈压，减轻小鼠的血流动力学应激。
暴露于异氟烷的时间超过2小时，或使用较高浓度的异氟烷（>2%），可能会抑制小鼠的心脏和呼吸功能。因此，建议所有实验均在2小时以内完成。此外，必须始终将体温维持在正常范围37.0 ± 1.0°C内。低体温和高体温均会影响心律以及潜在致心律失常基质的存在。
每次实验都应从测定心房起搏阈值开始。在进行心房起搏时，应测定心房阈值、窦房结恢复时间（SNRT）、心房有效不应期（AERP）和房室结有效不应期（AVNERP），以评估窦房结、房室结及心房组织的传导特性是否正常。
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致谢
X.H.T.W. 是 W.M. Keck 基金会医学研究杰出青年学者，获得美国国立卫生研究院/国家心肺血液研究所（NIH/NHLBI）R01-HL089598 和 R01HL091947 项目资助，以及肌营养不良协会（Muscular Dystrophy Association）#69238 号资助。本研究还部分得到了 Leducq 基金会 CaMKII 心脏信号传导联盟（Fondation Leducq Alliance for CaMKII Signalling in Heart）的支持。N.L. 获得了心律学会（Heart Rhythm Society）2009-2010 年度 Michel Mirowski 心脏起搏与电生理国际奖学金以及 2009-2012 年美国心脏协会博士后奖学金。
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参考文献
- Nattel, S., Shiroshita-Takeshita, A., Brundel, B. J., Rivard, L. Mechanisms of atrial fibrillation: lessons from animal models. Prog Cardiovasc Dis. 48, 9-9 (2005).
- Verheule, S., Sato, T., Everett, T. t, Engle, S. K., Otten, D., Rubart-von der Lohe, M., Nakajima, H. O., Nakajima, H., Field, L. J., Olgin, J. E.
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