冈比亚按蚊（A. gambiae）的饲养方案

摘要

本视频展示了在实验室中饲养冈比亚按蚊的一般技术。通过该生物体从幼虫到蛹再到吸血成虫的整个生命周期，演示了实验室蚊虫饲养的各个环节。

摘要

本方案描述了在昆虫饲养室中进行蚊虫饲养的步骤。昆虫饲养室需维持在28°C和约80%的湿度，并保持12小时光照与12小时黑暗的循环条件。进行该操作时，您需要蚊虫饲养笼、10%无菌蔗糖溶液、纸巾、烧杯、Whatman滤纸、玻璃饲喂器、人血和血清、水浴锅、Parafilm封口膜、蒸馏水、干净的塑料托盘、蚊虫食物（如下所述）、覆盖托盘用的蚊帐、真空泵以及用于收集成虫的收集装置。

方案

蚊虫食物：

1. 食物A：碾碎的鱼食（Aquaricare）。需加入少量。
2. 食物B：碾碎的猫粮（Purina）。需加入少量。
3. 食物C：猫粮（Purina）。需加入两片。

血液：

可用于饲养蚊子的血液包括动物或人血。用注射器采集新鲜血液后，放入无菌的15 ml Falcon离心管中，每10 ml血液加入1 ml CPD（抗凝剂），轻轻混匀，然后在室温下以2000 rpm离心5分钟。弃去上清液，注意去除含有其他血细胞（如白细胞）的白膜层。将红细胞沉淀用移液管重悬于等体积的RPMI培养基中，并在此培养基中再洗涤三次。最后一次洗涤后，将沉淀的红细胞重悬于等体积的RPMI培养基中，4°C保存（可保存8–10天）。喂食前，将RPMI中的红细胞以2000 rpm离心5分钟，使细胞成团，然后将压紧的红细胞重悬于血清（O+型人血清）中，制备成40%的血细胞比容。喂食过程中血液必须始终保持在37°C。

第1天：

1. 使用3至5日龄的成年雌蚊进行血液饲喂以促使其产卵。
2. 血液饲喂采用人工膜（Parafilm）饲喂法，步骤如下：
   
   
   1. 将红细胞（血液制备方法见上文）与热灭活血清混合，配制约为40%的血细胞比容（压积红细胞占40%，血清占60%），并将该混合液加入玻璃饲....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
食物A		Aquaricare		研磨的鱼食。需加入少量。
食物B		Purina		研磨的猫粮。需加入少量。
食物C		Purina		猫粮。需加入两片。
RBC				制备的红细胞：含40%红细胞压积的人血清
RPMI	培养基
CPD				抗凝剂
血清				O+型人血清
蚊子饲喂装置
石蜡膜
Anopheles gambiae				蚊子
10%蔗糖				蚊子食物
昆虫饲养室