利用可活细胞计数评估致病细菌对番茄幼苗根部的定殖情况

摘要

来源： Matthysse， A. G. 实验室测量细菌对植物表面的附着情况。 J. Vis. Exp.，（2018）

本视频演示了测量野生型和纤维素缺乏致病菌对番茄幼苗根部定殖的方案。紧密附着细菌的可活计数显示野生型菌株的附着力和微菌落形成更强，凸显纤维素在稳定根系定殖中的作用。

方案

1. 利用可行细胞计数测量粘附力

1. 确定在沙子中生长的植物上结合的活性细菌数量
   1. 将植物从容器中取出并打磨。要从容器中取出植物，首先要去除容器顶部和底部的密封材料。将容器放在无菌纸上，轻轻将容器敲击表面以松动材料，将整个沙子或土壤和植物作为一个大锥形圆柱体取出。

1. 如有必要，使用刮刀或棒子松开容器底部进入边缘的材料。

2. 当装有植物的沙子或土壤圆柱体在纸上自由时，将纸从中间劈开，露出植物的根。如有需要，可以从容器边缘和根部附近取样。这有助于确定细菌的扩散（以及积累和生长）。
3. 测量根部的长度。将根部取下，将根部浸入定量水或缓冲液中，轻轻摇晃，去除松散附着在根部（根际物质）上的沙子和细菌。通过在合适的培养基（如Luria琼脂）上进行电镀，确定该悬浮液中细菌的存活细胞数。这代表与根部松散关联的细菌数量。
4. 通过超声波去除紧密结合的细菌，并确定其数量。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
种子	任何	无	记下种子批号和品种
沙子	海沙费舍尔科学	S25
沙子	西格玛-奥尔德里奇	S9887
锥形者	斯图威与子公司	雷-利奇锥-封闭器	市面上有许多不同尺寸的植物可供选择，适合你想种植的植物类型
巴斯超声器	任何科学供应公司	无
副胶片	任何科学供应公司	无