从大肠杆菌中纯化质粒DNA是分子克隆的核心技术。从小于5 ml的细菌培养物中进行小规模纯化（质粒小提）是一种快速验证克隆或分离DNA的方法，随后可进行进一步的酶促反应（如聚合酶链式反应和限制性内切酶消化）。本文通过QIAGEN的QIAprep 8 Miniprep试剂盒，对质粒小提的一般操作流程进行了视频记录，旨在向分子生物学技术初学者介绍这一高效的方法。整个流程基于大肠杆菌细胞的碱裂解法，随后在高盐条件下使DNA吸附于二氧化硅基质。该方法包括三个步骤：1）细菌裂解液的制备与澄清，2）DNA在QIAprep膜上的吸附，3）质粒DNA的洗涤与洗脱。所有步骤均无需使用苯酚、氯仿、氯化铯、溴化乙锭，也无需酒精沉淀。通常在2小时以内即可完成全部操作。
关键词：质粒DNA纯化，大肠杆菌，分子克隆，质粒小提，碱裂解法，QIAprep 8 Miniprep试剂盒，二氧化硅吸附，DNA分离