方法文章

剖检诊断，并选择在大鼠和小鼠的组织和样品收集

DOI：

10.3791/2966

⸱

2011年8月7日

 ,  ,  ,  ,  , 
1Research Animal Diagnostic Services, Charles River, 2Research Models and Services, Charles River, 3Department of Comparative Medicine, University of Washington

本文内容

摘要

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

本文介绍了进行基本的鼠标或大鼠尸检的程序，以及收集的基本器官，以及更多具有挑战性的样品类型，病理，微生物，和PCR评价。

摘要

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

有多个样品，可以收集从安乐死的动物，以帮助诊断或发现的动物群中的传染性病原体的类型。妥善收集进一步组织处理的组织可能会影响测试结果的质量。本文介绍了一个基本的总检查，包括识别心，肝，肺，肾，和脾，以及如何收集这些机关的行为。另外四个较困难的组织/样品采集技术演示。龙收集和灌注可以特别具有挑战性的组织需要正确的膨胀，在组织内部的秩序固定液适当的修正，以便彻底的组织学评价。本文演示了由一步一步的技术，以实现在24小时内组织的最佳固定删除肺和固定液膨胀。脑集合可以用同样的挑战，组织是软的，容易损坏。本文演示了通过一步一步的技术，从颅骨与脑组织损害最小的揭露和消除。肠系膜淋巴结是一个很好的样本类型，在其中发现许多常见的传染性病原体为肠道病毒持续在淋巴结，比他们在粪便棚。本文演示的定位，并在无菌条件下取出肠系膜淋巴结的一步一步程序。最后，呼吸道传染性病原体的鉴定可以由鼻腔和/或吸在剖检支气管液的细菌培养或PCR测试。此过程介绍了获取和准备进行细菌培养和PCR检测呼吸道吸出样品。

方案

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1。剖检的准备工作

  1. 任何总尸检（总尸检）的重要组成部分，是动物的历史和调查结果的描述。
  2. 一个兽医病理学家读您的组织病理学幻灯片可能没有见过的动物，是靠你的背景资料。
  3. 准确描述你所看到之前安乐死的动物。例如，“雌性小鼠在笼子里五之一; C57BL/6N;头部倾斜的权利”或“棕色的雄性大鼠应变未知;动物刮伤;有斑片状脱发足背附近的尾巴，和头“。
  4. 使用清晰的，描述性的，客观的的语言。 “温和”，“温和”，并“严重”等修饰词可能是有用的，如果水平之间的截止分明。一般不建议在食品或家用物品描述事物。
  5. 度量衡动物，研究成果，或器官通常是有用的。一个“大脾”，你可能是一个正常的脾脏另一名观察员。说，脾措施3 ×1.5厘米提供更客观的信息。
  6. Photodocumentation可以是无价的。
  7. 遵守所有有关的职业健康和活的动物，可能具有传染性的尸体，或福尔马林等化学品的工作所需的个人防护装备。

2。毛死后的位置和心脏检查，肺，肝，肾和脾

  1. 收集必要物资的动物实施安乐死之前。最低限度，这应该包括一个夹层板或类似的工作表面，镊子，剪刀，容器标签，固定液，任何媒体或收集管/杯，可能有潜在需要。
  2. 简要评估的条件，行为和动物的运动。观察并记录呼吸模式（例如，快速，浅）以及日间能力和步态（例如，跛行，转圈，震颤）。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

讨论

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

在研究结束的数据收集可能需要的动物尸检。说明什么是见过，记得检查所有的组织。这些程序设计主要是为了优化剖检传染病的监测和样品采集，但最容易适应怀疑疾病的事件或聘用爆发也许只是一个程序的一个子集，将重点调查。很多手续也较常用在研究结束时，作为一个整体形态再加上收集特定的研究样本以供后续分析评估的一部分进行验尸有关。

....

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

披露

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

作者是查尔斯河实验室啮齿类动物诊断实验室，这些服务提供商业的所有员工。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
试剂名称公司目录编号评论
菜板热电公司猫＃36114 CAT＃36114
小剪刀 ROBOZ RS - 5910，G204 23毫米刀片，3.5“长，直
中等剪刀 ROBOZ RS - 6808，G207 5“
大剪刀 ROBOZ RS - 6826，G65“ 6.25“
钳弯 ROBOZ RS - 8254（M1/21004） 4.5英寸，锯齿，轻微的曲线
镊子，Microdissecting ROBOZ RS - 5238 哈德森（埃瓦尔德）
钳，组织钳 ROBOZ RS - 8160 鼠齿
火焰消毒器牛津大学医学实验产品 Bacti的焚尸炉＃5889-001007
解剖刀癌症诊断， 手指解剖刀＃60，＃FS0060猫
移液器 VWR 巴斯德吸取5 3 / 4“，猫＃14672-400
高压灭菌袋正确的制造公司灭菌袋纸包装袋猫＃021002（3100923）E09110 对于巴氏吸管
移液器灯泡 VWR CAT＃56310-240
Eppendorf管 Sarstedt SafeSeal微管2ML，楼盘编号72.695
Eppendorf管雅高 5ML微管猫＃T20765 - C
注射器 BD（Beckton迪肯森） 1毫升- 309602 3猫ML - 300910 5ML - 309603 10ML 20ML猫＃309604＃309661
针屋宇署 26G - 309625 18G - 305195
中性缓冲福尔马林 VWR 20L NBF 10％，猫＃16004-128
盐水 ThermoScientific 缓冲血库生理盐水，猫＃23-309-178
胰酪胨大豆肉汤流式细胞迪肯森 TSB：脱水​​，猫＃211825
磷酸盐缓冲液西格玛爱秩序房委会的缓冲区，CAT＃P3813 - 10PAK
福尔马林杯 VWR 4盎司猫＃36318-8528盎司猫＃36318-86016盎司猫＃36318-858
大型福尔马林杯橡树岭产品 32盎司容器猫＃0432-1100
超大福尔马林杯 VWR 高密度聚乙烯多用途160盎司容器猫＃89038-282
缝合材料亨利施恩手术缝合线编织丝绸，楼盘编号100-5000，M766750 对于鼠标肺胀
缠绕斯台普斯猫＃QUA - 46173 对于大鼠肺胀

参考文献

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. AVMA. AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
  2. Feldman, D. B., Seely, J. C. Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , CRC Press. (1988).
  3. King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. The Necropsy Book. , 4th edn, C.L. Davis Foundation. (2006).
  4. Kittel, B. <....

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

重印与许可

申请许可以重复使用本 JoVE 文章的文本或图表

申请许可

标签

相关文章