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本视频介绍了用于培养中枢神经系统(CNS)神经元的微流控装置的制备与使用方法。该装置适用于活细胞光学显微镜观察(微分干涉相差显微镜DIC和相差显微镜),以及共聚焦显微镜和双光子显微镜成像。该方法采用精密模压聚合物部件,构建具有流体隔离功能的微型多区室细胞培养系统。区室由微小通道构成,其尺寸足够支持在高度可控的流体微环境中培养神经元。神经元可在该装置内培养2至3周,之后可进行固定和免疫细胞化学染色。通过施加微小的静水压差,可实现轴突区室与胞体区室之间的流体隔离;该特性可用于在每次更换培养基后,将可溶性刺激因子局限作用于某一区室长达20小时。流体隔离还使得纯轴突组分的收集及后续PCR等生化分析成为可能。该微流控装置为神经科学研究提供了高度可调的实验平台,有望应用于中枢神经系统损伤和神经退行性病变的建模研究。
微流控装置,神经元培养,中枢神经系统,流体隔离,活细胞成像,免疫细胞化学,轴突,微流控芯片,神经退行性疾病,神经损伤