果蝇卵巢解剖实验方案
- 在解剖果蝇前1-2天，用酵母喂养果蝇，以使卵巢充分发育。
- 使用二氧化碳气流麻醉果蝇。
- 用一对镊子选取一只雌性果蝇。
- 将雌性果蝇浸入1X PBS溶液中。
- 用一对镊子夹住果蝇的下部胸节。
- 用另一对镊子轻轻拉扯其腹部末端，直至暴露腹腔内的内部器官。
- 寻找一对卵巢，并将其与其他器官（如肠道）分离。
- 若卵巢将用于免疫染色或原位杂交实验，需将卵泡管分离展开。
- 在解剖下一只果蝇时，将已分离的卵巢保存在冰上预冷的1X PBS溶液中。
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本文内容
方案
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讨论
本文演示了一种黑腹果蝇（Drosophila）卵巢的解剖方法。由于目前尚未建立果蝇卵巢中各类细胞类型的培养方法，因此该方法是一种快速获取果蝇卵巢组织的有效手段。本质上，我们展示了果蝇卵巢的解剖过程仅需简单的两步或三步操作。后续对这些解剖所得卵巢的处理则取决于即将进行的下游实验。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 | |
|---|---|---|---|---|
| 镊子 | 工具 | Sigma-Aldrich | T43537 | |
| 玻璃解剖皿 | 工具 | Pyrex | 7220-85 |
参考文献
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).
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